近年來,結(jié)直腸腫瘤的高發(fā)病率和高死亡率使其成為當今世界臨床腫瘤學(xué)上迄待解決的難題。腫瘤表觀遺傳學(xué)研究中,抑癌基因的缺失和失調(diào)普遍被認為是腫瘤發(fā)生和發(fā)展的重要機制。G蛋白受體信號通路作為腫瘤發(fā)病機制研究中的關(guān)鍵信號調(diào)節(jié)通路之一被廣泛關(guān)注,而G蛋白受體信號通路調(diào)節(jié)蛋白(RGS)蛋白在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的重要性也被逐漸認識。目的:G蛋白受體信號通路調(diào)節(jié)蛋白RGS17,可通過激活Gα蛋白水解蛋白,終止G蛋白受體信號通路。已有研究證明,該基因與許多其他類型腫瘤相關(guān),但其在結(jié)直腸腫瘤中的研究卻很少見到。本研究的目的就是探究RGS17在結(jié)直腸腫瘤中表達水平的變化,這種變化具體起到何種作用,對腫瘤的進展有沒有影響及其具體機制。方法:利用RT-PCR和Western-blot研究RGS17的在結(jié)直腸腫瘤細胞中的表達水平;運用免疫組化實驗及統(tǒng)計學(xué)分析評估RGS17在結(jié)直腸腫瘤組織中的表達水平及其與腫瘤臨床病理特征的關(guān)聯(lián)性;通過穩(wěn)定轉(zhuǎn)染構(gòu)建RGS17穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株進行增殖、遷移、鈣離子濃度檢測、凋亡實驗評估RGS17對腫瘤細胞的生理性功能的調(diào)節(jié)能力,利用Western-blot摸索RGS17對細胞信號通路及相關(guān)蛋...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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英文摘要
縮略語及中英文對照
1 引言
2 材料與方法
    2.1 實驗試劑和儀器
    2.2 人結(jié)直腸組織標本
    2.3 細胞培養(yǎng)
    2.4 動物飼養(yǎng)
    2.5 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染RGS17的大腸癌細胞株的構(gòu)建
    2.6 半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)
    2.7 CCK-8法檢測細胞生存活力
    2.8 平板克隆形成實驗
    2.9 細胞劃痕實驗
    2.10 TRANSWELL細胞遷移實驗
    2.11 流式細胞儀檢測細胞凋亡
    2.12 流式細胞儀檢測細胞周期
    2.13 流式細胞儀檢測胞質(zhì)鈣離子濃度
    2.14 蛋白免疫印跡(WESTERN-BLOT)分析
    2.15 免疫組化及其分析方法
    2.16 人大腸癌裸鼠皮下種植瘤模型
    2.17 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 RGS17在結(jié)直腸腫瘤細胞中低表達
    3.2 RGS17在結(jié)直腸腫瘤組織中低表達
    3.3 RGS17與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征及預(yù)后因素的相關(guān)性研究
    3.4 RGS17抑制結(jié)直腸腫瘤細胞增殖和遷移能力
    3.5 RGS17轉(zhuǎn)染后對結(jié)直腸腫瘤細胞凋亡能力的影響
    3.6 RGS17對CASR及胞質(zhì)鈣離子濃度的影響
    3.7 RGS17通過CASR調(diào)節(jié)WNT/B-CATENIN信號途徑及細胞凋亡
    3.8 RGS17對結(jié)直腸腫瘤細胞體內(nèi)成瘤能力的影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
個人簡介



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