鎘（Cadmium,Cd）是常見的重金屬污染物,其在環(huán)境中不能被生物降解,當環(huán)境受到鎘污染,鎘會在生物體內(nèi)富集,通過食物鏈進入人體,產(chǎn)生潛在危害,影響人類健康�？耸显r俗稱小龍蝦,其對鎘等重金屬有較強的富集能力,能夠在重金屬污染的環(huán)境下生存和繁衍,而有機體能在不利條件下生存的關(guān)鍵就是盡可能將有害污染物排除在某些關(guān)鍵組織之外,由先前文獻可知p38 MAPK基因可能在生物應(yīng)對環(huán)境脅迫過程中起重要作用,那么可推斷克氏原螯蝦面對鎘脅迫,其p38 MAPK基因很可能參與調(diào)節(jié)了鎘在其體內(nèi)不同組織中的積累分布,以此維持蝦的正常生命活動。因此對克氏原螯蝦鎘蓄積及p38基因表達進行研究,有一定的價值和意義。在本文中,先研究了克氏原螯蝦三個重要組織鰓,肝胰腺,肌肉在不同濃度鎘環(huán)境下對鎘的蓄積量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)鰓和肝胰腺組織對鎘的蓄積量遠大于肌肉組織。而為了驗證克氏原螯蝦p38 MAPK基因能調(diào)節(jié)鎘在其不同組織中的積累分布這一假設(shè),本文進行了克氏原鰲蝦p38 MAPK基因克隆及序列分析,檢測了克氏原螯蝦p38基因和鎘含量在組織中的分布情況,分析比較了鎘暴露下各組織在不同時間的p38基因表達量和鎘含量。結(jié)果表明:... 

【文章來源】：武漢紡織大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 緒論
    1.1 鎘污染及其危害
        1.1.1 鎘的特性及對水環(huán)境的污染
        1.1.2 鎘在水生動物中的蓄積及危害
        1.1.3 鎘對人類健康的危害
    1.2 克氏原螯蝦概況
    1.3 p38MAPK基因
        1.3.1 p38MAPK概述
        1.3.2 p38MAPK在水生動物中的研究進展
        1.3.3 p38MAPK與鎘毒性作用的研究進展
    1.4 本課題研究意義與主要研究內(nèi)容
    1.5 技術(shù)路線
2 鎘在克氏原螯蝦組織中的蓄積
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗生物
        2.1.2 實驗試劑與儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 鎘蓄積實驗
        2.2.2 樣品處理與鎘的測定
        2.2.3 數(shù)據(jù)處理
    2.3 結(jié)果與討論
    2.4 本章小結(jié)
3 克氏原螯蝦p38MAPK基因克隆及序列分析
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗生物
        3.1.2 實驗試劑與儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 克氏原螯蝦的總RNA提取
        3.2.2 第一鏈cDNA的合成
        3.2.3 5'-RACE c DNA和3'-RACE c DNA的合成
        3.2.4 引物設(shè)計和PCR擴增
        3.2.5 PCR產(chǎn)物的純化
        3.2.6 目的片段與 pMD-19T 的連接及轉(zhuǎn)化
        3.2.7 克氏原螯蝦p38基因序列分析方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 克氏原螯蝦p38基因序列分析
        3.3.2 克氏原螯蝦p38基因同源性及系統(tǒng)進化分析
    3.4 本章小結(jié)
4 克氏原螯蝦p38在不同組織中的表達及鎘對其表達量的影響
    4.1 實驗材料
        4.1.1 實驗生物
        4.1.2 實驗試劑與儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 克氏原螯蝦p38基因表達量的測定
        4.2.2 克氏原螯蝦組織鎘含量的測定
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 克氏原螯蝦p38基因和鎘含量在組織中的分布情況研究
        4.3.2 鎘脅迫下鰲蝦組織中p38基因表達量及鎘含量分析
    4.4 本章小結(jié)
5 注射特異si RNA抑制螯蝦p38 基因表達后對其鎘蓄積的影響
    5.1 實驗材料
        5.1.1 實驗生物
        5.1.2 實驗試劑與儀器
    5.2 實驗方法
        5.2.1 siRNA的設(shè)計合成
        5.2.2 克氏原鰲蝦siRNA的注射
        5.2.3 siRNA作用效果檢測
        5.2.4 RNA干擾后鎘脅迫下p38基因表達和鎘蓄積的檢測
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 siRNA作用效果
        5.3.2 RNA干擾后鎘脅迫下p38基因表達和鎘蓄積
    5.4 本章小結(jié)
6 結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄 研究生期間成果


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]南通市水產(chǎn)品中鉛、鎘含量分析與評價[J]. 殷小琴,徐匯宏,季寅星.  食品工業(yè). 2018(09)
[3]基于p38MAPK通路研究丹參注射液對糖尿病大鼠心肌纖維化的影響[J]. 陳飛,步青云,包曉燕,金鐵峰,應(yīng)帥兵,儲利勝.  浙江臨床醫(yī)學(xué). 2018 (08)
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[6]p38絲裂原活化蛋白激酶信號通路在膿毒癥器官功能障礙中的作用[J]. 張琪,山峰.  中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2018(02)
[7]RNAi作用機制及應(yīng)用研究進展[J]. 馮小艷,張樹珍.  生物技術(shù)通報. 2017(05)
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碩士論文
[1]凡納濱對蝦對水體和飼料中Pb、Cd富集及釋放的特性研究[D]. 盧元玲.南京師范大學(xué) 2016
[2]克氏原螯蝦、日本沼蝦對飼料中Cd、Pb富集與釋放特性及其安全性分析[D]. 江晨潔.南京師范大學(xué) 2015
[3]鎘在蝦夷扇貝體內(nèi)的時空分布規(guī)律及對抗氧化防御系統(tǒng)的影響[D]. 王麗麗.中國海洋大學(xué) 2011



本文編號：3641240