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siRNA沉默SOX4基因抑制肝癌細(xì)胞增殖與侵襲能力

發(fā)布時間:2022-11-03 22:19
  目的探討小干擾RNA技術(shù)(siRNA)沉默SOX4基因?qū)Ω伟┘?xì)胞增殖、侵襲能力的影響。方法構(gòu)建siRNA轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721,按轉(zhuǎn)染質(zhì)粒區(qū)別分為siRNA-SOX4組、siRNA-NC組,并設(shè)立空白對照組。實時熒光定量聚合酶聯(lián)反應(yīng)(RT-PCR)檢測各組細(xì)胞SOX4 mRNA,蛋白印跡法(WB)測定SOX4蛋白水平,噻唑藍(lán)法(MTT)測定轉(zhuǎn)染不同時間肝癌細(xì)胞增殖能力,流式細(xì)胞術(shù)測定肝癌細(xì)胞凋亡率,Transwell小室實驗測定肝癌細(xì)胞侵襲能力。結(jié)果轉(zhuǎn)染后siRNA-SOX4組SOX4 mRNA相對表達(dá)量低于空白對照組和siRNA-NC組(P<0.05);轉(zhuǎn)染后siRNA-SOX4組SOX4蛋白表達(dá)量為低于空白對照組和siRNA-NC組(P<0.05);轉(zhuǎn)染不同時間siRNA-SOX4組細(xì)胞增殖活性均低于空白對照組和siRNA-NC組(P<0.05);轉(zhuǎn)染后siRNA-SOX4組細(xì)胞凋亡率高于空白對照組和siRNA-NC組(P<0.05);轉(zhuǎn)染后siRNA-SOX4組穿膜細(xì)胞比例低于空白對照組和siRNA-NC組(P<0.05)。結(jié)論 siRNA技術(shù)沉默SOX4基因可降低肝... 

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞株
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 SOX4基因siRNA設(shè)計及篩選
    1.4 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
    1.5 定量RT-PCR反應(yīng)
    1.6 蛋白印跡法檢測各組SOX4蛋白水平
    1.7 細(xì)胞增殖能力測定
    1.8 細(xì)胞凋亡測定
    1.9 細(xì)胞侵襲能力測定
    1.10 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)情況
    2.2 轉(zhuǎn)染后各組SOX4 mRNA水平
    2.3 轉(zhuǎn)染后各組SOX4蛋白水平
    2.4 轉(zhuǎn)染不同時間各組細(xì)胞增殖活性比較
    2.5 轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞凋亡率比較
    2.6 轉(zhuǎn)染后各組穿膜細(xì)胞比例
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人肝癌細(xì)胞系中miR-20a-5p的表達(dá)及對肝癌細(xì)胞Bel-7402增殖及凋亡的影響[J]. 郭瑛,李君,李宗芳,孫晉,張健,田靜,王亞利,孔光耀.  西部醫(yī)學(xué). 2019(01)
[2]沉默p21活化激酶1對肝癌細(xì)胞的影響及其機制[J]. 蔣帥,胡少勃,程翔,柯文波,李潼,高楊,王立宇,李民,宋自芳,鄭啟昌.  中華實驗外科雜志. 2018 (12)
[3]MUC1基因沉默對肝癌HepG2細(xì)胞增殖及侵襲能力的影響[J]. 王鳳麗,孫士明,李志.  山東醫(yī)藥. 2018(24)
[4]siRNA沉默HIF-2α基因影響人肝癌細(xì)胞株HepG2增殖與侵襲機制探討[J]. 李偉偉,耿曉松,孫建偉,張彩鳳,申保生,宋新文.  中華腫瘤防治雜志. 2018(07)
[5]轉(zhuǎn)錄因子性別決定區(qū)Y框蛋白2在肝癌組織的表達(dá)及其對增殖及侵襲遷移能力的影響[J]. 薛玉龍,汪傳一,韓杰,楊征宇,辛永利.  中華實驗外科雜志. 2018 (04)
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[10]RNA干擾GCF2基因沉默對人肝癌BEL-7404細(xì)胞侵襲能力的影響[J]. 郭固楠,陳筠,熊彬,寧小梅,李福建,彭家茵,李玉保,鐘明琳,黃植熙,李金平.  廣東醫(yī)學(xué). 2017(10)



本文編號:3700728

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