發(fā)布時(shí)間：2022-06-01 21:57

　　山核桃（Carya cathayensis）是浙江和安徽省等地特色干果,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,長(zhǎng)期以來(lái)由于過(guò)度集約經(jīng)營(yíng)導(dǎo)致土壤酸化、養(yǎng)分失衡、病原菌爆發(fā)等一系列問(wèn)題,尤其是干腐病病害較為嚴(yán)重。本研究團(tuán)隊(duì)前期篩選分離到一株對(duì)山核桃病原菌（Botryosphaeria dothidea）具有很好抑制效果且廣譜性抗病原菌的解淀粉芽孢桿菌Bacillus anyloliquefaciens WK1（菌種保藏號(hào):CGMCC 11640）,但在實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用過(guò)程中遇到困難,手工涂抹樹(shù)桿工作量太大。如能定殖于植物體內(nèi),則相當(dāng)于植物體獲得自身免疫能力。本研究通過(guò)測(cè)序手段獲得WK1全基因組信息,解析其抗生素合成、細(xì)菌定殖相關(guān)基因簇;利用綠色熒光蛋白標(biāo)記（green fluorescent protein,GFP）技術(shù)對(duì)WK1進(jìn)行熒光標(biāo)記,追蹤WK1在土壤和植物體內(nèi)的軌跡和動(dòng)態(tài)。通過(guò)不同土壤pH的小苗盆栽試驗(yàn)揭示適宜WK1的土壤酸堿條件,通過(guò)林地灌根、掛液、噴葉等三種接種方式探究最佳的菌液施用方法。主要研究結(jié)果如下:1.全基因組信息分析表明,WK1具有合成脂肽類(lèi)和聚酮類(lèi)抗生素的基因簇,以及與定殖相關(guān)的系列基因... 

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 引言
    1.2 山核桃干腐病的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 山核桃干腐病癥狀
        1.2.2 病因及其機(jī)制
        1.2.3 山核桃干腐病的防治
    1.3 生防菌
        1.3.1 生防菌的研究進(jìn)展
        1.3.2 生防菌、病原菌和植物的聯(lián)系
    1.4 芽孢桿菌研究進(jìn)展
        1.4.1 芽孢桿菌的研究進(jìn)展
    1.5 全基因組測(cè)序
    1.6 綠色熒光蛋白在微生物定殖方面的應(yīng)用
        1.6.1 綠色熒光蛋白的發(fā)展及其性質(zhì)
    1.7 立題依據(jù)和研究?jī)?nèi)容
        1.7.1 立題依據(jù)
        1.7.2 研究?jī)?nèi)容
        1.7.3 技術(shù)路線
2 解淀粉芽孢桿菌WK1的抗菌基因和定植基因分析
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 基因組測(cè)序和組裝
        2.2.2 基因組注釋和比較分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 解淀粉芽孢桿菌WK1的基因組結(jié)構(gòu)和特征
        2.3.2 碳水化合物活性酶(CAZy)結(jié)果
        2.3.3 次級(jí)抑菌代謝產(chǎn)物簇結(jié)果
        2.3.4 芽孢桿菌WK1的定植基因分析結(jié)果
    2.4 小結(jié)
3 解淀粉芽孢桿菌WK1的GFP標(biāo)記及穩(wěn)定性檢測(cè)
    3.1 試驗(yàn)材料與方法
        3.1.1 材料
    3.2 方法
        3.2.1 芽孢桿菌WK1的GFP標(biāo)記方法
        3.2.2 標(biāo)記菌的分子生物學(xué)、熒光及質(zhì)粒穩(wěn)定性檢驗(yàn)
        3.2.3 標(biāo)記菌株和原始菌株的抑菌能力測(cè)定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 標(biāo)記菌株GFP-WK1的構(gòu)建及PCR檢測(cè)結(jié)果
        3.3.2 標(biāo)記菌的分子生物學(xué)、熒光及質(zhì)粒穩(wěn)定性結(jié)果
        3.3.3 GFP-WK1菌株的生長(zhǎng)曲線
        3.3.4 標(biāo)記菌株和原始菌株對(duì)葡萄座腔菌抑制效果對(duì)比
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
4 土壤pH影響GFP-WK1在土壤和山核桃幼苗定殖效果研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 盆栽試驗(yàn)材料
        4.1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與實(shí)施
        4.1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 GFP-WK1在不同pH處理土壤中定殖效果
        4.2.2 標(biāo)記菌GFP-WK1在山核桃不同器官的定殖比較
        4.2.3 不同pH對(duì)GFP-WK1在山核桃樹(shù)幼苗不同部位的定殖結(jié)果
    4.3 討論
    4.4 結(jié)論
5 解淀粉芽孢桿菌GFP-WK1在山核桃林地的定殖規(guī)律
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 接種標(biāo)記菌分布規(guī)律
        5.2.2 不同接種方法標(biāo)記菌在不同部位定殖比較分析
    5.3 討論
    5.4 結(jié)論
6 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 展望
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[8]GFP標(biāo)記溶磷細(xì)菌在葡萄根際的定殖研究[D]. 宿景霞.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
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