雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook.f.）是一種重要的藥用植物,具有抗癌、抗炎、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等作用,并具有較強(qiáng)的殺蟲活性。雷公藤紅素（celastrol）是雷公藤最具代表性的三萜物質(zhì),藥理活性高,作用廣泛,極具開發(fā)價值。鯊烯合酶（Squalene synthase,SQS）、鯊烯環(huán)氧酶（Squalene epoxidase,SE）、環(huán)氧角鯊烯環(huán)化酶（Oxidosqualene cyclases,OSC）被認(rèn)為是三萜類次生代謝途徑中的關(guān)鍵限速酶,是三萜合成生物學(xué)研究的重要元件之一。根據(jù)前期對雷公藤根轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的分析設(shè)計(jì)引物,克隆得到1個鯊烯合酶（TwSQS）、2個鯊烯環(huán)氧酶編碼（TwSE1、TwSE2）、4個環(huán)氧角鯊烯環(huán)化酶（TwOSC1、TwOSC2、TwOSC3、TwOSC4）基因,對它們進(jìn)行基本生物信息學(xué)分析。熒光定量PCR（real-time PCR）方法檢測它們在雷公藤不同組織部位的表達(dá)模式,以及在雷公藤發(fā)狀根中受茉莉酸甲酯（MeJA）誘導(dǎo)處理后基因的表達(dá)量變化,結(jié)合HPLC檢測雷公藤紅素含量的變化。主要結(jié)果如下:1.TwSQS基因的開放閱讀框（Ope...

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圖1-1MVA和MEP生物合成途徑Figure1-1BiosyntheticpathwayofMVAandMEP實(shí)線表示一步反應(yīng)；虛線表示多步反應(yīng)Solidlinerepresentsonestepreaction;ThedottedlinerepresentsamμLti-stepreaction

磷酸（glyceraldehyde-3-phosphate,GA3P）作為原料，二者縮合后，經(jīng)過各級酶催化經(jīng)轉(zhuǎn)酮酶催化聚合成1-去氧木糖-5-磷酸（1-deoxy-DxylμLose-5-phosphate,DXP）這一體，經(jīng)異構(gòu)化和還原等反應(yīng)，形....

圖1-2三萜生物合成途徑Figure1-2Biosyntheticpathwayoftriterpenoid

圖1-2三萜生物合成途徑Figure1-2Biosyntheticpathwayoftriterpenoid三萜合成途徑關(guān)鍵酶雷公藤三萜合成途徑?jīng)]有系統(tǒng)的研究報道，但雷公藤三萜合多被研究報道了，HMGR(WUetal.2012)、GPPS(Zhangeta....

圖1-3雷公藤紅素的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig1-3Chemicalformulaofcelastrol

圖1-3雷公藤紅素的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig1-3Chemicalformulaofcelastrol理活性中，尤其以抗癌、抗炎活性最為顯著，自從中美癌新機(jī)制以來(Yangetal.2006)，引發(fā)了雷公藤紅素的抗多研究表明，雷公藤紅素對多種癌癥具有抗腫瘤作用，等幾十....

圖2-1雷公藤根總RNAM:DL2000;1,2:ThetotalRNA

圖2-1雷公藤根總RNAM:DL2000;1,2:ThetotalRNA-1TotalRNAextractionofrootinTripterygiu因克隆與生物信息學(xué)分析基因克隆據(jù)庫篩選出的鯊烯合酶基因序列，設(shè)cDNA為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增....

本文編號：4033460