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煙芽夜蛾囊泡病毒RT-qPCR內(nèi)參基因的篩

發(fā)布時間:2024-03-12 18:45
  囊泡病毒是一類主要感染甜菜夜蛾Spodoptera exigua、斜紋夜蛾Spodoptera litura、棉鈴蟲Helicoverpa armigera等鱗翅目夜蛾科幼蟲的雙鏈環(huán)狀DNA昆蟲病毒,宿主幼蟲感病后表現(xiàn)出明顯的“急性致病”、“慢性致死”癥狀。自然界中,囊泡病毒主要通過寄生蜂的產(chǎn)卵行為進(jìn)行傳播,在甜菜夜蛾等重要害蟲的生物防治領(lǐng)域具有較好的潛在應(yīng)用價值,但就分子機理研究而言相對缺乏。本論文就煙芽夜蛾囊泡病毒Heliothis virescens ascovirus(HvAV)傳播體系中各組件RT-qPCR內(nèi)參基因開展了篩選工作,并且以新發(fā)現(xiàn)的毒株煙芽夜蛾囊泡病毒3i株(HvAV-3i)為例,結(jié)合其他已報道的毒株基因組學(xué)和蛋白組學(xué)進(jìn)行了系統(tǒng)的比較分析,主要研究結(jié)果如下:1、囊泡病毒RT-qPCR內(nèi)參基因篩選以煙芽夜蛾囊泡病毒3h株(HvAV-3h)為例,取病毒血淋巴(5.6×108 pfu/ml)以10-0、10-2、10-4、10-6和10-8...

【文章頁數(shù)】:118 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-1囊泡病毒傳播體系中各內(nèi)參基因表達(dá)水平

圖2-1囊泡病毒傳播體系中各內(nèi)參基因表達(dá)水平

和28S則表現(xiàn)出較大變化幅度。根據(jù)圖3-1B所示,當(dāng)甜菜夜蛾感染囊泡病選內(nèi)參基因中,整體而言表達(dá)量變化幅度較穩(wěn)定,Ct值最低為12.44(2分散程度最大(6.75),ACT1則最為穩(wěn)定。根據(jù)圖3-1C顯示,當(dāng)病毒侵肪體細(xì)胞系后,28S(13.67)和EF1(27.0....


圖2-2甜菜夜蛾9個候選內(nèi)參基因geNorm分析

圖2-2甜菜夜蛾9個候選內(nèi)參基因geNorm分析

蛾9個候選內(nèi)參基因geNorm分析。10-0病毒濃度(A)、10-2(C)、10-6病毒濃度(D)、10-8病毒濃度(E)、綜合所有濃度M值,綜合所有濃度樣品所需內(nèi)參基因最適數(shù)目(G)。Validationof9candidatereferencegenes....


圖2-3斯氏側(cè)溝繭蜂6個候選內(nèi)參基因geNorm分析

圖2-3斯氏側(cè)溝繭蜂6個候選內(nèi)參基因geNorm分析

綜合排名DeltaCtgeNormNormFinderB幾何平均值排名標(biāo)準(zhǔn)差排名M值排名穩(wěn)性值排名標(biāo)準(zhǔn)-fold)4.1641.1960.6450.8850.-fold)8.0081.0680.7680.9481.f....


圖2-4甜菜夜蛾脂肪體細(xì)胞系9個候選內(nèi)參基因geNorm分析

圖2-4甜菜夜蛾脂肪體細(xì)胞系9個候選內(nèi)參基因geNorm分析

-6倍病毒濃度下最不適合作為內(nèi)參基因(圖2-4A,B,C,D)。綜合所有樣品分析得到EF1/L10為最穩(wěn)定的兩個內(nèi)參基因,28S則排名墊底(圖2-4E),但所有內(nèi)參基因M值均小于1.5。從變異系數(shù)分析表明,各病毒濃度處理下的甜菜夜蛾脂肪體細(xì)胞均能選取排名靠前的兩個基因....



本文編號:3926713

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