本文關(guān)鍵詞：基因槍法轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究綜述，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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第３ ５卷 第 １ 期　 ２０ ０ ６年 ３月 　

內(nèi)蒙 古 師 范 大 學(xué) 學(xué)報(bào) （ 自然 科 學(xué)漢 文 版 ） 　
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＩ ｎ ｒＭ ｏ ｇ ｌ 　 ｒ ｌＵｎｖ ｒ ｉ （ ｔ ｒｌＳ ｉｎ ｅＥｄｔｏ ） ｏ ｒ ａ　 �。� ｅ　 ｎ ｏｉ Ｎｏ ｍａ　

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Ｖｏ． ５Ｎｏ １ １３ 　 ． 　
Ｍ ａ． ２ ０ 　 ｉ ０６ ｒ

基 因槍 法 轉(zhuǎn) 基 因技 術(shù) 的研 究 綜 述　
盧　 萍 ，王 寶 蘭　
（ 內(nèi)蒙 古 師 范 大 學(xué) 生 命 科 學(xué) 與技 術(shù) 學(xué) 院 ， 蒙古 呼 和 浩 特 ０ ０ ２ ） 內(nèi) １ ０ ２　

摘　 要 ： 基 因技 術(shù) 是 將 目的基 因?qū)?入 受體 中 ， 該 基 因在 受體 生 物 中得 以 表 達(dá) ． 因 槍 法 是 一 種 重 要 的基　 轉(zhuǎn) 使 基 因 轉(zhuǎn) 化 方 法 ． 述 了基 因槍 技 術(shù) 產(chǎn) 生 的歷 史 背 景 、 因槍 技 術(shù) 的轉(zhuǎn) 化 原 理 、 響 基 因 轉(zhuǎn) 換 效 率 的 因素 以 及 基 因槍 　 論 基 影

技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展前景等． 　
關(guān) 鍵 詞 ： 因槍 技術(shù) ；基 因 轉(zhuǎn) 化 ； 彈　 基 微

中圖 分 類 號(hào) ：Ｑ ７５ �。浮�

文 獻(xiàn) 標(biāo) 識(shí) 碼 ：Ａ 　

文 章 編 號(hào) ：１０ － ７ ５ ２０ ） １ ０ ０ － ４ ０ １ ８ ３ （０ ６ ０ － １６ ０　

轉(zhuǎn) 基 因技術(shù) 是指 將一 個(gè)或更 多 的 目的基 因?qū)?入受 體 中 ， 該基 因在受 體 生物 中得 以表 達(dá)． 使 隨著植 物基 因　 工 程技 術(shù) 的發(fā)展 。Ｏ世 紀(jì) ８ ２ Ｏ年代 末 ， 項(xiàng)新 的基 因轉(zhuǎn)化 技 術(shù)—— 基 因槍 技 術(shù) 應(yīng)運(yùn) 而 生　 ． 一 由于 基 因槍 技術(shù)　

安全性好、 效率高， 其應(yīng)用范圍 迅速?gòu)闹参锘蚬こ獭?動(dòng)物基因工程擴(kuò)大到基因治療和基因免疫領(lǐng)域， 使細(xì)胞 　
的研究 發(fā) 展到 在體操 作． 目前 。 已有基 于基 因槍技 術(shù) 的多種基 因疫苗進(jìn) 入 臨床 研究 階段 ． 　

１ 基 因槍 技 術(shù) 產(chǎn) 生 的歷 史 背 景　 　
轉(zhuǎn) 基 因技 術(shù)是 基 因工 程 技術(shù) （ 稱 重組 Ｄ 亦 ＮＡ 技 術(shù) ） 的一 個(gè) 重要 組成 部 分 ． 因 工 程技 術(shù) 以分 子 生物 學(xué)　 基 等 學(xué)科 為 發(fā)展基 礎(chǔ) ， 使人類 擁有 了創(chuàng) 造生 物遺 傳 物質(zhì) 新組 合 的 能力． 隨著 該 項(xiàng) 技術(shù) 的 日趨 成 熟與 完 善 ， 究　 研 領(lǐng)域 迅 速?gòu)?最初 的轉(zhuǎn) 基 因植物擴(kuò) 大 到轉(zhuǎn) 基 因 動(dòng) 物． ９０年人 類 正 式展 開 對(duì) 基 因診 斷 與 基 因治療 的研 究 ， １９ 在　 基 因工 程 的各相關(guān) 領(lǐng)域 ， 其是基 因免疫 和基 因治療 方面 ， 得 了較 大 的進(jìn) 展 ， 學(xué) 術(shù)研 究 步 入 了應(yīng) 用 研究　 尤 取 從
的階段 ． 　

