褪黑素是一種吲哚胺類激素,廣泛存在于大多數(shù)有機(jī)體中。作為一種抗氧化劑和自由基清除劑,褪黑素可參與調(diào)節(jié)動(dòng)、植物體內(nèi)多種生理功能。人體可通過(guò)外源攝入褪黑素含量豐富的水果以增加血液中內(nèi)源褪黑素含量和抗氧化能力。葡萄作為一種經(jīng)濟(jì)栽培果樹,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富,目前有關(guān)葡萄中內(nèi)源褪黑素含量變化的研究不多。本研究調(diào)查了不同脅迫條件和不同發(fā)育時(shí)期對(duì)葡萄內(nèi)源褪黑素含量的影響,并且對(duì)葡萄中褪黑素合成基因進(jìn)行初步的篩選,結(jié)合qRT-PCR技術(shù)分析果實(shí)不同發(fā)育階段褪黑素合成基因的表達(dá)模式,進(jìn)一步探究褪黑素及其前體物質(zhì)的含量與褪黑素合成基因之間的相關(guān)性;此外還克隆了葡萄5-羥色胺-N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(SNAT)基因的CDS序列,采用原核表達(dá)系統(tǒng)在大腸桿菌中誘導(dǎo)該基因產(chǎn)生可溶性蛋白,初步研究了葡萄SNAT基因的特性和酶學(xué)功能。主要研究結(jié)果如下:1.干旱脅迫和鹽脅迫下葡萄幼苗根系和葉片中褪黑素含量較對(duì)照組均顯著增加,且脅迫程度越強(qiáng)增幅越大。用120 mmol/l的Nacl溶液處理葡萄幼苗,6 d后幼苗根系和葉片中褪黑素含量分別達(dá)到627.25和3220.42 pg/g,均為相應(yīng)對(duì)照組幼苗根系和葉片中褪黑素含量的7倍。10%聚...

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 褪黑素概述
    1.2 植物中褪黑素的研究進(jìn)展
        1.2.1 植物中褪黑素的合成路徑
        1.2.2 植物中褪黑素的含量
        1.2.3 植物中褪黑素的生理功能
    1.3 植物中褪黑素合成基因SNAT的研究進(jìn)展
    1.4 研究目的及意義
第二章 干旱和鹽脅迫下葡萄幼苗不同組織褪黑素含量分析
    2.1 材料和方法
        2.1.1 主要試劑及儀器
        2.1.2 植物材料
        2.1.3 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 褪黑素含量測(cè)定方法分析
        2.2.2 脅迫條件下葡萄幼苗根部和葉片中褪黑素含量的變化
    2.3 討論
第三章 果實(shí)發(fā)育期褪黑素含量變化及其相關(guān)基因表達(dá)分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 褪黑素及其合成前體物質(zhì)的提取與檢測(cè)
        3.1.3 RNA提取與qRT-PCR檢測(cè)相關(guān)基因表達(dá)量
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 ‘美樂(lè)’葡萄果實(shí)發(fā)育期褪黑素及其前體物質(zhì)含量的變化
        3.2.2 ‘美樂(lè)’葡萄果實(shí)發(fā)育期褪黑素合成酶基因表達(dá)量的變化
    3.3 討論
第四章 葡萄SNAT基因的原核表達(dá)分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗(yàn)材料
        4.1.2 菌株與質(zhì)粒
        4.1.3 試驗(yàn)方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 葡萄SNAT基因序列的分析
        4.2.2 葡萄SNAT氨基酸序列同源性比較及聚類分析
        4.2.3 葡萄SNAT基因的原核表達(dá)
        4.2.4 重組蛋白酶學(xué)特性分析
    4.3 討論
第五章 全文結(jié)論
    5.1 主要結(jié)論
        5.1.1 不同脅迫條件下葡萄幼苗褪黑素含量變化
        5.1.2 不同發(fā)育期葡萄果實(shí)褪黑素及其前體物質(zhì)含量變化
        5.1.3 不同發(fā)育期葡萄褪黑素合成基因表達(dá)模式
        5.1.4 葡萄SNAT基因的原核表達(dá)及酶活分析
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 下一步工作展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3774044