本文關(guān)鍵詞：響應(yīng)葡萄根瘤蚜侵染的擴(kuò)展蛋白基因篩選及其多克隆抗體的制備，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：以對(duì)葡萄根瘤蚜敏感的‘克瑞森無核’葡萄(Vitis vinifera ‘Crimson Seedless’)組培苗和抗性砧木‘1103P’組培苗為試材,通過熒光定量PCR技術(shù)從擴(kuò)展蛋白基因家族中篩選到經(jīng)根瘤蚜侵染后表達(dá)上調(diào)的擴(kuò)展蛋白基因家族成員VvEXPA1。采用RT-PCR方法克隆到VvEXPA1基因片段,連接至原核表達(dá)載體pET-32a中,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DE3菌株,測序確定構(gòu)建的重組載體pET32a-VvEXPA1開放閱讀框正確,并經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)了融合蛋白。該蛋白以包涵體的形式存在,純化后免疫新西蘭兔,制備擴(kuò)展蛋白多克隆抗體,通過Western-blot和ELISA檢測抗體的特異性及效價(jià)。結(jié)果顯示制備的抗體具有較高的特異性,ELISA顯示效價(jià)為1:51 200。
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝科學(xué)與工程學(xué)院 作物生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;齊魯工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 葡萄 根瘤蚜 擴(kuò)展蛋白 VvEXPA 多克隆抗體制備
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31201609) 山東省中青年科學(xué)家基金項(xiàng)目(BS2012NY007) 山東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(ZR2013CQ022) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金項(xiàng)目(20113702120007)
【分類號(hào)】：S436.631.21
【正文快照】： 葡萄根瘤蚜(Daktulosphaira vitifoliae Fitch)是葡萄專性寄生害蟲,侵染敏感葡萄品種后,侵染位點(diǎn)周圍細(xì)胞開始加速生長(Kellow et al.,2004;Du et al.,2011),細(xì)胞體積加速膨大(杜遠(yuǎn)鵬,2010),外觀上表現(xiàn)為產(chǎn)生膨大的瘤狀組織(Forneck et al.,2001),根瘤蚜在瘤狀組織上取食并完

  本文關(guān)鍵詞：響應(yīng)葡萄根瘤蚜侵染的擴(kuò)展蛋白基因篩選及其多克隆抗體的制備，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：504680