目的初步探討沉默及過表達LNK基因后對人急性單核細胞白血病細胞（THP-1）增殖及凋亡的影響,為研究白血病靶向治療提供新方向。方法實驗分為4組:沉默LNK組（Si-LNK）、過表達LNK組（VP-LNK）、空轉(zhuǎn)組（Empty virus group）及對照組（Control group）。慢病毒轉(zhuǎn)染THP-1細胞,建立穩(wěn)定沉默及過表達LNK基因細胞株;轉(zhuǎn)染72 h后,觀察沉默LNK組、過表達LNK組及空轉(zhuǎn)組綠色熒光蛋白（GFP）的表達量,流式細胞儀檢測慢病毒感染效率;RT-PCR及Western blot檢測LNK基因mRNA和蛋白表達水平;CCK-8法檢測THP-1細胞在24、48、72 h的增殖情況,流式細胞術(shù)檢測THP-1細胞凋亡率。結(jié)果經(jīng)慢病毒感染72 h,沉默LNK組、過表達LNK組及空轉(zhuǎn)組THP-1細胞的感染效率在99%以上。與對照組相比,沉默組LNK基因的mRNA水平及蛋白表達水平均顯著降低,而過表達組均顯著升高,說明LNK基因沉默或過表達成功。CCK-8法及流式檢測結(jié)果顯示沉默LNK組較對照組細胞增殖活性降低,且細胞凋亡率明顯增高,差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;與... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 THP-1細胞復蘇及培養(yǎng)
    1.4 慢病毒感染THP-1細胞
    1.5 流式細胞術(shù)檢測細胞感染效率
    1.6 RT-PCR檢測LNK基因mRNA水平
    1.7 Western Blot 檢測LNK基因蛋白水平
    1.8 CCK-8法檢測細胞增殖
    1.9 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
    1.10 統(tǒng)計學處理
2 結(jié)果
    2.1 慢病毒感染THP-1細胞72h的綠色熒光表達量
    2.2 慢病毒感染THP-1細胞的感染效率
    2.3 各組THP-1細胞株LNK基因mRNA表達水平
    2.4 Western blot各組THP-1細胞株LNK蛋白水平
    2.5 沉默及過表達LNK基因?qū)HP-1細胞增殖的影響
    2.6 沉默及過表達LNK基因?qū)HP-1細胞凋亡的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3685897