發(fā)布時間：2024-04-25 05:04

　　環(huán)境污染問題越來越嚴重,其中土壤重金屬對環(huán)境的污染日益加深,而土壤重金屬污染治理與防治對確保障農(nóng)作物的安全和產(chǎn)量有著重要意義。該實驗課題主要研究擬南芥線粒體蘋果酸脫氫酶基因mMDH2在調(diào)控鎘脅迫響應(yīng)中的功能研究,其表達可被外源添加的CdCl₂抑制。然而,其在鎘脅迫信號下的一些功能以及應(yīng)答機制尚不清楚。為此,圍繞此問題進行了深入研究,具體研究結(jié)果如下:1.擬南芥T-DNA插入突變體mmdh2-1、mmdh2-2植株在CdCl₂脅迫條件下與WT植株相比,其表現(xiàn)出耐受,說明擬南芥中的mMDH2基因可能在鎘脅迫條件下發(fā)揮重要作用。2.構(gòu)建mMDH2過表達載體。使用特異性引物,通過PCR克隆mMDH2基因,將其連接到帶有35S啟動子的載體上;然后將35S::mMDH2載體轉(zhuǎn)入到農(nóng)桿菌GV3101菌株中,最后將其轉(zhuǎn)入野生型的擬南芥體內(nèi),篩選獲得陽性過表達植株。3.分析在Cd脅迫下mMDH2過表達植株的表型,發(fā)現(xiàn)與野生型相比,其表現(xiàn)敏感,表明擬南芥mMDH2基因在鎘脅迫應(yīng)答中起負調(diào)控作用。4.DAB染色結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),在鎘脅迫處理條件下,mmdh2突變體植株...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1蘋果酸脫氫酶同源分析

如圖3.1C所示。表明它與擬南芥中的其他蘋果酸脫氫酶顯示出較低的同源性。圖3.1蘋果酸脫氫酶同源分析。A.擬南芥MMHD2和不同植物的MDH蛋白的氨基酸序列比對；B.MMHD2基因與不同植物MDH基因的系統(tǒng)進化樹；C.擬南芥中MMHD2基因與其他MDH....

圖3.2擬南芥mMDH2基因組織特異性表達

第三章結(jié)果與分析芥mMDH2基因組織特異性表達的研究中，我們發(fā)現(xiàn)編碼細胞質(zhì)蘋果酸脫氫酶的CMDH4耐受性[82]。為了確定線粒體蘋果酸脫氫酶mMDH2基因是否作用，首先檢測了mMDH2基因在擬南芥不同組織中的表，擬南芥不同的組織中，不同的基因轉(zhuǎn)錄水平不盡相同，影....

圖3.3mMDH2基因在鎘誘導(dǎo)下被抑制

圖3.3mMDH2基因在鎘誘導(dǎo)下被抑制。Fig3.3mMDH2geneisinhibitedbycadmium.mMDH2-GUS材料的構(gòu)建基因啟動子擴增MDH2基因表達模式，我們構(gòu)建了擬南芥PromMDH如圖3.4A所示。首先，在擬南芥TAI....

圖3.4mMDH2基因啟動子克隆

因啟動子克隆。A.PromMDH2-GUS載體結(jié)構(gòu)；B.mMDH圖。fmMDH2geneclone.A.StructureofPromMDH2-GUS;Bcloneelectropherogram.2-GUS重組載體陽性菌株鑒定的啟動子片段從瓊脂糖凝膠中切....

本文編號：3964048