基 因轉(zhuǎn)移 技術(shù) 面 臨 的障礙 主要是 轉(zhuǎn)移 技 術(shù)需 要跨 越細(xì) 胞 外 和細(xì) 胞 內(nèi)雙 層 障 礙． 細(xì) 胞外 的 轉(zhuǎn)移 過 程 中　 在 遇到 的 障礙有 ： ＮＡ 在 血漿 中降解 、 Ｄ 網(wǎng)狀 內(nèi)皮 組織 對(duì) 于 Ｄ ＮＡ 的吸 收 、 以將 ＤＮＡ 定位 到 特定 的器 官 、 染　 難 轉(zhuǎn)
為黏 液所 阻止 等 ； 胞 內(nèi)的障 礙包括 ： 酶體 對(duì) Ｄ 細(xì) 溶 ＮＡ 的降解 作用 、 ＮＡ胞 漿 的穩(wěn) 定 性 以及 Ｄ Ｄ ＮＡ 向質(zhì) 粒 的　

移位 等 ． 因槍技 術(shù) 克服 了以往 各種基 因轉(zhuǎn)化 技術(shù) 的局 限 ， 轉(zhuǎn)基 因技 術(shù) 進(jìn)入 了一個(gè) 新 的領(lǐng)域 ． 基 使 　

２ 基 因槍 技 術(shù) 的轉(zhuǎn) 化原 理 及 影 響基 因轉(zhuǎn) 化 效 率 的 因素　 　
２ １ 基 因槍 技 術(shù)的 轉(zhuǎn)化原 理　 ．　

用包 裹 Ｄ ＮＡ 的金屬小 顆粒轟 擊 受 體組織 ， Ｄ 使 ＮＡ 實(shí)現(xiàn) 穿壁并 被 導(dǎo)入 眾多 細(xì)胞 中， 為“ 因槍 法” 或　 稱 基 （ 微 粒 轟擊 技術(shù) ）包 裹著 ＤＮＡ 的金 屬 粒加 速 到 一 個(gè)很 高 的 速 度后 （ 常需 要 部 分 真 空 以減 少 顆 粒 的速 度 損　 ． 通 失） 穿透 受體 組織 。 般 可 以穿透 ２ 一 ～３層 細(xì)胞． 最初 是 利用 爆 炸力 在槍 管 里 推 動(dòng)一 個(gè) 大 的塑 料微 粒 載 片 ， 片　
上放 有包 裹著 ＤＮＡ 的微 粒 懸液 ， 后來 用一 個(gè) 中 間有洞 的板 擋住 高速 運(yùn)動(dòng) 的載 片 ， 載片 上 的微 粒 穿過 洞 進(jìn)入　

裝 有受 體 組織 的真 空腔 中， 并且 打 入或 者穿 過運(yùn) 動(dòng) 路徑上 的 目標(biāo) 組織 ， 粒 上攜 帶 的外 源 Ｄ 微 ＮＡ 分子 就 可 能　 進(jìn) 入 細(xì)胞 ， 進(jìn)行表 達(dá) ． 因槍 根據(jù) 驅(qū) 動(dòng)力 可 以分 為 ３種 基本 類 型． 并 基 　 （ ）火藥式 基 因槍是 最原 始 的類 型 ， １ 由美 國(guó)康乃 爾大 學(xué) Ｓｎｏｄ等人 于 １８ ａ ｆｒ ９ ７設(shè)計(jì) 制造 ［． 種基 因槍 自 ２這 ］ 　 使 用 以來 已先后 將外 源 基 因?qū)?入 到玉米 、 麥和 水 稻等 多種 植 物 材料 中， 得 了 瞬間 的或 穩(wěn) 定 的表 達(dá)． 的　 小 獲 它 主體 由滑 膛腔 、 真空 轟擊 室 和阻彈 部件 構(gòu)成 ． 料子 彈 的前端 載有 大量 攜 帶 了外 源 目的基 因 的微 彈 ， 塑 當(dāng)樣 品　
收 稿 日期 ｔ ０ ５ ３ ０　 　 ０ —０ — ９ ２ 基 金 項(xiàng) 目 內(nèi) 蒙古 自然 科學(xué) 基 金 資 助 項(xiàng) 目 （Ｄ ４ ８ ２ ５ ５　 　 ２０００００） 作者簡(jiǎn)介 ? 盧 萍 （９ ４ ）女 ， １６ 一 ， 內(nèi)蒙 古 海 拉 爾 市人 ， 內(nèi)蒙 古 師范 大 學(xué) 副教 授 ， 要 從 事 遺 傳 學(xué) 和 分 子 生 物 學(xué) 研 究 ． 主 　

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第４ 期　

盧　 萍 等：基因槍法轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究綜述　

? Ｏ 　 �。� ７?

