本文關(guān)鍵詞：利用Tol2轉(zhuǎn)座子構(gòu)建斑馬魚心臟組織特異表達(dá)轉(zhuǎn)基因載體及其表達(dá)分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《華中科技大學(xué)》 2010年

斑馬魚基因sema4c的克隆、表達(dá)和功能研究

馬全富  

【摘要】：Sema4C是一種信號(hào)素家族跨膜型蛋白,已證實(shí)跟神經(jīng)軸突導(dǎo)向,肌管形成有關(guān)。在前期的研究中,體外證實(shí)Sema4C促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和成管,但它在體內(nèi)的功能還不清楚。 為探討Sema4C在體內(nèi)的功能,我們利用斑馬魚這一理想的模式生物,從Sema4C在斑馬魚血管和淋巴管發(fā)育中作用入手。在此研究中,從斑馬魚基因數(shù)據(jù)庫(kù)中比對(duì)出了斑馬魚的Sema4C基因,命名為zSema4C。通過序列分析,蛋白比對(duì)和同源性分析表明zSema4C是人類Sema4C基因的直向同源基因,并且它們?cè)谶M(jìn)化過程中高度保守。采用全胚胎原位雜交技術(shù)揭示zSema4C在斑馬魚胚胎早期發(fā)育過程中的時(shí)空表達(dá)譜,證實(shí)zSema4C為一母系來源的基因,可能為胚胎早期發(fā)育所必須。zSema4C從胚胎單細(xì)胞期開始表達(dá),24小時(shí)特異性的表達(dá)于血管區(qū)。這一表達(dá)模式跟ZFLT4,ZVEGFC的時(shí)空表達(dá)譜極其相似。通過反義嗎啉環(huán)寡聚核苷酸抑制zSema4C蛋白后,在高劑量作用下,幾乎全部的胚胎都出現(xiàn)了血管發(fā)育障礙,表現(xiàn)為分支血管發(fā)育缺陷;在低劑量作用下,有30%的胚胎出現(xiàn)淋巴管發(fā)育障礙,表現(xiàn)為胸導(dǎo)管的缺如。 血管和淋巴管的形成跟腫瘤的轉(zhuǎn)移密切相關(guān),我們首次在體內(nèi)證實(shí)了zSema4C在斑馬魚血管和淋巴管發(fā)育中的重要作用,可能會(huì)成為臨床抗腫瘤治療的一個(gè)新的靶點(diǎn)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：Q78;R-332
【目錄】：

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