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馬氏珠母貝Pm-vasa基因的克隆與表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2022-02-19 14:13
  vasa蛋白是DEAD-box家族蛋白的一員,在真核生物原生殖細(xì)胞形成過程中起關(guān)鍵作用。本實(shí)驗(yàn)利用RACE技術(shù)克隆獲得了馬氏珠母貝vasa基因(Pm-vasa),并對(duì)其結(jié)構(gòu)和組織表達(dá)模式進(jìn)行了分析。結(jié)果表明:Pm-vasa c DNA序列全長(zhǎng)為1 709 bp,其中開放式閱讀框1 431 bp、5’UTR 148 bp、3’UTR 131 bp,共編碼476個(gè)氨基酸,分子量為52.139 k D,理論等電點(diǎn)為6.24。SMART軟件分析顯示Pm-vasa蛋白具有典型的DEAD-box結(jié)構(gòu)域,且具DEAD-box家族蛋白9個(gè)典型保守基序。多序列比對(duì)結(jié)果表明Pm-vasa與紫貽貝vasa同源性最高,為74%;系統(tǒng)進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn),Pm-vasa與紫貽貝等軟體動(dòng)物聚為一支。組織表達(dá)定量分析發(fā)現(xiàn)Pm-vasa基因m RNA在性腺中顯著高表達(dá)。我們的研究結(jié)果表明Pm-vasa可能參與馬氏珠母貝的性腺發(fā)育。 

【文章來(lái)源】:基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2017,36(07)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)

【文章目錄】:
1 結(jié)果與分析
    1.1 Pm-vasa基因的克隆及序列分析
    1.2 Pm-vasa多序列比對(duì)及進(jìn)化樹分析
    1.3 Pm-vasa組織差異表達(dá)
2 討論
3 材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 主要試劑
    3.3 總RNA的提取檢驗(yàn)及c DNA第一鏈的合成
    3.4 引物設(shè)計(jì)
    3.5 RACE PCR獲得全長(zhǎng)序列
    3.6 Pm-vasa序列分析
    3.7 組織間的差異表達(dá)分析
作者貢獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]馬氏珠母貝磺基轉(zhuǎn)移酶PmCHST9基因的分子特征與表達(dá)分析[J]. 郝瑞娟,鄭哲,王慶恒,鄧岳文,焦鈺,杜曉東.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2015(11)
[2]蘇禽黃雞CVH基因真核表達(dá)載體構(gòu)建及亞細(xì)胞定位[J]. 朱睿,張振韜,左其生,劉志永,韋光輝,李東,連超,張亞妮,李碧春.  中國(guó)畜牧雜志. 2014(09)



本文編號(hào):3633045

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