草莓(Fragaria×ananassa Duch.)是薔薇科草莓屬多年生草本植物。草莓的果實中含有大量類黃酮物質(zhì)。花青素為其中主要的類黃酮物質(zhì),其保健功能和經(jīng)濟價值均值得重視。研究發(fā)現(xiàn)WRKY家族成員擬南芥TTG2和矮牽牛PH3均參與植物體內(nèi)花青素和原花青素的生物合成�；赪ei和Zhou等對二倍體森林草莓中WRKY家族成員鑒定結(jié)果,通過BLAST確定栽培草莓FaWRKY44為擬南芥TTG2與矮牽牛PH3的同源基因,實驗證明同源基因FaWRKY44也參與植物體內(nèi)花青素和原花青素的生物合成。本研究得到以下結(jié)論:(1)通過克隆得到FaWRKY44基因的CDS區(qū)1407bp,生物信息學(xué)分析顯示其蛋白的分子量為116.29kD,無信號肽和跨膜結(jié)構(gòu)。通過亞細胞定位確定該基因位于細胞核�？寺〉玫紽aWRKY44啟動子序列2000bp,生物信息學(xué)分析顯示啟動子含有響應(yīng)光、逆境脅迫、植物激素等順式作用元件。(2)運用熒光定量構(gòu)建FaWRKY44表達譜,結(jié)果如下:該基因在功能葉表達量最高,全紅果實中表達量最少;表達量受藍光抑制;對于低鉀、ABA、鹽害、干旱、低磷和低溫逆境均有規(guī)律性表達。(3)原核表達...

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圖1-1常見的花青素糖苷配基的化學(xué)結(jié)構(gòu)[21]

3圖1-1常見的花青素糖苷配基的化學(xué)結(jié)構(gòu)[21]Fig.1-1Chemicalstructuresofthecommonanthocyanidinaglycons[21]1.2.2花青素的生物合成花青素的合成主要受結(jié)構(gòu)基因和調(diào)節(jié)基因控制，結(jié)構(gòu)基因即編碼類黃酮途徑中各種酶類的基因，....

圖1-2花青素生物合成途徑[24]

4參與花青素生物合成的酶可作為限速酶影響整體合成途徑的效率，同時，也可影響整個通路的穩(wěn)定性。這類可作為限速酶的結(jié)構(gòu)基因主要有PAL、CHS、DFR和ANR等。圖1-2花青素生物合成途徑[24]Fig.1-2Anthocyaninsbiosyntheticpathway[24]1.....

圖1-3WRKY家族的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)和典型WRKY蛋白的工作機制（A）WRKY蛋白的代表性域組織（B）WRKY蛋白的3D結(jié)構(gòu)及其與基因啟動子上的W-box的結(jié)合[49]

6許多人的發(fā)現(xiàn)了WRKY家族新成員甚至新亞科。例如，已發(fā)現(xiàn)4個擬南芥WRKY融合其他結(jié)構(gòu)域，一類富含亮氨酸的重復(fù)序列N端的域（At4G12020，At5g45050，At5G45260），和一類N末端的BDP1結(jié)構(gòu)域（At1G55600）。圖1-3WRKY家族的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)和典型W....

圖2-3FaWRKY44原核表達載體重組質(zhì)粒圖：

17處理的草莓樣品以及草莓不同時期不同組織的樣本的RNA并進行反轉(zhuǎn)錄（方法同上）。定量所用儀器采用CFX96（Bio-Rad，USA），引物FaWRKY44q（表1）使用BeaconDesigner8設(shè)計。定量體系采用10μL體系：SYBRPremix5μL，上下游引物各0.4μ....

本文編號：3936293