目的:胰腺癌作為消化系統(tǒng)腫瘤,惡性程度極高,發(fā)病率和病死率呈現(xiàn)出持續(xù)上升的趨勢。組織學(xué)上,大約90%的胰腺癌為胰腺導(dǎo)管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC),起源于胰腺導(dǎo)管上皮。胰腺癌在發(fā)病早期缺乏典型的臨床癥狀,極容易被誤診或漏診,確診時往往已經(jīng)出現(xiàn)局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,失去手術(shù)時機(jī)。這種腫瘤的中位生存率小于6個月,且預(yù)后極差。人星形膠質(zhì)細(xì)胞升高基因1(astrocyte elevated gene 1,AEG-1)編碼一個含有582個氨基酸的蛋白。AEG-1蛋白主要分布于細(xì)胞核周圍和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)區(qū)域,該蛋白含有一個跨膜通道和三個結(jié)構(gòu)域負(fù)責(zé)富含賴氨酸的核定位信號。在人類的多種惡性腫瘤中,經(jīng)常檢測到有AEG-1升高,包括子宮內(nèi)膜癌、肝細(xì)胞癌、膠質(zhì)瘤等,并導(dǎo)致較差的臨床預(yù)后。早期關(guān)于功能得、失的研究顯示,在多種惡性腫瘤中,AEG-1的高表達(dá)與促進(jìn)腫瘤生長、血管生成及腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)。但是在胰腺癌中的致癌機(jī)制仍然不清楚。雖然有研究表明在PDAC細(xì)胞系及胰腺癌組織中,AEG-1的mRNA和蛋白的表達(dá)均較高,但是其對AEG-1在胰腺癌致癌機(jī)制中的作用,并沒有進(jìn)行研究...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動物
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 主要試劑制備
        2.1.6 主要軟件
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞系及培養(yǎng)
        2.2.2 質(zhì)粒和細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.3 實(shí)時定量聚合酶鏈反應(yīng)(Quantitative Real-time PCR)
        2.2.4 免疫印跡Western blot
        2.2.5 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 流式細(xì)胞術(shù)
        2.2.7 球體形成分析
        2.2.8 流式細(xì)胞術(shù)
        2.2.9 劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.2.10 Transwell assay
        2.2.11 異種移植腫瘤模型
        2.2.12 末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶d UTP標(biāo)記染色
        2.2.13 統(tǒng)計(jì)分析
3 結(jié)果
    3.1 在PDAC細(xì)胞中敲低AEG-1
    3.2 在體外實(shí)驗(yàn),AEG-1 沉默抑制PDAC細(xì)胞的增殖
    3.3 AEG-1 沉默促進(jìn)PDAC細(xì)胞凋亡
    3.4 敲低AEG-1 抑制PDAC細(xì)胞的遷移和侵襲能力
    3.5 AEG-1 影響AKT/β-catenin信號通路
    3.6 敲低AEG-1 抑制了異種移植腫瘤的生長
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價(jià)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3740968