甜菜堿和四氫嘧啶提高Pseudomonas putida KT2440耐鹽性的分子機(jī)理研究
本文關(guān)鍵詞：耐鹽分脅迫的生物學(xué)機(jī)理及其基因工程研究進(jìn)展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《南京農(nóng)業(yè)大學(xué)》 2005年
甜菜堿和四氫嘧啶提高Pseudomonas putida KT2440耐鹽性的分子機(jī)理研究
何健
【摘要】：以模式菌株P(guān)seudomonas putida KT2440為材料，研究了營(yíng)養(yǎng)及各種環(huán)境條件對(duì)該菌株鹽份滲透脅迫適應(yīng)性的影響，探討了外源添加各種相容性溶質(zhì)提高KT2440對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性及甜菜堿和四氫嘧啶對(duì)KT2440滲透脅迫保護(hù)機(jī)理。在此基礎(chǔ)上對(duì)利用基因工程手段提高KT2440對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性的可行性和策略進(jìn)行了研究。研究結(jié)果表明(1)外源添加相容性溶質(zhì)提高KT2440對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性的機(jī)理在于鹽份滲透脅迫時(shí)可以顯著縮短KT2440的延滯期；顯著降低這一時(shí)期KT2440細(xì)胞的死亡率。(2)鹽份滲透脅迫時(shí)，KT2440對(duì)四氫嘧啶的快速積累是一種“臨時(shí)性”的應(yīng)急策略，當(dāng)細(xì)胞適應(yīng)滲透脅迫后會(huì)自身合成甜菜堿來代替四氫嘧啶；但如果KT2440基因組中甜菜堿合成基因被敲除，則KT2440細(xì)胞以四氫嘧啶作為細(xì)胞內(nèi)主要的相容性溶質(zhì)。利用轉(zhuǎn)座插入突變獲得了不能降解四氫嘧啶的突變株，并首次克隆到四氫嘧啶降解基因，發(fā)現(xiàn)四氫嘧啶降解阻斷后，，四氫嘧啶對(duì)KT2440滲透保護(hù)效果沒有明顯的變化。(3)首次發(fā)現(xiàn)接種物培養(yǎng)液上清能提高KT2440對(duì)鹽份滲透脅迫的適應(yīng)性，上清中含有一定量的甜菜堿是產(chǎn)生滲透保護(hù)的主要因素。(4)采用全新的策略(使甜菜堿合成基因組成型表達(dá)，不受滲透壓誘導(dǎo))，首次獲得了一株對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性顯著提高的工程菌株KT2440dgbtbet。 Pseudomonas putida KT2440對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性受到各種因素如營(yíng)養(yǎng)、接種物和接種量等的影響。發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基豐富程度影響KT2440對(duì)鹽份的鹽份滲透脅迫適應(yīng)性，在完全培養(yǎng)基中KT2440對(duì)鹽份的耐受性要比在基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基中高。加大接種量可以提高KT2440對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性。加大接種量可以顯著縮短KT2440細(xì)胞的延滯期，但對(duì)代時(shí)影響不顯著。碳源影響KT2440對(duì)鹽份的耐受性，在以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基中KT2440對(duì)鹽份的耐受性要比在以苯甲酸鈉為碳源的培養(yǎng)基中高。氮素和鉀素含量影響KT2440對(duì)鹽份的耐受性，提高氮素和鉀素濃度有利于提高Pseudomonas putida KT2440對(duì)鹽份的耐受性。接種物培養(yǎng)基鹽濃度影響KT2440對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性，于0.8mol／L NaCl中培養(yǎng)的接種物對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性要比于0mol／L NaCl中培養(yǎng)的要高。接種物培養(yǎng)液上清影響KT2440對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性，去除接種物培養(yǎng)液上清使KT2440對(duì)鹽份滲透脅迫適應(yīng)性下降。接種物培養(yǎng)
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：Q935
【目錄】：
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【引證文獻(xiàn)】
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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
1 楊亮茹;肖詠梅;魏棟;袁金偉;買文鵬;毛璞;;不同基團(tuán)橋聯(lián)四氫嘧啶二鎓鹽的合成及表征[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第6分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2012年
2 魏運(yùn)洋;邵云;;核磁共振技術(shù)在天冬酰胺環(huán)化縮合產(chǎn)物結(jié)構(gòu)表征中的應(yīng)用[A];第十一屆全國(guó)波譜學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2000年
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條
1 趙百鎖;達(dá)坂喜鹽芽孢桿菌D-8～T四氫嘧啶合成基因的克隆、功能表達(dá)和谷氨酰胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的克隆[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年
2 朱秋華;含氮雜環(huán)化合物的多組份反應(yīng)合成及其生物活性研究[D];華南理工大學(xué);2010年
3 霍穎異;近海細(xì)菌多相分類和基因組研究以及深海沉積物宏基因組分析[D];浙江大學(xué);2012年
4 曹華;貧電子炔烴的加成及串聯(lián)反應(yīng)研究[D];華南理工大學(xué);2010年
5 黃蘭;一類新穎熒光化合物五取代四氫嘧啶的合成及其光學(xué)特性與應(yīng)用的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 閆喜文;四氫嘧啶制備技術(shù)研究[D];大連海事大學(xué);2011年
2 徐蕊;四氫嘧啶合成工程菌株構(gòu)建[D];大連海事大學(xué);2012年
3 龔皎;大腸桿菌中四氫嘧啶合成通路的構(gòu)建及優(yōu)化[D];蘭州大學(xué);2012年
4 姜蔚宇;中度嗜鹽菌Halomonas sp. TA-4產(chǎn)四氫嘧啶發(fā)酵條件的優(yōu)化及四氫嘧啶生物學(xué)功能初探[D];廈門大學(xué);2007年
5 韋娜;嗜鹽菌的分離鑒定及其應(yīng)用研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2012年
6 陳志亮;南極中度嗜鹽菌鹽單胞菌Nj223四氫嘧啶生物合成基因ectABC的克隆及其功能初步研究[D];廈門大學(xué);2007年
7 趙艷輝;產(chǎn)脂肪酶嗜鹽菌的鑒定、產(chǎn)酶條件及耐鹽機(jī)理的初步研究[D];江南大學(xué);2008年
8 傅英楠;南極深海底泥中性嗜鹽菌Chromhalobacter sp.NJS-2四氫嘧啶生物合成基因ectABC的克隆表達(dá)及四氫嘧啶生物學(xué)功能初步研究[D];廈門大學(xué);2008年
9 劉瑩瑩;中度嗜鹽菌分離鑒定及在環(huán)境修復(fù)中的應(yīng)用[D];大連海事大學(xué);2013年
10 許效;含氨基酸酯的順式烯啶蟲胺類似物的合成、殺蟲活性與分子對(duì)接的研究[D];上海師范大學(xué);2011年
本文關(guān)鍵詞：耐鹽分脅迫的生物學(xué)機(jī)理及其基因工程研究進(jìn)展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào)：171890
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