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水稻類(lèi)病斑基因SPL36的克隆與功能分析

發(fā)布時(shí)間:2024-02-17 23:42
  植物類(lèi)病斑是在沒(méi)有生物或非生物脅迫情況下自發(fā)產(chǎn)生的壞死斑,對(duì)類(lèi)病斑突變體的研究可以剖析細(xì)胞程序性死亡以及植物防御反應(yīng)相關(guān)途徑的調(diào)控機(jī)制。本研究通過(guò)EMS化學(xué)誘變處理水稻粳稻品種云稻,從誘變得來(lái)的突變體庫(kù)中篩選到一個(gè)可穩(wěn)定遺傳類(lèi)病斑表型的突變體spl36。利用生理生化和細(xì)胞學(xué)等實(shí)驗(yàn)手段探究基因SPL36如何出現(xiàn)細(xì)胞程序化死亡(PCD),利用圖位克隆等方式將SPL36定位并通過(guò)測(cè)序比對(duì)發(fā)現(xiàn)SPL36突變位點(diǎn),另外針對(duì)確定的候選基因進(jìn)行功能互補(bǔ)、組織表達(dá)分析、亞細(xì)胞定位等相關(guān)實(shí)驗(yàn)。通過(guò)接菌實(shí)驗(yàn)和防御相關(guān)基因的表達(dá)量分析進(jìn)一步探究SPL36功能缺失對(duì)植株抗病性的影響。最后對(duì)SPL36編碼的的蛋白功能進(jìn)行分析并進(jìn)行一系列的鹽處理實(shí)驗(yàn),探究SPL36是否參與鹽脅迫逆境應(yīng)答。我們實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,spl36突變體出現(xiàn)細(xì)胞程序性死亡和葉片的提前衰老,SPL36參與程序性細(xì)胞死亡并通過(guò)上調(diào)防御相關(guān)基因在spl36突變體中誘導(dǎo)了防御反應(yīng)。同時(shí),水稻SPL36可能負(fù)調(diào)控鹽脅迫相關(guān)反應(yīng)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),我們發(fā)現(xiàn)的新的類(lèi)病斑突變體spl36將有助于闡明細(xì)胞程序性死亡和抗病性的調(diào)控途徑以及水稻耐鹽的機(jī)制。具體研究結(jié)果如...

【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1水稻類(lèi)病變發(fā)生的可能機(jī)制及其影響

圖1.1水稻類(lèi)病變發(fā)生的可能機(jī)制及其影響

第一章文獻(xiàn)綜述7圖1.1水稻類(lèi)病變發(fā)生的可能機(jī)制及其影響Fig1.1Possiblemechanismofricelesionmimicmutationanditsimpact.1.6已報(bào)道的水稻類(lèi)病變基因及其功能研究人員使用T-DNA、轉(zhuǎn)座子和反轉(zhuǎn)座子插入誘變、圖位克隆等方法克....


圖3.1野生型云稻和突變體spl36的表型分析

圖3.1野生型云稻和突變體spl36的表型分析

第三章結(jié)果與分析21第三章結(jié)果與分析3.1spl36的表型特征圖3.1野生型云稻和突變體spl36的表型分析(A)分蘗期野生型和突變體spl36表型差異,標(biāo)尺為6厘米;(B)分蘗期野生型和突變體spl36葉片的表型,標(biāo)尺為2厘米;(C)遮光實(shí)驗(yàn)中突變體spl36遮光前后表型,標(biāo)尺....


圖3.3野生型和突變體spl36的葉綠體超微結(jié)構(gòu)和葉綠素含量及凈光合速率

圖3.3野生型和突變體spl36的葉綠體超微結(jié)構(gòu)和葉綠素含量及凈光合速率

第三章結(jié)果與分析23分蘗盛期的葉綠素含量測(cè)定發(fā)現(xiàn),突變體spl36的葉綠素a、葉綠素b相比于野生型都極顯著下降。我們進(jìn)一步對(duì)該時(shí)期植株光合速率測(cè)定,結(jié)果表明突變體的凈光合速率顯著降低。葉綠體是光合作用的主要場(chǎng)所,我們推測(cè)光合速率和葉綠素含量的變化是由于葉綠體的結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化[73....


圖3.4野生型和突變體spl36生理生化檢測(cè)

圖3.4野生型和突變體spl36生理生化檢測(cè)

第三章結(jié)果與分析24氧(ROS)積累會(huì)導(dǎo)致氧迸發(fā),從而致使細(xì)胞受到損傷甚至觸發(fā)細(xì)胞程序性死亡[75]。H2O2的含量和過(guò)氧化物酶(POD)的活性則與ROS的積累有著直接的關(guān)系,超氧化物歧化酶(SOD)是植物體中具有清除O2-的重要作用。通過(guò)對(duì)H2O2含量,POD活性和SOD活性的....



本文編號(hào):3901520

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