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擬南芥CBF1基因轉(zhuǎn)化香蕉及其抗寒性研究

發(fā)布時間:2016-11-03 20:52

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擬南芥CBF1基因轉(zhuǎn)化香蕉及其抗寒性研究

 

     論文目錄

 

摘要第1-5頁

Abstract第5-8頁

縮略詞表第8-14頁

第一章 文獻(xiàn)綜述第14-42頁

 1 植物的抗寒研究進(jìn)展第14-28頁

   ·植物低溫傷害的機(jī)制第14-16頁

     ·植物低溫傷害的類型第14-15頁

     ·低溫引起植物損傷的主要原因第15-16頁

   ·植物的抗寒生理生化研究第16-20頁

     ·低溫對光合作用的影響第16頁

     ·對呼吸作用的影響第16-17頁

     ·對原生質(zhì)流動性的影響第17頁

     ·對滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響第17-19頁

     ·對內(nèi)源激素的影響第19-20頁

   ·植物抗寒分子機(jī)理研究第20-24頁

     ·低溫感應(yīng)器第20-21頁

     ·植物的冷信號傳導(dǎo)器第21頁

     ·轉(zhuǎn)錄的級聯(lián)反應(yīng)第21-23頁

     ·低溫信號在抗寒和冷敏植物中的比較第23頁

     ·低溫脅迫與其他非生物脅迫的交叉第23-24頁

   ·植物抗寒育種研究第24-28頁

     ·雜交育種第24-25頁

     ·誘變育種第25頁

     ·分子育種第25-28頁

 2 香蕉的轉(zhuǎn)基因研究進(jìn)展第28-34頁

   ·受體材料的選擇第28-29頁

   ·轉(zhuǎn)基因方法第29-33頁

     ·粒子轟擊法第30頁

     ·農(nóng)桿菌介導(dǎo)法第30-33頁

     ·電擊法第33頁

     ·其他改進(jìn)的方法第33頁

   ·高效再生體系的建立第33-34頁

 3 擬南芥CBF家族與植物抗冷凍性第34-39頁

   ·擬南芥CBF基因家族第35-37頁

     ·CBF基因的克隆第35頁

     ·CBF基因的結(jié)構(gòu)特征第35-36頁

     ·CBF轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)調(diào)控特性第36-37頁

     ·CBF基因抗逆作用機(jī)制第37頁

   ·CBF轉(zhuǎn)基因研究第37-39頁

     ·糧食作物第37-38頁

     ·經(jīng)濟(jì)作物和林木第38頁

     ·園藝植物第38-39頁

     ·草類植物第39頁

 4 本研究的目的和意義第39-41頁

 5 技術(shù)路線第41-42頁

第二章 夫人指蕉和大蕉胚性細(xì)胞懸浮系的建立及其植株再生第42-48頁

 1 材料與方法第42-44頁

   ·材料第42頁

   ·方法第42-44頁

     ·外植體的選擇與處理第42-43頁

     ·愈傷組織的誘導(dǎo)、胚性愈傷組織的選擇和繼代培養(yǎng)第43頁

     ·胚性懸浮誘導(dǎo)第43頁

     ·體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)和成熟第43頁

     ·胚的萌發(fā)及生根第43-44頁

     ·培養(yǎng)條件第44頁

 2 結(jié)果與分析第44-47頁

   ·胚性懸浮細(xì)胞的獲得第44-45頁

   ·胚性懸浮細(xì)胞途徑植株再生體系的建立第45-47頁

 3 討論第47頁

 4 小結(jié)第47-48頁

第三章 擬南芥CBF1基因?qū)ο憬兜霓D(zhuǎn)化第48-66頁

 第一節(jié) 擬南芥CBF1基因?qū)Υ蠼兜霓D(zhuǎn)化第48-61頁

  1 材料與方法第48-55頁

   ·材料第48頁

   ·主要培養(yǎng)基配方第48-49頁

   ·ATCBF1基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建第49-52頁

     ·ATCBF1基因的克隆第49-50頁

     ·植物表達(dá)載體P1301-CBF1的構(gòu)建第50-51頁

     ·P1301-CBF1質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌第51-52頁

   ·ATCBF1基因?qū)Υ蠼兜霓D(zhuǎn)化第52頁

     ·侵染和共培養(yǎng)第52頁

     ·抗性胚的篩選第52頁

     ·抗性胚萌發(fā)與植株再生第52頁

   ·轉(zhuǎn)基因植株的驗證第52-55頁

     ·GUS染色鑒定第52頁

     ·PCR鑒定第52-53頁

     ·RT-PCR鑒定第53-54頁

     ·QRT-PCR鑒定第54-55頁

   ·轉(zhuǎn)基因植株的形態(tài)特征觀測第55頁

