本文關(guān)鍵詞：多抗PVY、TMV和CMV轉(zhuǎn)基因煙草的培育，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

中國農(nóng)業(yè)科學(xué) 2008,41 4 :1040-1047 Scientia Agricultura Sinica 多抗PVY、TMV和CMV轉(zhuǎn)基因煙草的培育 1,2 1,2 2 朱常香 ，宋云枝 ，，溫孚江 1 2 （山東農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東泰安 271018 ； 作物生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東泰安 271018 ） 摘要：【目的】利用RNA介導(dǎo)抗性培育抗多種植物病毒的轉(zhuǎn)基因煙草�！痉椒ā糠謩e以馬鈴薯Y病毒（PVY）、 煙草花葉病毒（TMV）和黃瓜花葉病毒（CMV）全長衣殼蛋白（CP）基因?yàn)槟０澹ㄟ^設(shè)計(jì) PCR 引物和亞克隆獲得 PVY CP 3′端長度 100 bp、TMV CP 3′端長度 100 bp 和 CMV CP 3′端長度 200 bp 的 cDNA 片段并拼接成嵌合基 因，并以此為模板構(gòu)建反向重復(fù)結(jié)構(gòu)嵌合基因的植物表達(dá)載體pRHPTC。將pRHPTC通過凍融法導(dǎo)入農(nóng)桿菌LBA4404， 采用葉盤法轉(zhuǎn)化煙草 NC89，然后測定轉(zhuǎn)基因煙草對 3 種病毒的抗性�！窘Y(jié)果】經(jīng)卡那霉素篩選和 PCR 檢測，共獲 得276株轉(zhuǎn)基因煙草。Southern和Northern blot分析表明，外源基因以不同拷貝數(shù)整合于煙草基因組中；不同 轉(zhuǎn)基因植株中病毒RNA的積累量存在顯著差異�？共⌒詸z測顯示：23%左右的轉(zhuǎn)基因植株表現(xiàn)出對3 種病毒侵染的 抗性。對轉(zhuǎn)基因植株擴(kuò)繁后代和T1 代的抗性分析表明：多病毒抗性表現(xiàn)穩(wěn)定�！窘Y(jié)論】利用RNA介導(dǎo)的抗病毒基因 工程可獲得同時(shí)抗多種病毒的轉(zhuǎn)基因煙草，其抗病性在T 代擴(kuò)繁植株和T 代植株中得到穩(wěn)定遺傳。 0 1 關(guān)

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