目的:探討GTP結(jié)合蛋白4 （GTPBP4）基因介導(dǎo)EGFR/PI3K/AKT信號(hào)通路對(duì)順鉑誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制。方法:選取人胃癌細(xì)胞株MGC-803、NCI-N87、SGC-7901、MKN-45及人胃黏膜上皮細(xì)胞株GES-1,篩選癌細(xì)胞中GTPBP4表達(dá)最高的細(xì)胞株并分為6組:Blank組（胃癌細(xì)胞不做處理）、陰性對(duì)照組（轉(zhuǎn)染含有無(wú)關(guān)序列的重組質(zhì)粒）、GTPBP4 shRNA組（轉(zhuǎn)染含有GTPBP4 shRNA的重組質(zhì)粒）、GTPBP4過表達(dá)組（轉(zhuǎn)染含有GTPBP4片段的重組質(zhì)粒）、EGFR/PI3K/AKT inhibitor組（EGFR/PI3K/AKT通路抑制劑處理細(xì)胞）、Combined treatment組（EGFR/PI3K/AKT通路抑制劑聯(lián)合GTPBP4 shRNA處理細(xì)胞）,分別給予順鉑處理。qRT-PCR和Western blot檢測(cè)EGFR/PI3K/AKT信號(hào)通路和凋亡相關(guān)基因的mRNA和蛋白表達(dá)水平。MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖活力。Transwell檢測(cè)各組細(xì)胞侵襲情況。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果:與人胃黏膜上皮細(xì)胞相比,胃癌細(xì)胞株中GT... 

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 GTPBP4基因沉默及過表達(dá)重組質(zhì)粒構(gòu)建
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及分組轉(zhuǎn)染
        1.2.3 半數(shù)抑制濃度(IC50)測(cè)定
        1.2.4 qRT-PCR檢測(cè)基因相對(duì)表達(dá)水平
        1.2.5 Western blot檢測(cè)蛋白相對(duì)表達(dá)
        1.2.6 MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖活力
        1.2.7 Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
        1.2.8 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 GTPBP4在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)情況
    2.2 MKN-45細(xì)胞株順鉑誘導(dǎo)濃度確定
    2.3 順鉑下調(diào)胃癌細(xì)胞GTPBP4表達(dá)
    2.4 GTPBP4基因沉默抑制EGFR/PI3K/AKT信號(hào)通路激活
    2.5 GTPBP4基因沉默
    2.6 GTPBP4基因沉默介導(dǎo)EGFR/PI3K/AKT信號(hào)通路抑制胃癌細(xì)胞侵襲
    2.7 GTPBP4沉默可抑制EGFR/PI3K/AKT信號(hào)通路引起順鉑誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞凋亡
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[6]PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路蛋白p-AKT及p-mTOR在胃癌組織中的表達(dá)及意義[J]. 張剛,郭劍,郝鑫,李萍,李杰.  臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2016(10)



本文編號(hào)：3680635