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葡萄花發(fā)育相關(guān)基因的克隆與表達(dá)特性研究

     論文目錄

摘要第1-12頁

ABSTRACT第12-16頁

縮略詞第16-19頁

第一章 文獻(xiàn)綜述第19-40頁

 1 開花決定第19-22頁

   ·光周期誘導(dǎo)途徑第19-21頁

   ·春化作用途徑第21頁

   ·自主途徑第21頁

   ·赤霉素(GA)誘導(dǎo)途徑第21頁

   ·開花抑制基因第21-22頁

 2 花的發(fā)端第22頁

 3 花器官的發(fā)育第22-31頁

   ·花發(fā)育的ABC模型及其發(fā)展第23-26頁

     ·花發(fā)育的ABC模型第23頁

     ·花發(fā)育的ABCD模型第23-24頁

     ·花發(fā)育的ABCDE模型第24-25頁

     ·花發(fā)育的四重奏模型第25-26頁

   ·MADS-box基因研究進(jìn)展第26-31頁

     ·MADS-box基因的類型及其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)第26-27頁

     ·MADS-box基因的重復(fù)及其功能的多樣性第27-31頁

       ·AP1/FRUITFULL(FUL)-like亞家族(A類)第28-29頁

       ·AP3/PI-like(DEF/GLO)亞家族(B類)第29頁

       ·AG-like 家族(C/D類)第29-30頁

       ·SEP-like亞家族(E類)第30-31頁

 4 葡萄花發(fā)育的分子生物學(xué)研究進(jìn)展第31-38頁

   ·葡萄的開花過程第31-32頁

   ·卷須和花序是相關(guān)的結(jié)構(gòu)第32-33頁

   ·葡萄的花序起始和發(fā)育第33-35頁

     ·葡萄的開花轉(zhuǎn)變第33-34頁

     ·赤霉素和基因VvGAI1對葡萄開花的影響第34頁

     ·分生組織決定基因第34-35頁

   ·葡萄的花和果實(shí)發(fā)育第35-38頁

     ·花和果實(shí)的器官決定基因第35-36頁

     ·葡萄的MADS-box基因第36-38頁

       ·VvMADS1:一個(gè)推定的C類基因第36-37頁

       ·VvMADS2和VvMADS4:推定的SEPALLATA基因第37頁

       ·VvMADS3和VvMADS5:未知功能的MADS-box基因第37-38頁

       ·VvMADS8:SOC1的同源基因第38頁

       ·VvMADS9:一個(gè)B類MADS-box基因第38頁

 5 小結(jié)與展望第38-40頁

第二章 葡萄MADS-box家族基因保守片段的克隆與序列分析第40-48頁

 1 材料與方法第41-43頁

   ·試驗(yàn)材料第41頁

   ·總RNA的提取及檢測第41-42頁

   ·cDNA第一鏈的合成第42頁

   ·RT-PCR第42-43頁

   ·序列及系統(tǒng)發(fā)育分析第43頁

 2 結(jié)果與分析第43-47頁

   ·總RNA提取第43-44頁

   ·RT-PCR擴(kuò)增葡萄MADS-box基因保守片段第44頁

   ·序列及系統(tǒng)發(fā)育分析第44-47頁

 3 討論第47-48頁

第三章 葡萄LEAFY基因啟動子的克隆與序列分析第48-58頁

 1 材料與方法第49-51頁

   ·材料第49頁

     ·植物材料第49頁

     ·主要試劑第49頁

   ·方法第49-51頁

     ·總DNA提取第49頁

     ·LFY基因克隆第49-50頁

     ·LEAFY基因5′上游序列的克隆第50-51頁

       ·接頭、引物設(shè)計(jì)與合成第50頁

       ·基因組步移文庫的構(gòu)建第50頁

       ·PCR反應(yīng)第50-51頁

     ·啟動子序列分析第51頁

 2 結(jié)果與分析第51-56頁

   ·LFY基因克隆與序列分析第51頁

   ·LFY基因5′側(cè)翼區(qū)域的克隆與序列分析第51-56頁

     ·引物設(shè)計(jì)第51頁

     ·基因組DNA的酶切、接頭連接第51-52頁

     ·Touch-Down PCR第52-53頁

     ·序列分析及順式元件預(yù)測第53-55頁

     ·不同物種FLO/LFY同源基因啟動子序列的比較第55-56頁

 3 討論第56-58頁

第四章 葡萄AGAMOUS-like MADS-box基因的克隆與表達(dá)特性研究第58-72頁

 1 材料和方法第59-64頁

   ·試驗(yàn)材料第59-60頁

   ·總RNA的提取第60頁

   ·cDNA第一鏈的合成第60頁

   ·3′RACE及VvAG編碼區(qū)全長cDNA的擴(kuò)增第60頁

   ·VvAG序列多比對及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建第60-61頁

   ·半定量RT-PCR檢測VvAG在不同葡萄組織中的表達(dá)第61頁

   ·VvAG基因結(jié)構(gòu)分析第61頁

   ·VvAG雙元表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定第61頁

   ·農(nóng)桿菌介導(dǎo)VvAG轉(zhuǎn)化煙草第61-62頁

   ·轉(zhuǎn)VvAG基因煙草的分子檢測第62-64頁

     ·煙草總DNA的提取第62頁

     ·煙草總RNA的提取第62-63頁

     ·總RNA中DNA的消化第63頁

     ·PCR及RT-PCR反應(yīng)第63-64頁

 2 結(jié)果與分析第64-71頁

   ·VvAG基因的克隆第64頁

   ·VvAG基因的序列分析第64-67頁

   ·VvAG在不同葡萄組織中的表達(dá)分析第67-68頁

   ·VvAG基因的基因組結(jié)構(gòu)第68頁