爆炸時(shí)， 子彈 帶著微 彈 向下高 速運(yùn) 動(dòng) ， 至阻擋 板時(shí)子 彈被 阻礙 ， 其前 端 的微 彈 依靠慣 性繼 續(xù) 高速 運(yùn) 動(dòng) ， 中轟　 擊

擊室 的靶細(xì)胞 ． 該裝 置 的特 點(diǎn)是 ， 粒子速 度 主 要通 過 貨樣 的數(shù) 量 及 速 度調(diào) 節(jié) 器 控 制 ， 能 無 級(jí) 調(diào) 控 ， 控 程　 不 可
度低 ． 　

（ ）壓 縮氣體 型基 因槍 的動(dòng)力 系統(tǒng) 以氦氣 、 ２ 氮?dú)夂?二氧化 碳 氣驅(qū)動(dòng) ． 種方法 是把 載 有外 源 目的基 因 的　 一

微彈懸 滴在一 張金屬 篩 網(wǎng)上 ， 高 壓氣體 的沖擊 下 ， 在 射人受 體靶 細(xì)胞 ｝另 一種方法 是 把外 源 目的基 因與微 彈　 混合后 霧化 ， 由高 壓氣體 驅(qū) 動(dòng)射 入受體 靶細(xì)胞 ， 種系統(tǒng) 的靶 范 圍可精 確控 制到 ０ １　 左 右 ． 再 這 ．５ｍｍ 　 （）高 壓放 電型基 因槍 利用 電加 速器通 過高 壓放 電將微 彈射 人受 體靶 細(xì)胞 ， 特 點(diǎn) 是可 無 級(jí) 調(diào)控 ， 過　 ３ 其 通
調(diào)節(jié) 放電 電壓 來控制 粒子 的速 度 和入射 速度 ． 　
２ ２ 影響基 因轉(zhuǎn)化 效率 的 因素　 ．

２２ １ 基 因槍 轟擊參 數(shù) ．．　

Ｄ ＮＡ包 裹和 射擊過 程 中的各 種 物理 參數(shù) 因基 因槍類 型不 同而 有 所差 別 ． 目前　 以

使用 較為普遍 的 Ｐ Ｓ ０ ０ Ｈｅ Ｄ １ ０ ／ 型基 因槍 為例 ， ＮＡ包 裹 所用 的金 屬 粒子 主要 有金 粒 和鎢 粒 ， 粒形 狀較 均　 Ｄ 金

勻 ， 受體細(xì)胞 沒有 太 大的損 傷 ， 對(duì) 轉(zhuǎn)化效 果較 好． 氦氣 的壓力是 決定 金屬 粒子 飛行 速度 的主 要 因素 ， 壓力 過大　
會(huì)對(duì)植 物細(xì)胞 造成傷 害 ， 壓力 過小 ， 金屬 粒子不 能 進(jìn)入 細(xì)胞 ． Ｄ 一 １ ０ ／ Ｐ Ｓ ０ ０ Ｈｅ型基 因槍 提供 了不 同壓 力類 型　

的可裂膜 ， 使用 中可根 據(jù)不 同 的轉(zhuǎn)化材 料做 出選 擇． 在 此外 ， 屬粒 子 大小 、 體膜 的位 置 和靶材 料 的位 置等　 金 載 參數(shù) 也與其 他射擊 參數(shù) 相互聯(lián) 系 ， 應(yīng)根據(jù) 實(shí)驗(yàn) 具體設(shè) 置 ． 　
２ ２ ２ 微彈射 程 ．． 微 彈射程 指基 因槍 擋板 與靶細(xì) 胞間 的距離 ， 是影 響基 因轉(zhuǎn)化 率 的重 要 因素． 植 物組　 它 ① 織 中只有特定 的細(xì)胞 具 有再 生能 力 ， 因此必須 調(diào)節(jié) 射程 來轉(zhuǎn) 化這類 細(xì)胞 ． 動(dòng)力來 源恒 定 時(shí) ， 程 越短 ， 透　 在 射 穿

力越大， 對(duì)細(xì)胞的損傷也越大， 因此必須根據(jù)受體材料選擇合適的距離 ； 轉(zhuǎn)化率與彈膛 內(nèi)的真空度 呈正 ② 　 相關(guān) 關(guān)系 ， 要考 慮靶 細(xì)胞對(duì) 真 空度 的耐 受 性 ；③ 轟 擊 次數(shù) 對(duì) 轉(zhuǎn) 化 率也 有 影 響 ， 當(dāng) 的轟 擊 次 數(shù) 有 利 于 目 但 適 　
的基 因 的表 達(dá) ， 擊次數(shù) 過 多往 往會(huì)使 轟擊 細(xì)胞損 傷嚴(yán)重 ， 轟 降低 轉(zhuǎn)化 率 ； Ｄ ④ ＮＡ 的純 度 和濃 度 均會(huì) 影 響 轉(zhuǎn)　

