發(fā)布時(shí)間：2023-03-11 09:09

　　目的過表達(dá)GATA-4基因的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)外泌體(BMSC^GATA-4-外泌體)可以促進(jìn)BMSC向心肌樣細(xì)胞分化,但其分子機(jī)制不詳。文章探討過表達(dá)BMSC^GATA-4-外泌體通過miRNA-673-5p/Tsc-1分子軸促進(jìn)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的機(jī)制。方法將BMSC-外泌體、BMSC^空載體-外泌體、BMSC^GATA-4-外泌體、 BMSC^{miR-673-5p-mimic}-外泌體、BMSC^{miR-673-5p-inhibitor}-外泌體小鼠建模后48 h經(jīng)尾靜脈注入,分別作為BMSC組、空載體組、GATA-4組、模擬組、抑制組,每組3只;另設(shè)置梗死未處理組(建模,未給予任何exosome處理)及正常組(不建模)作為對照,各3只。采用心臟彩超檢測各組心功能。采用RT-PCR檢測梗死后心肌細(xì)胞內(nèi)miRNA-673-5p表達(dá)。同時(shí)提取相同梗死部位心肌組織,采用RT-PCR檢測心肌α-actin、CX43、Desmin、cTnT表達(dá)。采用Wester...

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
0 引 言
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠BMSC的分離、培養(yǎng)及鑒定
        1.2.2 構(gòu)建過表達(dá)GATA-4基因BMSC
        1.2.3 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2.4 小鼠心肌梗死模型的建立
        1.2.5 細(xì)胞的分組及處理
        1.2.6 檢測各組心肌細(xì)胞內(nèi)miRNA-673-5p及心肌細(xì)胞α-actin、CX43、Desmin、cTnT表達(dá)
        1.2.7 采用數(shù)據(jù)庫明確miRNA-673-5p的靶基因
        1.2.8 Western blot檢測
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 小鼠BMSC三系分化結(jié)果
    2.2 慢病毒轉(zhuǎn)染小鼠BMSC后24 h GATA-4的表達(dá)
    2.3 采用心臟彩超評估心功能改變
    2.4 RT-PCR檢測各組心肌細(xì)胞內(nèi)miRNA-673-5p表達(dá)
    2.5 RT-PCR檢測各組心肌梗死后心肌細(xì)胞內(nèi)心肌細(xì)胞特異性分子表達(dá)
    2.6 Western blot檢測各組相同心肌梗死部位心肌細(xì)胞內(nèi)miRNA-673-5p對應(yīng)靶基因蛋白的表達(dá)
3 討 論



本文編號：3759597