蟬擬青霉(Pfaecilomyces cicadae)作為一種在我國研究較早的昆蟲病原真菌,其對鱗翅目、半翅目等農(nóng)業(yè)害蟲具有致病能力。然而該菌基礎(chǔ)研究,尤其是致病機理知之甚少,在一定程度上限制了該菌在害蟲生物防治上的應(yīng)用。鑒于此,本研究對蟬擬青霉基因組進行測序,篩選毒力相關(guān)基因,鑒定了 18個蟬擬青霉幾丁質(zhì)酶基因,并對這些基因的分類、結(jié)構(gòu)域、表達模式進行了分析。本研究結(jié)果對進一步闡述蟬擬青霉的致病機制、提高其防治效果和應(yīng)用潛力具有重要的理論研究意義和實際應(yīng)用價值。主要研究結(jié)果如下:(1)蟬擬青霉菌株ZJ1611的基因組G+C含量為53.11%,基因組大小約為33.8 Mb,共包括11106個基因。與其他昆蟲病原真菌基因組比較顯示蟬擬青霉的基因組大小與蛹蟲草(Cordyceps militaris)和球孢白僵菌(Beauveria bassiana)基因組相似,但小于綠僵菌屬病原真菌(Metarhizium robertsii、M.anisopliae和M.acridum)基因組。(2)從蟬擬青霉基因組中篩選出了41類蛋白家族共464個毒力相關(guān)基因。對挑選出的不同侵染階段的蟬擬青霉16個...

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【學位級別】：碩士

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圖２基因敲除載體的構(gòu)建流程圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２?Ｔｈｅ?ｆｌｏｗ?ｃｈａｒｔ?ｏｆ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｇｅｎｅ?ｋｎｏｃｋ?ｏｕｔ?ｖｅｃｔｏｒ??

Ｂ?（Ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ?Ｂ，ＨＰＨ）（濃度分別為?０、１００、２００、３００、４００、??５００?ｎｇ／ｍＬ）和草甘膦（Ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ，ＰＭＧ）（濃度分別為?０、１００、２００、３００、４００、??５００?ｍｍｏｌ／Ｌ）的ＰＤＡ平板上，每個濃度重復(fù)三次，１５?ｄ后觀察菌....

圖７蟬擬青霉１６個毒力基因的轉(zhuǎn)錄水平檢測??Ｆｉｇｕｒｅ?７?Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ?Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ?ｏｆ?１６?ｃｉｃａｄａｅ?ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ?ｇｅｎｅｓ??

．１９?－?ｆｏｒｋｈｅａｄ?（ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ）?３，４??ＰＣｐｔａ?１１９．２４?１０８８?７．８８?－?Ｐ－ｔｙｐｅ?ＡＴＰａｓｅ?４??注：基因特征及所參與的反應(yīng)階段參照表４。??４．３．２蟬擬青霉毒力基因的轉(zhuǎn)錄水平檢測及表達模式分析??根據(jù)昆蟲....

圖１５不含有ＤＮＡ模板的ＰＣＲ產(chǎn)物凝膠電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ?１５?Ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ＤＮＡ?ｔｅｍｐｌａｔｅ??

的ＭＭ培養(yǎng)基中生長的菌絲??體）；ＣＨ丨（在含有１％幾丁質(zhì)的ＭＭ培養(yǎng)基中生長的菌絲體）；丨＞Ｘ?（在含有０．５％小菜蛾蟲體粉末的ＭＭ培養(yǎng)基??中生長的菌絲體）；ＡＭ?（自溶培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲體）；Ｃ?（分生孢子）；ＡＰ?（誘導(dǎo)的附符胞）：ＢＳ?（誘導(dǎo)的芽生孢??子）。ＤＮＡ?（以基....

圖１９蟬擬青霉基因的敲除策略??Ｆｉｇｕｒｅ?１９?Ｔｈｅ?ｄｅｌｅｔｉｏｎ?ｍｕｔａｎｔ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｇｅｎｅｓ?ｆｒｏｍ??

ＣＫ?ｌＯＯｐｇ／ｍＬ?２Ｑ０｜ｑｇ／ｍＬ?３ＱＯ｜ｑｇ／ｍＬ?４Ｑ〇ｎｇ／ｍＬ?５ＱＯ｜ｉｇ／ｍＬ??ＳＵＬ?ＩＩ?ＩＴ??圖丨８蟬擬青霉對潮霉素Ｂ和草甘膦濃度的敏感性實驗??Ｆｉｇｕｒｅ?１８?Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ?ｔｅｓｔ?ｏｆ?Ｐ．ｃｉｃａｄａｅ?ｆｏｒ?ｈｙｇｒｏｍｙ....

本文編號：3978618