化 率． ＮＡ 的純度越 高 ， Ｄ 轉(zhuǎn)化 效果 越好 ， Ｄ 但 ＮＡ 的濃度 越高 ， 容易使 微 彈 粘結(jié) 成 大凝 結(jié) 團(tuán) 而 降低 轉(zhuǎn) 化率 ， 越 　 目前普遍采用 的 Ｄ ＮＡ 濃度 為 １ｇ Ｌ； 氯 化鈣與 亞精胺 常用 作 Ｄ �。� ⑤ ＮＡ 的沉 淀劑 ， 淀 劑 的濃 度 對(duì)轉(zhuǎn) 化 率 也　 沉
有 影響． ｅｎ報(bào) 道 氯 化 鈣 的最 適 宜 濃 度 為 １ ９ ２ ４ｍｏ／ 亞 精 胺 的 最 適 宜 濃 度 為 ７ ６ Ｋｌｉ ． ～ ． 　 ｌＬ， ． ９× １　 ～　 ０
７ ． ×１ 一 ６ ９ ０ �。恚铮� ［ 　 ｌＬ引．

２２ ３ 受體 的生理 因素　 受體 的生理 因 素主要 指受體 細(xì)胞 或組 織 的生 理狀 態(tài) ． 般認(rèn) 為 ， 理 活性 高 的 組　 ． ．　 一 生 織 或細(xì)胞有利 于外 源 Ｄ ＮＡ 的攝 人 與整合 ． 選用再 生 能力 強(qiáng) 的外 植體 作為 轉(zhuǎn) 化受 體 ， 轟擊 前 將 受 體預(yù) 培 養(yǎng)　 在
一

段時(shí) 間 ， 可明顯 提高 轉(zhuǎn)化 率． 外 ， 另 高滲 和脫水處 理 可使 細(xì)胞質(zhì) 壁分 離 ， 而減 少轟 擊后 因細(xì)胞 質(zhì)溢 出而 導(dǎo)　 從

致 的細(xì)胞損 傷 ， 高轉(zhuǎn) 化率口 ］ 提 “． 　

３ 基 因槍 技 術(shù) 的應(yīng) 用　 　
最早應(yīng) 用基 因槍進(jìn) 行基 因轉(zhuǎn) 化并 獲得 成功 的是 Ｋｌｉ ｅ ｎ等人 ， 他們 用基 因槍轉(zhuǎn) 化 洋 蔥 表皮 的細(xì) 胞 ， 并獲 得　 了成功． 來 Ｍｃ ａ ｅ 目的基 因包 于鎢 粉 上 ， 后 Ｃｂ 將 電轟 擊 大 豆莖 尖 分 生 組織 ， 果 約 有 ２ 的組 織通 過器 官 發(fā)　 結(jié) 　 生途徑獲 得再生植 株 ， 在子 代 中檢測(cè) 到 Ｔ＃ 源基 因． ９９年用 氣 動(dòng)式基 因槍 轉(zhuǎn) 化煙 草 等植 物獲 得 成 功 ， 得　 ｂ １８ 且 到了瞬時(shí)表 達(dá)． 大麥 的轉(zhuǎn)基 因技 術(shù) 與其他 植物相 比發(fā) 展較 慢 ， ａｔａ等口 用大 麥 的細(xì) 胞 和組 織 進(jìn) 行 培養(yǎng) ， Ｋ ｒｈ ］ 檢　 測(cè) 到報(bào)告基 因 的瞬時(shí)表 達(dá)． 因槍技 術(shù)還 在禾谷 類作 物 中得 到廣泛應(yīng) 用 ， 基 克服 了單 子 葉植 物 的遺傳 轉(zhuǎn)化 受農(nóng)　 桿 菌寄 主限制 的局限性 ． ｒｏ　 ｍｍ 等 用基 因槍 技術(shù) 將 Ｇ Ｇｏｄ ｎＫａ ＵＳ報(bào) 告 基 因和 Ｐ ＡＴ選 擇 性 基 因 導(dǎo) 人 基 因型　 為 Ａ１８ ７ ８ ×Ｂ ３的玉米胚 性懸 浮 細(xì)胞 系 ， 次獲得 轉(zhuǎn)基 因玉 米 的可 育植 株 ， 轉(zhuǎn) 基 因玉米 技 術(shù) 受 到很 大 的關(guān)　 首 使 注�。Z柿榮 等用 國(guó)產(chǎn) 火 藥 式 基 因槍 實(shí) 現(xiàn) 了質(zhì) 粒 ｐ Ｈ２ ｓ ． Ｂ １對(duì) 玉 米 花粉 的 轉(zhuǎn) 化 ， 經(jīng)人 工 授 粉 ， 得 了轉(zhuǎn) 基 因　 獲
植 株［ 　 �。�

基 因槍 法不 僅可用 于直接轟 擊懸 浮 細(xì)胞 系和花 粉 ， 可 以用來 轟擊 單個(gè) 細(xì)胞 ． ａｍｕｓｎ等 利用 氦 動(dòng)力　 還 Ｒ ｓ ｓｅ
基 因槍 ， 含質(zhì) 粒 ｐ Ｃ－ １ 用 Ｂ － ７或 Ｐ ＡＲ－ ＧＵＳ的完 整 大腸 桿 菌 ＤＨ５ Ｂ － 　和含 質(zhì) 粒 ｐ ＮＹ的 根 瘤農(nóng) 桿 菌 Ａ２ ８轟　 ０ 擊 玉米 細(xì)胞 ， 得數(shù)個(gè) 瞬 間轉(zhuǎn)化 體 ， 中有 ６個(gè)是穩(wěn) 定 的口 ． 因槍 技術(shù) 在 對(duì)水 稻進(jìn) 行 基 因轉(zhuǎn) 化 的應(yīng) 用 中也　 獲 其 ］． 基

