動物模型是生命科學(xué)領(lǐng)域研究使用的重要工具之一,由于存在多種CRE工具鼠可以方便實(shí)現(xiàn)條件性敲除等優(yōu)勢,小鼠受到研究者們的青睞。隨著基因編輯技術(shù)的快速發(fā)展,將其運(yùn)用于各種細(xì)胞系和動物中的研究與日俱增。其中,最受矚目的基因編輯技術(shù)是CRISPR/Cas9（規(guī)律成簇的間隔短回文重復(fù)/CRISPR相關(guān)蛋白9）系統(tǒng),它具有設(shè)計簡單、效率高等優(yōu)勢。因此,本論文利用該系統(tǒng)開展了以下兩方面的研究工作:首先,我們利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)獲得了 Ndufs4基因敲除小鼠。臨床研究發(fā)現(xiàn)在多例亞急性壞死性腦脊髓�。↙eigh Syndrome,LS）病人中存在Ndufs4基因突變,我們研究發(fā)現(xiàn)敲除小鼠的運(yùn)動能力比野生型小鼠顯著低下,該表型與LS病人類似。我們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),敲除小鼠3周出現(xiàn)脫毛的現(xiàn)象,體重比野生型小鼠輕,大多數(shù)小鼠活不到成年,幸存的小鼠生殖能力弱,無法自然交配獲得子代,隨后的切片染色顯示敲除小鼠的卵巢中能見各級卵母細(xì)胞,睪丸中能見成熟精子,其后我們使用了胞漿內(nèi)單精子注射法（Intracytoplasmic sperm injection,ICSI）發(fā)現(xiàn)純和敲除小鼠的子代在早期胚胎發(fā)育過程中受到... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 基因編輯技術(shù)簡介
        1.1.1 CRISPR/Cas9系統(tǒng)簡介
        1.1.2 基因敲入技術(shù)簡介
        1.1.3 轉(zhuǎn)基因動物的發(fā)展
    1.2 Ndufs4基因簡介
    1.3 Stra8基因簡介
第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 Ndufs4基因敲除小鼠的建立及研究
        2.2.2 建立STRA8-eGFP小鼠模型
第三章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
    一 實(shí)驗(yàn)中使用的引物
    二 英文簡寫全稱
致謝



本文編號：3641777