鎘（Cadmium,Cd）是常見(jiàn)的重金屬污染物,其在環(huán)境中不能被生物降解,當(dāng)環(huán)境受到鎘污染,鎘會(huì)在生物體內(nèi)富集,通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體,產(chǎn)生潛在危害,影響人類健康。克氏原螯蝦俗稱小龍蝦,其對(duì)鎘等重金屬有較強(qiáng)的富集能力,能夠在重金屬污染的環(huán)境下生存和繁衍,而有機(jī)體能在不利條件下生存的關(guān)鍵就是盡可能將有害污染物排除在某些關(guān)鍵組織之外,由先前文獻(xiàn)可知p38 MAPK基因可能在生物應(yīng)對(duì)環(huán)境脅迫過(guò)程中起重要作用,那么可推斷克氏原螯蝦面對(duì)鎘脅迫,其p38 MAPK基因很可能參與調(diào)節(jié)了鎘在其體內(nèi)不同組織中的積累分布,以此維持蝦的正常生命活動(dòng)。因此對(duì)克氏原螯蝦鎘蓄積及p38基因表達(dá)進(jìn)行研究,有一定的價(jià)值和意義。在本文中,先研究了克氏原螯蝦三個(gè)重要組織鰓,肝胰腺,肌肉在不同濃度鎘環(huán)境下對(duì)鎘的蓄積量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)鰓和肝胰腺組織對(duì)鎘的蓄積量遠(yuǎn)大于肌肉組織。而為了驗(yàn)證克氏原螯蝦p38 MAPK基因能調(diào)節(jié)鎘在其不同組織中的積累分布這一假設(shè),本文進(jìn)行了克氏原鰲蝦p38 MAPK基因克隆及序列分析,檢測(cè)了克氏原螯蝦p38基因和鎘含量在組織中的分布情況,分析比較了鎘暴露下各組織在不同時(shí)間的p38基因表達(dá)量和鎘含量。結(jié)果表明:... 

【文章來(lái)源】：武漢紡織大學(xué)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 緒論
    1.1 鎘污染及其危害
        1.1.1 鎘的特性及對(duì)水環(huán)境的污染
        1.1.2 鎘在水生動(dòng)物中的蓄積及危害
        1.1.3 鎘對(duì)人類健康的危害
    1.2 克氏原螯蝦概況
    1.3 p38MAPK基因
        1.3.1 p38MAPK概述
        1.3.2 p38MAPK在水生動(dòng)物中的研究進(jìn)展
        1.3.3 p38MAPK與鎘毒性作用的研究進(jìn)展
    1.4 本課題研究意義與主要研究?jī)?nèi)容
    1.5 技術(shù)路線
2 鎘在克氏原螯蝦組織中的蓄積
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)生物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 鎘蓄積實(shí)驗(yàn)
        2.2.2 樣品處理與鎘的測(cè)定
        2.2.3 數(shù)據(jù)處理
    2.3 結(jié)果與討論
    2.4 本章小結(jié)
3 克氏原螯蝦p38MAPK基因克隆及序列分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)生物
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 克氏原螯蝦的總RNA提取
        3.2.2 第一鏈cDNA的合成
        3.2.3 5'-RACE c DNA和3'-RACE c DNA的合成
        3.2.4 引物設(shè)計(jì)和PCR擴(kuò)增
        3.2.5 PCR產(chǎn)物的純化
        3.2.6 目的片段與 pMD-19T 的連接及轉(zhuǎn)化
        3.2.7 克氏原螯蝦p38基因序列分析方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 克氏原螯蝦p38基因序列分析
        3.3.2 克氏原螯蝦p38基因同源性及系統(tǒng)進(jìn)化分析
    3.4 本章小結(jié)
4 克氏原螯蝦p38在不同組織中的表達(dá)及鎘對(duì)其表達(dá)量的影響
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)生物
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 克氏原螯蝦p38基因表達(dá)量的測(cè)定
        4.2.2 克氏原螯蝦組織鎘含量的測(cè)定
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 克氏原螯蝦p38基因和鎘含量在組織中的分布情況研究
        4.3.2 鎘脅迫下鰲蝦組織中p38基因表達(dá)量及鎘含量分析
    4.4 本章小結(jié)
5 注射特異si RNA抑制螯蝦p38 基因表達(dá)后對(duì)其鎘蓄積的影響
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)生物
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 siRNA的設(shè)計(jì)合成
        5.2.2 克氏原鰲蝦siRNA的注射
        5.2.3 siRNA作用效果檢測(cè)
        5.2.4 RNA干擾后鎘脅迫下p38基因表達(dá)和鎘蓄積的檢測(cè)
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 siRNA作用效果
        5.3.2 RNA干擾后鎘脅迫下p38基因表達(dá)和鎘蓄積
    5.4 本章小結(jié)
6 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄 研究生期間成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]急性呼吸窘迫綜合征大鼠血小板絲裂原活化蛋白激酶p38磷酸化水平[J]. 劉宏,范曉枝,田新強(qiáng),李冰.  山西大同大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(05)
[2]南通市水產(chǎn)品中鉛、鎘含量分析與評(píng)價(jià)[J]. 殷小琴,徐匯宏,季寅星.  食品工業(yè). 2018(09)
[3]基于p38MAPK通路研究丹參注射液對(duì)糖尿病大鼠心肌纖維化的影響[J]. 陳飛,步青云,包曉燕,金鐵峰,應(yīng)帥兵,儲(chǔ)利勝.  浙江臨床醫(yī)學(xué). 2018 (08)
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[6]p38絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路在膿毒癥器官功能障礙中的作用[J]. 張琪,山峰.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2018(02)
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[9]中國(guó)對(duì)蝦（Fenneropenaeus chinensis）p38 MAPK基因克隆及表達(dá)分析[J]. 姚萬(wàn)龍,何玉英,劉萍,李健,王清印.  漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2016(02)
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碩士論文
[1]凡納濱對(duì)蝦對(duì)水體和飼料中Pb、Cd富集及釋放的特性研究[D]. 盧元玲.南京師范大學(xué) 2016
[2]克氏原螯蝦、日本沼蝦對(duì)飼料中Cd、Pb富集與釋放特性及其安全性分析[D]. 江晨潔.南京師范大學(xué) 2015
[3]鎘在蝦夷扇貝體內(nèi)的時(shí)空分布規(guī)律及對(duì)抗氧化防御系統(tǒng)的影響[D]. 王麗麗.中國(guó)海洋大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3641240