獲 得 了成功． ｒ Ｏａｄ首先 應(yīng)用 該技 術(shù)獲 得 了轉(zhuǎn)基 因水稻 的愈 傷組 織 ， 檢測(cè) 到 了 ＧＵＳ基 因的 瞬時(shí) 表達(dá)　 ．司年 ， ｆ 　 Ｃ ｏ 基 因槍技術(shù)轉(zhuǎn) 化水 稻 成熟 胚 ， 功獲 得 了轉(zhuǎn)基 因水 稻植 株 ． 麥 是 栽培 面積 最 大 的重 要 糧 食 作 物 ， ａ用 成 小 但　

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第 ３ ４卷　

卻 是最 后一 個(gè)獲 得轉(zhuǎn) 化成 功 的禾谷類 作 物． ｓｌ Ｖａ ｉ等首 次報(bào) 道 用基 因 槍技 術(shù) 將 ＧＵＳ基 因和 Ｂ ｒ 因轉(zhuǎn) 入長(zhǎng)　 ａ基
期 培養(yǎng) 的小 麥胚 性愈 傷組 織 中 ． �。� 　

隨著基 因槍 技術(shù) 的不 斷成 熟 ， 因槍 法從植 物擴(kuò) 展 到 動(dòng) 物領(lǐng) 域． ｌｎＦ Ｆ ｎ ｕ等 利 用 瞬 時(shí)高 壓 放 電式　 基 Ｅｌ 　　 ｙ ａ ｅ
（ｌｃｒ �。� ｒ　 ｉ ｈ ｒ ｅ基 因槍 ， ｅ ｔ ｃｓａｋ ｄｓ ａｇ ） ｅ ｉ ｃ 將裹 在 金粒 表 面 的 ｐ ＭＶ／ 　 ＮＡ 導(dǎo) 入老 鼠的腹 部 表皮 細(xì)胞 ， 得 抗致　 Ｃ Ｈ１Ｄ 獲

命 流行 性感 冒的 同種 亞 型病毒 的預(yù) 防和 免疫 響 應(yīng) ， 僅 接受 ０ ０�。纾� 僅 ． ４ 　 ＮＡ 的 老 鼠 ，就 有 ６　 的幸存 率 ［ ； ５ ８　 　
Ｃ ｉｅＷｏｆｎ ｉ 用 Ｂ Ｏ—Ｒ ｌ 　 ｆ ｄｎ等 ｖ ｅ Ｉ ＡＤ公 司制造 的基 因槍 將 ｐ Ｓ Ｔ 　 ｅ　 ０導(dǎo)人人 的 Ｔ細(xì)胞 中 ， 入后 的　 Ｒ Ｖ／ ＡＲ Ｒ ｖＭ１ 導(dǎo)

第 ｌ Ｏ天 ， ４ ８選擇 轉(zhuǎn)染 基 因，， Ｇ１ 合成 的 Ｄ ＮＡ 占到總 體 的 １　 ～４ 　 ， 明 使 用基 因槍 進(jìn)行 的基 因轉(zhuǎn) 移 速 度　 ｌ ６ 表

比逆轉(zhuǎn) 錄病 毒介導(dǎo) 高 約 ｌ 倍 ［ ；Ｌ ｄ ｌＤＬ等 用基 因槍 將 一 種 編碼 狂 犬 病 毒糖 苷 糖 蛋 白的 Ｄ Ｏ ８ ｏ ｗｅｌ 　 　 ＮＡ 病 毒 導(dǎo)　
入靈 長(zhǎng) 目動(dòng) 物體 內(nèi) ， Ｄ 受 ＮＡ 疫苗 接 種 的猴子 產(chǎn) 生 了抗 體 反 應(yīng) ［ ；Ｃ ｒｄＯ Ｔａｋ ｔ等利 用 Ｐ ｗｄ ｒｅｅｔ ８ ａ ｏ　 　 ｃ ｅ 　 ｏ ｅ�。辏� 的　
ＸＲ １型粒 子加 速器將 一種 編碼 Ｂ型肝炎 表面 抗 原 的 ＤＮ 疫 苗 （ ＮＡ ｖ ｃｉｅｅ ｃ ｄｎ 　 ｅａｉ ｓ �。� ｆｃ　 Ａ Ｄ 　 ａｃ �。� ｏ ｉｇｈ ｐ ｔ ｉ Ｂ ｓ ｒ ｅ ｎ ｔ　 ａ

