小黑楊（Populus simonii×Popuulus nigra）具有抗旱、耐寒等多種優(yōu)良性狀,是北方造林所推廣的樹種。氮素是植物生長發(fā)育過程中必須的營養(yǎng)元素,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AlaAT）是氮素同化的關(guān)鍵酶,該酶廣泛的分布在各種植物的組織和器官中,它的酶活不僅發(fā)現(xiàn)在葉、根和花中,而且在其他組織像是水果和水稻種子的胚乳組織中也有發(fā)現(xiàn)。AlaAT分布的廣泛也證明了它在植物整個生命周期的新陳代謝中發(fā)揮著重要的作用。本實驗以轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊為試驗材料,通過對小黑楊生長指標和生理指標的檢測,探究AlaAT在楊樹氮代謝中的作用,主要研究結(jié)果如下:（1）為探究轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊是否在表型上與野生型小黑楊有差異,檢測了17個轉(zhuǎn)基因株系和野生型植株在生長了兩個月后的株高與地徑兩種生長指標以及光合指標,發(fā)現(xiàn)大部分轉(zhuǎn)基因株系的株高與地徑增量優(yōu)于野生型植株,其中3號和7號轉(zhuǎn)基因植株株高增量最大,2號和6號轉(zhuǎn)基因植株地徑增量與野生型植株相比達到極顯著差異,且所有轉(zhuǎn)基因株系的地徑增量都高于野生型植株。光合指標的檢測中,1號轉(zhuǎn)基因植株的凈光合速率高于野生型植株,其他轉(zhuǎn)基因株系的凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 植物對氮素吸收利用的研究進展
        1.1.1 氮素對植物生長發(fā)育的影響
        1.1.2 植物對氮素吸收的生理機制和分子機制
    1.2 植物氮代謝中參與的酶類
    1.3 AlaAT基因的發(fā)現(xiàn)及功能
    1.4 轉(zhuǎn)基因楊樹的研究進展
    1.5 研究的目的意義
2 轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊生長指標及光合指標結(jié)果分析
    2.1 試驗材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 小黑楊擴繁方法
        2.1.3 小黑楊擴繁主要培養(yǎng)基及配方
        2.1.4 外植體消毒和小黑楊擴繁
    2.2 試驗方法
        2.2.1 小黑楊材料的篩選及培養(yǎng)
        2.2.2 小黑楊植株株高檢測
        2.2.3 小黑楊植株地徑檢測
        2.2.4 小黑楊光合指標檢測
    2.3 試驗結(jié)果
        2.3.1 轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊株高增量結(jié)果分析
        2.3.2 轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊地徑增量結(jié)果分析
        2.3.3 轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊株高增量差異分析
        2.3.4 轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊地徑增量差異分析
        2.3.5 轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊光合測定結(jié)果分析
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
3 轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊谷丙轉(zhuǎn)氨酶酶活結(jié)果分析
    3.1 試驗材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 試驗所用試劑盒
    3.2 試驗方法
        3.2.1 植物材料處理方法
        3.2.2 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶酶活測定
    3.3 試驗結(jié)果
    3.4 本章小結(jié)
4. 轉(zhuǎn)基因小黑楊植株在不同氮素處理后生理指標檢測
    4.1 試驗材料
    4.2 方法
        4.2.1 材料的準備
        4.2.2 試驗主要處理營養(yǎng)液濃度及成分
        4.2.3 谷氨酰胺合成酶(GS)的酶活測定
        4.2.4 谷氨酸合成酶(GOGAT)的酶活測定
    4.3 試驗結(jié)果
        4.3.1 NaNO_3處理轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊GS酶活測定結(jié)果分析
        4.3.2 NH_4Cl處理轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊GS酶活測定結(jié)果分析
        4.3.3 NaNO_3處理轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊GOGAT酶活測定結(jié)果分析
        4.3.4 NH_4Cl處理轉(zhuǎn)AlaAT基因小黑楊GOGAT酶活測定結(jié)果分析
    4.4 本章小結(jié)
5. 氮同化相關(guān)基因表達模式分析
    5.1 材料
    5.2 萬法
        5.2.1 試驗材料的處理及收樣
        5.2.2 小黑楊總RNA的提取
        5.2.3 反轉(zhuǎn)錄
        5.2.4 實時熒光定量PCR分析
    5.3 試驗結(jié)果
        5.3.1 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中AlaAT1基因表達量
        5.3.2 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中AlaAT3基因表達量
        5.3.3 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中AlaAT4基因表達量
        5.3.4 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中AspAT基因表達量
        5.3.5 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中GS1基因表達量
        5.3.6 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中GS2基因表達量
        5.3.7 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中NR基因表達量
        5.3.8 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中NADH-GOGAT基因表達量
        5.3.9 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中NlR基因表達量
        5.3.10 不同濃度銨態(tài)氮與硝態(tài)氮處理后轉(zhuǎn)基因植株中NRT1.1基因表達量
    5.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：3641712