擬南芥CBF1基因轉(zhuǎn)化香蕉及其抗寒性研究
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擬南芥CBF1基因轉(zhuǎn)化香蕉及其抗寒性研究
論文目錄
摘要第1-5頁
Abstract第5-8頁
縮略詞表第8-14頁
第一章 文獻(xiàn)綜述第14-42頁
1 植物的抗寒研究進(jìn)展第14-28頁
·植物低溫傷害的機(jī)制第14-16頁
·植物低溫傷害的類型第14-15頁
·低溫引起植物損傷的主要原因第15-16頁
·植物的抗寒生理生化研究第16-20頁
·低溫對光合作用的影響第16頁
·對呼吸作用的影響第16-17頁
·對原生質(zhì)流動性的影響第17頁
·對滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響第17-19頁
·對內(nèi)源激素的影響第19-20頁
·植物抗寒分子機(jī)理研究第20-24頁
·低溫感應(yīng)器第20-21頁
·植物的冷信號傳導(dǎo)器第21頁
·轉(zhuǎn)錄的級聯(lián)反應(yīng)第21-23頁
·低溫信號在抗寒和冷敏植物中的比較第23頁
·低溫脅迫與其他非生物脅迫的交叉第23-24頁
·植物抗寒育種研究第24-28頁
·雜交育種第24-25頁
·誘變育種第25頁
·分子育種第25-28頁
2 香蕉的轉(zhuǎn)基因研究進(jìn)展第28-34頁
·受體材料的選擇第28-29頁
·轉(zhuǎn)基因方法第29-33頁
·粒子轟擊法第30頁
·農(nóng)桿菌介導(dǎo)法第30-33頁
·電擊法第33頁
·其他改進(jìn)的方法第33頁
·高效再生體系的建立第33-34頁
3 擬南芥CBF家族與植物抗冷凍性第34-39頁
·擬南芥CBF基因家族第35-37頁
·CBF基因的克隆第35頁
·CBF基因的結(jié)構(gòu)特征第35-36頁
·CBF轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)調(diào)控特性第36-37頁
·CBF基因抗逆作用機(jī)制第37頁
·CBF轉(zhuǎn)基因研究第37-39頁
·糧食作物第37-38頁
·經(jīng)濟(jì)作物和林木第38頁
·園藝植物第38-39頁
·草類植物第39頁
4 本研究的目的和意義第39-41頁
5 技術(shù)路線第41-42頁
第二章 夫人指蕉和大蕉胚性細(xì)胞懸浮系的建立及其植株再生第42-48頁
1 材料與方法第42-44頁
·材料第42頁
·方法第42-44頁
·外植體的選擇與處理第42-43頁
·愈傷組織的誘導(dǎo)、胚性愈傷組織的選擇和繼代培養(yǎng)第43頁
·胚性懸浮誘導(dǎo)第43頁
·體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)和成熟第43頁
·胚的萌發(fā)及生根第43-44頁
·培養(yǎng)條件第44頁
2 結(jié)果與分析第44-47頁
·胚性懸浮細(xì)胞的獲得第44-45頁
·胚性懸浮細(xì)胞途徑植株再生體系的建立第45-47頁
3 討論第47頁
4 小結(jié)第47-48頁
第三章 擬南芥CBF1基因?qū)ο憬兜霓D(zhuǎn)化第48-66頁
第一節(jié) 擬南芥CBF1基因?qū)Υ蠼兜霓D(zhuǎn)化第48-61頁
1 材料與方法第48-55頁
·材料第48頁
·主要培養(yǎng)基配方第48-49頁
·ATCBF1基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建第49-52頁
·ATCBF1基因的克隆第49-50頁
·植物表達(dá)載體P1301-CBF1的構(gòu)建第50-51頁
·P1301-CBF1質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌第51-52頁
·ATCBF1基因?qū)Υ蠼兜霓D(zhuǎn)化第52頁
·侵染和共培養(yǎng)第52頁
·抗性胚的篩選第52頁
·抗性胚萌發(fā)與植株再生第52頁
·轉(zhuǎn)基因植株的驗證第52-55頁
·GUS染色鑒定第52頁
·PCR鑒定第52-53頁
·RT-PCR鑒定第53-54頁
·QRT-PCR鑒定第54-55頁
·轉(zhuǎn)基因植株的形態(tài)特征觀測第55頁
2 結(jié)果與分析第55-59頁
·A7CBF1基因的克隆第55頁