ａ ｔ ｅ） 入志 愿者 的表 皮細(xì)胞 ， 長(zhǎng)時(shí) 間后這 些 試驗(yàn) 者身上 還 維持著 很 高水 平 的 ＨｂＡｂ反應(yīng) ［． ｎｉ ｎ導(dǎo) ｇ 很 ｓ ８　 ］
基 因槍 技術(shù) 的對(duì) 象從植 物擴(kuò) 展到 非靈 長(zhǎng)類 動(dòng) 物 、 長(zhǎng)類 動(dòng)物 ， 靈 最后 到人 體 的臨床 研 究 ， 果表 明 ， 因槍　 結(jié) 基 技 術(shù)應(yīng) 用 于基 因免 疫領(lǐng) 域 時(shí)操 作 簡(jiǎn) 便 ， ＮＡ 用 量少 （ 為 肌 肉注射 用 量 的 １ ２ ０ ／ �。� ） 效 率高 ， 痛　 Ｄ 僅 ／ ５ ～１ ２ ０ ， ５ 無

苦 ， 宜在體 操作 ， 其適 于將 Ｄ 適 尤 ＮＡ 疫苗 導(dǎo) 入表 皮細(xì)胞 ， 能獲 得理 想 的 免疫 反應(yīng) ［ ， 基 因免 疫 以及基 因　 并 ８是 ］
治 療領(lǐng) 域 的一種極 具 潛力 的基 因轉(zhuǎn)移 方法 ［ ， 因此 受到 各界 的廣 泛關(guān) 注［ 。 ｇ也 ］ １． �！�

４ 基 因槍 技 術(shù) 的優(yōu) 缺 點(diǎn) 　 　
基 因槍 技術(shù) 的優(yōu) 點(diǎn)是 ； 　

（ ）無宿 主限制 ， １ 能轉(zhuǎn) 化任何 植 物 ， 別是 那 些 由原 生 質(zhì)體再 生植 株較 為 困難 和農(nóng) 桿 菌感 染不 敏 感 的單　 特
子 葉植 物 ， 提高 了禾谷 類植 物的轉(zhuǎn) 化效 率． 　 （ ）靶受體 類 型廣泛 ， ２ 不受基 因型 的限制 ， 用 于不 同 的物種 以及 同 一 物種 的 不 同 品種 ， 轉(zhuǎn)化 植 物 的　 適 能

任何 組織 或 細(xì)胞． 　
（ ）可 以轉(zhuǎn)化 線 粒體 、 ３ 葉綠體 等植 物 的不 同細(xì)胞 器 ． 外源 Ｄ ＮＡ 進(jìn) 入細(xì)胞 質(zhì) 后很難 穿 過雙層 膜在 細(xì)胞 器 ， 　

用 基 因槍技 術(shù) 轉(zhuǎn)化 這類 細(xì) 胞器 ， 化 頻率 高 ， 復(fù) 性好 ， 目前該 領(lǐng) 域研 究 中最 常用 和 最 有效 的 Ｄ 轉(zhuǎn) 重 是 ＮＡ 導(dǎo) 入　
技 木． 　

（）可 以快速 獲得第 一 代種 子 ， 法 簡(jiǎn)便 易行 ． 因槍轉(zhuǎn) 化法 在無 菌條 件 下用載 有 外 源基 因 的金 屬 顆 �！� ４ 方 基 轟擊 受體 材料 ， 便可 以進(jìn)行 篩選 培養(yǎng) ， 需要 進(jìn)行 原 生質(zhì) 體 的制備分 離 與培 養(yǎng) 的繁 瑣工 作 ． 不 　 （ ）可控 程度 高 ， 用高 壓放 電或 高壓氣 體驅(qū) 動(dòng) ， ５ 采 可根 據(jù) 實(shí) 驗(yàn)需 要 ， 金 屬 顆 粒 （ 體 ） 入 特定 層 次 的　 將 載 射
細(xì)胞 ， 高了 遺傳轉(zhuǎn) 化 的效率 ． 提 　 基 因槍技 術(shù) 的缺 點(diǎn)是 ： 　

（ ）基 因槍轟 擊 的隨機(jī)性 導(dǎo)致 轉(zhuǎn)化 效 率不 高． １ 　 （ ）基 因插入 往往 是多拷 貝隨 機(jī)整 合 到受 體基 因組 中， 能發(fā) 生 多種 方式 的重排 ． ２ 可 　 （ ）同源 序列 能 以 Ｄ －ＤＮＡ、 ３ ＮＡ－ ＤＮＡ－Ｒ － ＮＡ、 ＮＡ— Ｒ Ｒ ＮＡ 的方 式 相 互作 用 ， 致 轉(zhuǎn) 錄或 轉(zhuǎn) 錄后 水 平　 導(dǎo)
的基 因沉 默． 　

