茶樹（Camellia sinensis（L.）O.Kuntze）是多年生常綠經(jīng)濟(jì)林木,目前對茶樹的理論研究主要集中在茶葉有效成分合成的機(jī)制,茶樹花自交不親和及花發(fā)育分子機(jī)制等方面。其中,茶樹生殖生長期間特有的“花果同現(xiàn)”現(xiàn)象,會(huì)造成茶樹花果和葉片的營養(yǎng)競爭,而成花又是茶樹營養(yǎng)生長向生殖生長轉(zhuǎn)變的第一步,因此,有必要闡明茶樹成花轉(zhuǎn)變分子調(diào)控機(jī)制,把握茶樹開花時(shí)間,從而為提高茶葉或茶樹花的產(chǎn)量和品質(zhì),推動(dòng)茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供重要的理論依據(jù)。在植物開花誘導(dǎo)過程中,開花時(shí)間基因FT（FLOWERING LOCUS T）和FD（FLOWERING LOCUS D）起著至關(guān)重要的作用,不僅能接受及整合多條開花誘導(dǎo)途徑的信號,并能將這種信號傳遞給與花分生組織形成、花器官發(fā)育相關(guān)的基因,從而促進(jìn)植物成花。為揭示成花轉(zhuǎn)變過程中茶樹CsFT和CsFD基因的作用,本研究以陜西省紫陽群體種中的代表種質(zhì)“紫陽櫧葉種”（Camellia sinesis cv.Ziyangzhong）為材料,通過RT-PCR結(jié)合RACE的方法從茶樹早期花芽中克隆獲得茶樹CsFD基因cDNA全長序列,并對該基因和茶樹CsFT基因進(jìn)行生... 

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫詞表
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物花分生組織決定的調(diào)控機(jī)理
        1.1.1 開花誘導(dǎo)途徑
        1.1.2 開花整合子SOC1和LFY基因的研究
        1.1.3 花分生組織特征基因AP1的研究
    1.2 FT-like基因和FD-like基因的研究進(jìn)展
        1.2.1 FT-like基因的研究進(jìn)展
        1.2.2 FD-like基因的研究進(jìn)展
    1.3 茶樹成花轉(zhuǎn)變研究現(xiàn)狀
    1.4 研究的目的和意義
第2章 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌株與載體
        2.1.3 主要試劑
    2.2 基因克隆
        2.2.1 引物設(shè)計(jì)
        2.2.2 提取總RNA
        2.2.3 RT-PCR
        2.2.4 3'RACE
        2.2.5 5'RACE
        2.2.6 回收目的片段和亞克隆
    2.3 生物信息學(xué)分析
    2.4 遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥
        2.4.1 過表達(dá)載體構(gòu)建
        2.4.2 轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
        2.4.3 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的花序浸染
        2.4.4 轉(zhuǎn)基因植株的篩選和鑒定
    2.5 酵母雙雜交
        2.5.1 誘餌載體和捕獲載體的構(gòu)建
        2.5.2 轉(zhuǎn)化酵母菌AH109感受態(tài)細(xì)胞
    2.6 實(shí)時(shí)定量PCR
        2.6.1 茶樹CsFD和CsFT基因的表達(dá)特性分析
        2.6.2 擬南芥AtSOC1、AtAP1和AtLFY基因的表達(dá)特性分析
第3章 結(jié)果
    3.1 茶樹CsFD基因的克隆和序列分析
        3.1.1 總RNA的提取
        3.1.2 CsFD基因同源保守序列的克隆
        3.1.3 CsFD基因3'末端和5'端的克隆
        3.1.4 CsFD CDS的克隆和序列分析
    3.2 茶樹CsFD和CsFT的生物信息學(xué)分析
        3.2.1 CsFD和CsFT蛋白結(jié)構(gòu)分析
        3.2.2 CsFD和CsFT疏水性和磷酸化位點(diǎn)分析
        3.2.3 CsFD和CsFT系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
    3.3 茶樹CsFD和CsFT遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥
        3.3.1 轉(zhuǎn)基因植株提前開花
        3.3.2 轉(zhuǎn)基因植株的其他表型變化
    3.4 茶樹CsFD和CsFT促進(jìn)擬南芥提前開花的分子機(jī)制
        3.4.1 CsFD和CsFT在茶樹早期花芽中高表達(dá)
        3.4.2 CsFD和CsFT蛋白互作
        3.4.3 CsFD和CsFT促進(jìn)擬南芥AtSOC1和AtAP1的表達(dá)
第4章 討論
    4.1 茶樹CsFD基因的克隆及序列分析
    4.2 茶樹CsFD基因和CsFT基因的進(jìn)化分析
    4.3 茶樹CsFT和CsFD調(diào)控植物的開花時(shí)間
    4.4 茶樹CsFT和CsFD在花芽中的表達(dá)特性
    4.5 茶樹CsFT和CsFD蛋白的互作
    4.6 茶樹CsFT和CsFD促進(jìn)SOC1和AP1基因表達(dá)
第5章 緒論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間科研成果



本文編號：3678523