·ATCBF1基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建第55-56頁
·轉(zhuǎn)ATCBF1基因大蕉植株的獲得及GUS染色鑒定第56-57頁
·外源基因ATCBF1的表達(dá)分析第57-58頁
·RT-PCR的檢測結(jié)果第57-58頁
·QRT-PCR的檢測結(jié)果第58頁
·轉(zhuǎn)基因大蕉的形態(tài)觀測第58-59頁
3 討論第59-61頁
第二節(jié) 擬南芥CBF1基因?qū)Ψ蛉酥附兜霓D(zhuǎn)化第61-66頁
1 材料與方法第61頁
2 結(jié)果與分析第61-64頁
·ATCBF1基因的克隆及其植物表達(dá)載體的構(gòu)建第61頁
·轉(zhuǎn)基因植株的轉(zhuǎn)化、篩選、再生和GUS染色第61-62頁
·PCR檢測第62-63頁
·ATCBF1基因的表達(dá)分析第63-64頁
·RT-PCR檢測第63頁
·定量RT-PCR檢測第63-64頁
·轉(zhuǎn)基因植株的形態(tài)觀測第64頁
3 討論第64-65頁
4 小結(jié)第65-66頁
第四章 轉(zhuǎn)ATCBF1基因香蕉的抗寒性檢測第66-81頁
第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因大蕉的抗寒性檢測第66-76頁
1 材料與方法第66-70頁
·材料第66頁
·低溫處理方法第66頁
·抗寒生理生化指標(biāo)的測定第66-70頁
·離子滲漏率的測定第66-67頁
·丙二醛(MDA)的測定第67頁
·SOD酶活性測定第67-68頁
·脯氨酸含量的測定第68-69頁
·可溶性糖的測定第69頁
·相對含水量的測定第69-70頁
·數(shù)據(jù)分析第70頁
2 結(jié)果與分析第70-74頁
·離子滲漏率的測定第70頁
·丙二醛(MDA)含量的測定第70-71頁
·超氧化物歧化酶(SOD)的總活性測定第71頁
·游離脯氨酸含量測定第71-72頁
·可容性多糖測定第72頁
·相對含水量的測定第72-73頁
·轉(zhuǎn)基因大蕉植株的抗冷性檢測第73-74頁
3 討論第74-76頁
第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因夫人指蕉的抗寒性檢測第76-81頁
1 材料與方法第76頁
·材料第76頁
·低溫處理方法第76頁
·抗寒生理生化指標(biāo)的測定第76頁
2 結(jié)果與分析第76-80頁
·離子滲漏率的測定第76-77頁
·MDA的測定第77頁
·游離脯氨酸的測定第77-78頁
·可溶性糖的測定第78頁
·相對含水量的測定第78-79頁
·轉(zhuǎn)基因夫人指蕉的抗冷性檢測第79-80頁
3 小結(jié)第80-81頁
第五章 轉(zhuǎn)ATCBF1基因大蕉抗寒基因的克隆第81-96頁
1 材料與方法第81-90頁
·試驗材料第81頁
·試驗方法第81頁
·總RNA抽提第81頁
·抑制性差減雜交第81-90頁
·第一鏈cDNA的合成第81-82頁
·雙鏈cDNA(DS cDNA)的合成第82-84頁
·Ds cDNA RSAⅠ酶消化第84-85頁
·RASⅠ酶切產(chǎn)物的純化第85頁
·接頭連接第85-86頁
·消減雜交第86-87頁
·PCR擴(kuò)增第87-89頁
·PCR產(chǎn)物純化第89頁
·克隆轉(zhuǎn)化第89-90頁
·陽性克隆測序第90頁
·生物信息學(xué)分析第90頁
·基因的表達(dá)分析第90頁
2 結(jié)果與分析第90-93頁
·總RNA的提取第90-91頁
·Ds DNA的純化第91頁
·Ds cDNA合成及其RSAⅠ酶切消化第91頁
·抑制性PCR擴(kuò)增結(jié)果第91-92頁
·陽性克隆的檢測第92頁
·序列對比結(jié)果第92-93頁
·CLP基因的表達(dá)分析第93頁
3 討論第93-95頁
4 小結(jié)第95-96頁
結(jié)論第96-98頁
論文創(chuàng)新點第98-99頁
下一步工作設(shè)想第99-100頁
參考文獻(xiàn)第100-122頁
附錄第122-123頁
致謝第123-124頁
個人簡歷第124頁
論文編號BS21394,,這篇論文共124頁
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本文編號:163582
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