水稻紋枯病是世界范圍內(nèi)水稻最嚴(yán)重的病害之一,嚴(yán)重影響水稻生產(chǎn)。水稻紋枯病抗性屬于數(shù)量遺傳性狀,且易受環(huán)境影響,迄今為止還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高抗或免疫的水稻材料。我們實(shí)驗(yàn)室前期人員通過(guò)對(duì)水稻紋枯病相對(duì)抗病品種YSBR1與感病品種Lemont接種紋枯病菌進(jìn)行芯片分析,篩選出109個(gè)差異表達(dá)基因(包括類(lèi)受體激酶以及轉(zhuǎn)錄因子等),然后以水稻品種泰粳394為受體,創(chuàng)制一系列相應(yīng)的RNAi轉(zhuǎn)基因系材料,經(jīng)過(guò)大田紋枯病接種鑒定,篩選獲得水稻紋枯病抗性相關(guān)基因OsSBR1本研究包括創(chuàng)制紋枯病抗性相關(guān)基因OsSBR1的轉(zhuǎn)基因株系并進(jìn)行水稻離體葉片紋枯病接種鑒定、該基因編碼蛋白的亞細(xì)胞定位、該基因的組織特異性表達(dá)以及比較轉(zhuǎn)錄組分析等內(nèi)容。主要研究結(jié)果為:(1)創(chuàng)制紋枯病抗性相關(guān)基因OsSSBR1基因RNAi轉(zhuǎn)基因株系、過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系、基因敲除株系,進(jìn)行離體葉片紋枯病菌接種抗性鑒定。通過(guò)對(duì)接種樣品的病斑掃描來(lái)計(jì)算相對(duì)病斑面積,利用qPCR方法檢測(cè)紋枯病菌相對(duì)含量,從而對(duì)水稻發(fā)病程度進(jìn)行定量分析。與對(duì)照比較,OsSBR1-RNAi株系、OsSBR1基因敲除水稻株系,均對(duì)水稻紋枯病表現(xiàn)顯著抗病。而OsSBR1過(guò)表達(dá)株系比...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖１植物免疫反應(yīng)原理圖??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐｌａｎｔ?ｉｍｍｕｎｅ?ｒｅｓｐｏｎｓｅ??

圖１植物免疫反應(yīng)原理圖??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐｌａｎｔ?ｉｍｍｕｎｅ?ｒｅｓｐｏｎｓｅ??如圖１所示ｔｌＧ３］，植物免疫反應(yīng)過(guò)程主要包括：Ａ：由ＰＲＲｓ識(shí)別病原物的ＰＡＭＰｓ，??激發(fā)植物產(chǎn)生ＰＴＩ；?Ｂ：病原物進(jìn)化出能夠抑制植物ＰＴＩ的....

圖２．５?份ｉ７－ＲＮＡｉ株系紋枯病接種樣品的病斑掃描??Ｆｉｇ．?２．?５?Ｄ?ｉ?ｇ?ｉ?ａ?Ｉ?

注２：數(shù)值表示平均值士標(biāo)準(zhǔn)差。三次重復(fù)。??注３：?ＲＮＡｉ株系和對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)基因受體材料進(jìn)行成對(duì)ｔ檢驗(yàn)，星號(hào)表示顯著性差異（＊＊Ｐ＜?０．０１）。??圖２．?２?ＲＮＡｉ株系中伽基因相對(duì)表達(dá)量??Ｆｉｇ．?２．２?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＯｓＳＢＲＩ?ｇｅｎｅ....

圖２．８?基因過(guò)表達(dá)株系紋枯病接種樣品的病斑掃描??

面積接近葉片面積的一半；而ＱＨＹ１３－４、ＱＨＹ１３－８、ＱＨＹ１３－１２離體葉片上面病斑蔓??延面積要少于轉(zhuǎn)基因受體材料徐稻３號(hào)，表明Ｏｄ扮？／基因過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系具有感??病表型。如圖２．８Ｂ，?ＱＨＹ１６－２、ＱＨＹ１６－７、ＱＨＹ１６－１１離體葉片上面病斑蔓延面積要??少....

圖３．?３?ＰＣＲ檢測(cè)??

利用帶有酶切位點(diǎn)的引物克隆扣？／基因的ＣＤＳ區(qū)域，通過(guò)Ｓａｌ?Ｉ和Ｓａｃ?１酶??切連接到ＰＸＧＪ７０線性載體中，形成用于探宄扣？／基因表達(dá)位置的亞細(xì)胞定位載??體ＰＱＨＹ１８?（圖３．２）。經(jīng)過(guò)ＰＣＲ凝膠電泳檢測(cè)和測(cè)序都驗(yàn)證ｐＱＨＹ１８載體構(gòu)建成功??（圖?３．３）。??——３....

本文編號(hào)：4018879