（）轟擊 過程 中可能 造成外 源 基 因的 斷裂 ， ４ 使插 入 的基 因成 為無 活性 的片段 ． 　 （）出現(xiàn) 非轉(zhuǎn)化 體或 嵌合 體 的可能性 較 高． ５ 　
（ ）應(yīng) 用成 本較 高． ６ 　

５ 基 因槍 轉(zhuǎn) 基 因技 術(shù) 的發(fā) 展 前 景　 　
目前 ， 物基 因工 程正處 于飛 速發(fā)展 時(shí)期 ， 作 越來 越 多的轉(zhuǎn) 基 因植 物產(chǎn) 品 進(jìn) 入 市場(chǎng) ． 們 可 以利 用 基 因槍　 人 技術(shù) 轉(zhuǎn)化 培養(yǎng) 特定 農(nóng) 藝性狀 基 因（ 如抗 病 、 抗旱 、 寒 、 抗 抗?jié)?、 抗蟲 、 鹽 、 藥等 ） 耐 耐 以及 能 夠 改 良食品質(zhì) 量 （ 高　 蛋白、 油酸、 維生素等） 高 禽 ‘ 因作 物 ， 可 以利 用 該 技 術(shù) 來 開 發(fā) 和 利 用 具有 特 定 用 途 （ 的基 還 如生 物制 藥 ） 的　
作 物． 　

同樣 ， 利用 基因 槍法獲 得轉(zhuǎn) 基 因生 物也具 有 廣 闊的發(fā) 展 前 景． 用 基 因 槍法 轉(zhuǎn) 基 因雖 然 成本 較 高 ， 如　 利 但

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盧　 萍 等 ：基因槍法轉(zhuǎn)基 因技術(shù) 的研究綜述　

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果 資源共 享做得 好 ， 尤其 是 隨著科 學(xué)技 術(shù)特 別是分 子生 物學(xué) 技 術(shù) 的飛 速 發(fā)展 ， 因 槍法 的成 本 會(huì) 不 斷下 降 ， 基 　
以往 的發(fā)展 已經(jīng)很 好地 證 明了這 一點(diǎn)． 另外 ， 因槍 法轉(zhuǎn) 基 因在 宿 主細(xì) 胞 的選 擇 方 面無 任 何 限 制 ， 著 巨 大　 基 有

的發(fā)展空 間． 如 ， 例 農(nóng)桿 菌法 轉(zhuǎn)基 因受 宿主 細(xì)胞選擇 的限制較 大 ， 因而 主要應(yīng) 用在 雙子 葉植 物 的轉(zhuǎn) 基 因 中 ， 但　
基 因槍法 無此 限制． 因槍 法在轉(zhuǎn) 基 因植 物 、 基 轉(zhuǎn)基 因藥物 、 物 反應(yīng) 器 、 基 因動(dòng) 物 組織 器 官 移 植 、 體 以及　 生 轉(zhuǎn) 供 基 因治療 和基因 免疫方 面均 有廣 泛 的應(yīng) 用 ， 其對(duì) 家禽 、 尤 魚類 和 昆蟲 的應(yīng) 用研 究 以及對(duì) 乳 腺生 物反 應(yīng) 器和 昆　

蟲桿 狀病毒 構(gòu)建 的生物 反應(yīng) 器 的研究 ， 均顯示 了巨大 的經(jīng)濟(jì)效 益 和社會(huì) 效益 ． 　 目前 ， 因槍法 轉(zhuǎn)基 因技 術(shù)仍 有許 多有待 解決 的問題 ， 對(duì) 于基 因槍應(yīng) 用 的 最佳 條 件 的 探 索 、 一 步提　 基 如 進(jìn) 高在 大 哺乳動(dòng)物 中的轉(zhuǎn) 染效 率 以及對(duì) 基因槍 轉(zhuǎn)基 因整個(gè) 轉(zhuǎn) 移 過程 的微 觀 機(jī)制 的研 究 等 ， 還需 要 進(jìn) 行 深 入 的　
探 索． 　

參 考文 獻(xiàn) ： 　
［］ 郭新紅 ， １　 姜孝成 ， 良碧．基因槍技術(shù)在植物基因轉(zhuǎn)化中的作 用 ［］ 陳 Ｊ ．世 界農(nóng) 業(yè) ．０ １ ９ ：５ ２０（）４． 　 ［３ 楊奇志 ， ２　 趙琦．基因槍技術(shù) 在農(nóng)作物基 因轉(zhuǎn)化 中的應(yīng)用和進(jìn)展 ［］ Ｊ ．生物技術(shù)通報(bào) ，２ ０ （ ） ３ ． ０ ３ ６ ：６ 　
［３ ３　
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４２ ９— ４３ ． ２　

