二化螟Chilo suppressalis(Walker)是水稻上重要的農(nóng)業(yè)害蟲之一,在全世界范圍內(nèi)均有發(fā)生。蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)產(chǎn)生的殺蟲晶體蛋白具有殺蟲活性,可通過生物農(nóng)藥和轉(zhuǎn)Bt基因作物的方式應(yīng)用到有害生物的防治中,研究靶標害蟲對Bt蛋白的防御機制非常有必要。MAPK(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信號通路廣泛存在于生物體中,在細胞的生長、發(fā)育、分化以及凋亡中都發(fā)揮著重要的作用。ERK基因在MAPK信號通路中發(fā)揮著重要作用。本研究通過RNAi技術(shù)研究CsERK在二化螟防御Cry1Ca蛋白過程中的作用,主要研究結(jié)果如下:1.利用RT-PCR結(jié)合RACE技術(shù)克隆二化螟ERK基因并獲得cDNA序列全長。CsERK1基因序列全長1,892 bp,開放閱讀框(Open Reading Frame,ORF)序列為1,209 bp,編碼403個氨基酸,預(yù)測蛋白的分子量為44.51 kDa;CsERK2基因序列全長2,015 bp,ORF序列為1,092 bp,編碼364個氨基酸,預(yù)測蛋白的分子量為41...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1 二化螟的發(fā)生和危害
    2 轉(zhuǎn)Bt基因作物的產(chǎn)生和發(fā)展
    3 Bt蛋白的作用機理
        3.1 成孔模型
        3.2 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)模型
        3.3 昆蟲對Bt蛋白的防御機制
    4 MAPK信號通路
    5 ERK
    6 論文設(shè)計
        6.1 技術(shù)路線
        6.2 目的與意義
第二章 ERK基因的克隆與序列分析
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 序列特征分析
        3.2 序列同源性分析
    4 討論
第三章 ERK基因的時空表達
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 qRT-PCR引物特異性檢測
        3.2 ERK基因的時間表達模式
        3.3 ERK基因的空間表達模式
    4 討論
第四章 ERK基因在應(yīng)對Cry1Ca防御反應(yīng)中的作用研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 不同Cry1Ca濃度誘導(dǎo)MAPK信號通路中ERK表達分析
        3.2 飼喂法檢測二化螟對Cry1Ca蛋白的敏感性
        3.3 二化螟取食轉(zhuǎn)基因水稻T1C-19的敏感性檢測
    4 討論
第五章 結(jié)論
    1 結(jié)論
    2 創(chuàng)新點
參考文獻
致謝



本文編號：3979135