為進(jìn)一步探討利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)蜂毒肽的方法,根據(jù)大腸桿菌密碼子偏好性、基因GC含量、合成蛋白加工需求等對蜂毒前溶血肽原基因序列進(jìn)行改造,并利用人工化學(xué)合成方法完成改造后全基因的合成。構(gòu)建蜂毒前溶血肽原與GST融合表達(dá)重組質(zhì)粒pGEX-4T-1/PPMel,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21感受態(tài)細(xì)胞后分別在20、37℃條件下經(jīng)異丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）誘導(dǎo)表達(dá),并利用SDS-PAGE和Western Blot對產(chǎn)物進(jìn)行檢測。結(jié)果表明,表達(dá)體系成功表達(dá)了目的融合蛋白,在20℃條件下可獲得可溶性表達(dá)產(chǎn)物,為進(jìn)一步分離純化目的蛋白及獲得蜂毒肽提供了基礎(chǔ)。 

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗材料與主要試劑
    1.2 試驗方法
        1.2.1 基因改造、合成及擴(kuò)增
        1.2.2 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        1.2.3 蛋白表達(dá)
2 結(jié)果與分析
    2.1 優(yōu)化后的基因序列信息
    2.2 重組質(zhì)粒的酶切檢測
    2.3 蛋白表達(dá)檢測
3 討論與結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3707624