Ｊ．沈 陽農(nóng) 業(yè)大學(xué)學(xué) 報(bào) ，Ｏ ｌ ３ （ ）４ ５ ６． ２ Ｏ ，２ ６ ：６ —４ ８ 　 ［３ 柳展基．禾本科作物基因槍介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn) 展 ［］ ４　
ｇ ｎ ｚ ｔ 　 ｉｔ 　 ｉ ｓ ｔ ｔ ｇ ｅ ｃｕ ｔ �。� 　 ｈ 　 ｏ ｙ ｔｄ 　 ｎ ｈ ｌ ｎ ｉ　 ｏ ｃ — Ｉ］ Ｉ ｅ ａ Ｈ ， ｎｏ ｙ 　 Ｕｓ ｍ ｉＭ 。 ｔａ． Ｏｒ ａ ｉａ ｉ ｎ ｏ �。瑁� ｂ ｏ ｙｎ ｈｅ ｉ　 ｅｎ 　 ｌ ｓｅｒｆ ｒ ｔ ｅ ｐ ｌ ｋｅ ｉ ｅ ａ ｔ ｅｍｉ ｔｃｍａｃ　 ｓ　 ｋ ｄ 　 Ｎｏ ｍｉ ａ Ｔ． ａ 　 ｅ 　 １

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ｎ ｍｅｓｑ ｅ ｃ　 ｆａ �。� ｕ ｔｉ 　 ｃｏ ｒ ａ ｉｍ　 ｔｅ ｔｍｙ ｅ　 ｅ ｍｉｉｉ ：Ｄｅ　 ａ ａ — ［ ３ Ｉｅ ａｍｕ ａＳ，ｋ ｄ 　 。ｓ ｉａ 　 ，ｔａ． Ｇｅ ｏ �。� ｕ ｎ ｅｏ�。� ｉｄ ｓｒ ｌｍｉｒｏ ｇ ｎｓ Ｓ ｒ ｐ ｏ ｃｓ ｖ ｒ ｔｌｓ ７　 ｋ ｄ 　 ｒ　 Ｉ ｅ ａ Ｈ Ｉｈｋ ｗａＪ ｅ�。�

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［］ 王友冰 ， ８　 余興龍．基 因槍技 術(shù)發(fā)展綜述 ｒ］ Ｊ．現(xiàn)代科學(xué)儀器 ，０ ３ ３ ：Ｏ ４ ２ ０ （ ）３ 一３ ． 　 ［］ Ｆｎ ｅ。 ｅｚｂｔ．Ｔｈ　 ｏｔ ｎ ｍｅＥ ａ ９　 ｉｋｌＥ ｌａｅｈ ｉ ｅＰ ｓ　 ｏ 　 ｒ：Ｍｅｉ ｌ ｒｍｉ 　 ｉ 　 ｒｂｅ Ｇｅ ｄｃ 　 ｏ ｓ ｗ ｔ Ｐｏ ｌ ａＰ ｅ ｈ ｍｓ［］ ｈ ｌ ｃｔ１９ ，４ ：�。� ． Ｊ．Ｔ ｅ ｎ ｅ。９ ７３ ９ １ ８ ａ ２ 　
ａ 　 Ｆ， ｂ ｔ ｒＲ　 Ｆｕ ｌｒ Ｄ　 Ｖａ ｃ ｎ ｓ ｏ ｅ ｔ �。恚恚� ｉａ ｉ ｎ 　 ｙ Ｐａ ｅ ｔ ｒ ｌ ｖ ｎｚ ｔ ｓ ｂ 　 ｒ ｎ ｅ ａ ，Ｍ ｕ ａ ｌａ ｄ Ｇｅ ｅ Ｇｕ 　 ｏ ｃ ｓ　 ｎ 　 ｎ 　 ｅ ［ｏ　 Ｆｙｎ ｎ Ｅ　 Ｗ ｅ ｓ ｅ 　 Ｇ， ｌｅ 　 Ｈ．ＤＮＡ　 ｃ ｉ ｅ ：Ｐｒ ｔ ｃ ｉｅ Ｉ １］

Ｉｏ ｕ ｔ ｎ ［ ］ ｒｃ ｎｃ ｌ ｉ ｓ Ｊ．Ｐ ｏ．Ｎａ１ ｃｄ Ｓ ｉ，９ ３ ９ （４ ：１ ７ — １�。� ． ａｏ ｔ ．Ａ ａ． ｃ １ ９ ．０ ２ ） １　 ８ １ ２ ． ４ ４ 　

［ １　 唐鎮(zhèn)生．分子外科 與基 因治療 ［ ．上海 ： １］ Ｍ］ 上海 醫(yī)科大學(xué) 出版社 ，９ ９ １９ ． 　

Ｒｅ ｅ ｒ ｈ ｏ 　 ａ ｔｃｅ ｇ ｎ ｔ ａ ｓ ｅ ｉ　 ｅ ｈ ｉ ｕ 　 ｓ ａ ｃ 　 ｎ ｐ ｒｉｌ　 ｕ 　 ｒ ｎ ｇ ｎ ｃ ｔ ｃ ｎ ｑ ｅ
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【 責(zé)任 編 輯 金淑 蘭】 　



  本文關(guān)鍵詞：基因槍法轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究綜述，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。