   ·VvAG雙元表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定第68-70頁

   ·轉(zhuǎn)VvAG基因煙草的PCR檢測第70頁

   ·轉(zhuǎn)VvAG基因煙草的RT-PCR檢測第70-71頁

 3 討論第71-72頁

第五章 葡萄APETALA3(AP3)同源基因的克隆與表達(dá)特性研究第72-83頁

 1 材料和方法第73-74頁

   ·試驗(yàn)材料第73頁

   ·總RNA的提取第73頁

   ·cDNA第一鏈的合成第73頁

   ·VvAP3 cDNA編碼區(qū)全長的克隆與序列測定第73-74頁

   ·VvAP3 cDNA序列對比及系統(tǒng)發(fā)育分析第74頁

   ·VvAP3基因mRNA組織表達(dá)的RT-PCR分析第74頁

   ·VvAP3基因組結(jié)構(gòu)分析第74頁

   ·VvAP3基因雙元表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定第74頁

   ·VvAP3基因轉(zhuǎn)化煙草及分子檢測第74頁

 2 結(jié)果與分析第74-82頁

   ·VvAP3 cDNA全長的克隆與序列分析第74-76頁

   ·VvAP3基因的系統(tǒng)發(fā)育分析第76-78頁

   ·VvAP3基因在不同葡萄組織中的表達(dá)分析第78-79頁

   ·VvAP3基因組結(jié)構(gòu)分析第79頁

   ·VvAP3雙元表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定第79-81頁

   ·轉(zhuǎn)VvAP3基因煙草的PCR檢測第81頁

   ·轉(zhuǎn)VvAP3基因煙草的RT-PCR分析第81-82頁

 3 討論第82-83頁

第六章 葡萄FLOWERING LOCUSC(FLC)類MADS-box基因的克隆與表達(dá)特性研究第83-93頁

 1 材料和方法第84-85頁

   ·試驗(yàn)材料第84頁

   ·總RNA的提取第84頁

   ·cDNA第一鏈的合成第84頁

   ·VvFLC cDNA克隆與序列測定第84-85頁

   ·VvFLC cDNA序列對比分析及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建第85頁

   ·VvFLC基因mRNA組織表達(dá)的RT-PCR分析第85頁

   ·VvFLC基因組結(jié)構(gòu)分析第85頁

   ·VvFLC基因雙元表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定第85頁

   ·VvFLC基因轉(zhuǎn)化煙草及分子檢測第85頁

 2 結(jié)果與分析第85-92頁

   ·VvFLC cDNA全長的克隆與序列分析第85-87頁

   ·VvFLC基因的系統(tǒng)發(fā)育分析第87-89頁

   ·VvFLC基因在葡萄不同組織器官的表達(dá)分析第89頁

   ·VvFLC基因組結(jié)構(gòu)分析第89-90頁

   ·VvFLC雙元表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定第90-91頁

   ·轉(zhuǎn)VvFLC基因煙草的PCR檢測第91頁

   ·轉(zhuǎn)VvFLC基因煙草的RT-PCR檢測第91-92頁

 3 討論第92-93頁

第七章 葡萄FLOWERING LOCUST(FT)基因的克隆、表達(dá)及功能研究第93-107頁

 1 材料和方法第95-96頁

   ·試驗(yàn)材料第95頁

   ·總RNA的提取第95頁

   ·cDNA第一鏈的合成第95頁

   ·VvFT cDNA克隆與序列測定第95頁

   ·VvFT cDNA序列分析第95頁

   ·VvFT基因mRNA組織表達(dá)的RT-PCR分析第95-96頁

   ·VvFT基因組全長的克隆及基因結(jié)構(gòu)分析第96頁

   ·VvFT基因的二級及三級結(jié)構(gòu)預(yù)測第96頁

   ·VvFT基因正義表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定第96頁

   ·農(nóng)桿菌介導(dǎo)VvFT轉(zhuǎn)化煙草第96頁

   ·轉(zhuǎn)VvFT基因煙草的分子檢測第96頁

   ·轉(zhuǎn)VvFT基因煙草的表型觀察第96頁

 2 結(jié)果與分析第96-105頁

   ·葡萄FT基因編碼區(qū)全長cDNA的克隆與序列分析第96-98頁

   ·VvFT基因組全長的克隆及基因結(jié)構(gòu)分析第98-99頁

   ·VvFTmRNA在不同葡萄組織中的表達(dá)分析第99-100頁

   ·VvFT的二級和三級結(jié)構(gòu)預(yù)測第100-101頁

   ·VvFT超表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定第101-103頁

   ·轉(zhuǎn)VvFT基因煙草的PCR檢測第103-104頁

   ·轉(zhuǎn)VvFT基因煙草的RT-PCR檢測第104頁

   ·轉(zhuǎn)VvFT基因煙草表型觀察第104-105頁

 3 討論第105-107頁

全文討論第107-112頁

 1 葡萄中的MADS-box家族基因第107頁

 2 葡萄中C/D類MADS-box基因的基因重復(fù)及表達(dá)模式第107-108頁

 3 葡萄中B類基因的重復(fù)及表達(dá)模式的多樣性第108-110頁

 4 葡萄FLC亞家族基因的克隆及表達(dá)第110頁

 5 VvFT基因的功能及其應(yīng)用前景第110-111頁

 6 葡萄LFY基因啟動子序列特征及其在基因表達(dá)調(diào)控中的作用第111-112頁

全文結(jié)論第112-114頁

創(chuàng)新點(diǎn)第114-115頁

參考文獻(xiàn)第115-125頁

附錄第125-132頁

攻讀博士期間發(fā)表論文第132-133頁

致謝第133頁

論文編號BS1376267，這篇論文共133頁
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