結(jié)核分枝桿菌標準株H37Rv mazEF3基因過表達菌株的構建及初步鑒定
發(fā)布時間:2017-06-26 20:02
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【摘要】:為構建H37Rv mazEF3基因的過表達菌株,檢測過表達菌株mazEF3 mRNA表達水平。使用穿梭質(zhì)粒pMV361,把mazEF3基因連入其中,構建重組質(zhì)粒pMV361-mazEF3;利用電穿孔技術,將穿梭表達質(zhì)粒導入H37Rv中,并將該菌涂在卡那霉素培養(yǎng)基上初步篩選,提取陽性菌株質(zhì)粒進行PCR、雙酶切后送公司測序進一步驗證;檢測不同電轉(zhuǎn)電壓下mazEF3 mRNA表達水平,尋找最佳電轉(zhuǎn)電壓。結(jié)果顯示,成功構建H37Rv mazEF3基因的過表達菌株,PCR、雙酶切后目的基因,測序結(jié)果與已知mazEF3基因比對,同源性100%。實時熒光定量檢測,電轉(zhuǎn)電壓為2300V時,構建的過表達菌株mazEF3 mRNA表達量最高。由此可知,成功構建及初步鑒定了mazEF3 mRNA過表達菌株,電轉(zhuǎn)電壓為2300V時,構建的過表達菌株mazEF3 mRNA表達量最高。
【作者單位】: 石河子大學醫(yī)學院病原生物學與免疫學教研室;
【關鍵詞】: 結(jié)核分枝桿菌 mazEF 毒素-抗毒素系統(tǒng) 過表達
【基金】:國家自然科學基金項目(81341079,81560262)
【分類號】:R378.911
【正文快照】: 結(jié)核病(tuberculosis,TB)是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)感染引起的慢性傳染病,是一個嚴重的公共衛(wèi)生問題。結(jié)核病發(fā)病人數(shù)始終位居甲、乙兩類傳染病前列,每年死亡人數(shù)超過200萬。隨著人口流動性的增加、MTB耐藥率的增加、艾滋病等免疫缺陷疾病日益增多,結(jié)
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1 李靖云;胡瑞;杜秋妹;尹相云;王婷婷;王東輝;張立國;;死亡受體6的胞內(nèi)結(jié)構域?qū)ζ鋪喖毎ㄎ坏恼{(diào)節(jié)[J];生物物理學報;2014年02期
2 ;[J];;年期
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本文編號:487379
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