  2 結(jié)果與分析第55-59頁

   ·A7CBF1基因的克隆第55頁

   ·ATCBF1基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建第55-56頁

   ·轉(zhuǎn)ATCBF1基因大蕉植株的獲得及GUS染色鑒定第56-57頁

   ·外源基因ATCBF1的表達(dá)分析第57-58頁

     ·RT-PCR的檢測結(jié)果第57-58頁

     ·QRT-PCR的檢測結(jié)果第58頁

   ·轉(zhuǎn)基因大蕉的形態(tài)觀測第58-59頁

  3 討論第59-61頁

 第二節(jié) 擬南芥CBF1基因?qū)Ψ蛉酥附兜霓D(zhuǎn)化第61-66頁

  1 材料與方法第61頁

  2 結(jié)果與分析第61-64頁

   ·ATCBF1基因的克隆及其植物表達(dá)載體的構(gòu)建第61頁

   ·轉(zhuǎn)基因植株的轉(zhuǎn)化、篩選、再生和GUS染色第61-62頁

   ·PCR檢測第62-63頁

   ·ATCBF1基因的表達(dá)分析第63-64頁

     ·RT-PCR檢測第63頁

     ·定量RT-PCR檢測第63-64頁

   ·轉(zhuǎn)基因植株的形態(tài)觀測第64頁

  3 討論第64-65頁

  4 小結(jié)第65-66頁

第四章 轉(zhuǎn)ATCBF1基因香蕉的抗寒性檢測第66-81頁

 第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因大蕉的抗寒性檢測第66-76頁

  1 材料與方法第66-70頁

   ·材料第66頁

   ·低溫處理方法第66頁

   ·抗寒生理生化指標(biāo)的測定第66-70頁

     ·離子滲漏率的測定第66-67頁

     ·丙二醛(MDA)的測定第67頁

     ·SOD酶活性測定第67-68頁

     ·脯氨酸含量的測定第68-69頁

     ·可溶性糖的測定第69頁

     ·相對含水量的測定第69-70頁

   ·數(shù)據(jù)分析第70頁

  2 結(jié)果與分析第70-74頁

   ·離子滲漏率的測定第70頁

   ·丙二醛(MDA)含量的測定第70-71頁

   ·超氧化物歧化酶(SOD)的總活性測定第71頁

   ·游離脯氨酸含量測定第71-72頁

   ·可容性多糖測定第72頁

   ·相對含水量的測定第72-73頁

   ·轉(zhuǎn)基因大蕉植株的抗冷性檢測第73-74頁

  3 討論第74-76頁

 第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因夫人指蕉的抗寒性檢測第76-81頁

  1 材料與方法第76頁

   ·材料第76頁

   ·低溫處理方法第76頁

   ·抗寒生理生化指標(biāo)的測定第76頁

  2 結(jié)果與分析第76-80頁

   ·離子滲漏率的測定第76-77頁

   ·MDA的測定第77頁

   ·游離脯氨酸的測定第77-78頁

   ·可溶性糖的測定第78頁

   ·相對含水量的測定第78-79頁

   ·轉(zhuǎn)基因夫人指蕉的抗冷性檢測第79-80頁

  3 小結(jié)第80-81頁

第五章 轉(zhuǎn)ATCBF1基因大蕉抗寒基因的克隆第81-96頁

 1 材料與方法第81-90頁

   ·試驗材料第81頁

   ·試驗方法第81頁

     ·總RNA抽提第81頁

   ·抑制性差減雜交第81-90頁

     ·第一鏈cDNA的合成第81-82頁

     ·雙鏈cDNA(DS cDNA)的合成第82-84頁

     ·Ds cDNA RSAⅠ酶消化第84-85頁

     ·RASⅠ酶切產(chǎn)物的純化第85頁

     ·接頭連接第85-86頁

     ·消減雜交第86-87頁

     ·PCR擴(kuò)增第87-89頁

     ·PCR產(chǎn)物純化第89頁

     ·克隆轉(zhuǎn)化第89-90頁

     ·陽性克隆測序第90頁

     ·生物信息學(xué)分析第90頁

     ·基因的表達(dá)分析第90頁

 2 結(jié)果與分析第90-93頁

   ·總RNA的提取第90-91頁

   ·Ds DNA的純化第91頁

   ·Ds cDNA合成及其RSAⅠ酶切消化第91頁

   ·抑制性PCR擴(kuò)增結(jié)果第91-92頁

   ·陽性克隆的檢測第92頁

   ·序列對比結(jié)果第92-93頁

   ·CLP基因的表達(dá)分析第93頁

 3 討論第93-95頁

 4 小結(jié)第95-96頁

結(jié)論第96-98頁

論文創(chuàng)新點第98-99頁

下一步工作設(shè)想第99-100頁

參考文獻(xiàn)第100-122頁

附錄第122-123頁

致謝第123-124頁

個人簡歷第124頁


 

論文編號BS21394,,這篇論文共124頁
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本文編號:163582

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