本文關(guān)鍵詞：兼抗蟲、除草劑、干旱轉(zhuǎn)基因玉米的獲得和鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

中國農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015,48 2 :215-228 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.02.02 兼抗蟲、除草劑、干旱轉(zhuǎn)基因玉米的獲得和鑒定 1 1 2 1 1 孫 越 ，劉秀霞 ，李麗莉 ，官SS ，張舉仁 1 2 （山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，濟(jì)南 250100 ； 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，濟(jì)南 250100 ） 摘要：【目的】培育抗玉米螟、抗草甘膦、抗旱的轉(zhuǎn)基因復(fù)合性狀玉米種質(zhì)�！痉椒ā客ㄟ^農(nóng)桿菌介導(dǎo)的玉米 莖尖遺傳轉(zhuǎn)化法，把重組到同一植物表達(dá)載體的 cry1AcM、epsps、GAT 和 ZmPIS 轉(zhuǎn)入玉米骨干自交系 9801 和齊 319（Q319），，獲得轉(zhuǎn)基因植株。通過逐代除草劑篩選、分子檢測(cè)和抗蟲性鑒定，從大量轉(zhuǎn)基因株系中優(yōu)選出 6 個(gè) 優(yōu)良玉米株系。在此基礎(chǔ)上，以非轉(zhuǎn)基因自交系9801、Q319為對(duì)照，在嚴(yán)格控制條件下對(duì)6個(gè)轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行抗 蟲、抗除草劑和抗旱性檢測(cè)。由于不同生長時(shí)期植株對(duì)玉米螟危害的敏感程度有差異，在抗蟲性檢測(cè)試驗(yàn)中，對(duì) 不同生長階段的轉(zhuǎn)基因玉米的抗蟲性，分別進(jìn)行了田間和室內(nèi)玉米螟接種試驗(yàn)，并以灌漿期玉米的籽粒和苞葉飼 喂玉米螟幼蟲檢測(cè)其殺蟲性。在草甘膦抗性鑒定試驗(yàn)中，對(duì) 6 葉期田間玉米植株噴灑大田除草用量的草甘膦溶液 評(píng)估其應(yīng)用價(jià)值；采用 3 倍應(yīng)用劑量的草甘膦溶液噴施 3 葉期玉米植株測(cè)試其草甘膦耐受力。在抗旱性鑒定試驗(yàn) 中，對(duì)10葉期玉米植株進(jìn)行干旱脅迫處理，觀測(cè)轉(zhuǎn)基因植株的表型變化并測(cè)定光合作用和葉綠素?zé)晒獾葏?shù)�！窘Y(jié) 果】選擇出6 個(gè)遺傳穩(wěn)定的兼抗亞洲玉米螟、抗草甘膦和抗旱性提高的轉(zhuǎn)基因玉米株系，其中株系L1―L3來自自 交系9801，Q1―Q3來自自交系Q319。通過 RT-PCR檢測(cè)4 個(gè)轉(zhuǎn)基因的轉(zhuǎn)錄強(qiáng)度，證明它們?cè)谵D(zhuǎn)基因植株中有效表 達(dá)；利用 Western blot 方法檢測(cè)

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