山斑鳩禽痘病毒的分離與致病性研究
本文關(guān)鍵詞:機(jī)械式挖掘機(jī)工作裝置機(jī)構(gòu)性能研究與優(yōu)化設(shè)計(jì)平臺(tái)研發(fā),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】禽痘病毒屬于痘病毒科脊椎動(dòng)物痘病毒亞科,在世界范圍內(nèi)廣泛分布,能導(dǎo)致多種動(dòng)物包括家禽,寵物鳥以及野生動(dòng)物發(fā)病,不僅使養(yǎng)殖業(yè)遭受了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,而且對野生動(dòng)物群也構(gòu)成了極大的威脅。本研究通過臨床診斷、病毒分離純化、動(dòng)物回歸試驗(yàn)以及分子生物學(xué)等方法對自然發(fā)病的野生山斑鳩進(jìn)行綜合診斷,證明引起山斑鳩皮膚痘疹的病原為痘病毒科脊椎動(dòng)物痘病毒亞科禽痘病毒屬成員,并對此病毒的理化特性以及分子生物學(xué)特征進(jìn)行了綜合分析。本試驗(yàn)記錄并觀察了自然感染禽痘病毒的野生山斑鳩的臨床癥狀和病理變化。感染的山斑鳩臨床表現(xiàn)為身體消瘦,羽毛雜亂,在皮膚少毛部位包括腿部,眼瞼以及胸部都出現(xiàn)了大小不一的棕褐色痘痂,對感染的山斑鳩進(jìn)行剖檢,其它組織器官未見明顯的眼觀病變。組織病理學(xué)觀察皮膚痘痂,發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞呈空泡狀水泡變性,細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)嗜酸性包涵體。經(jīng)透射電鏡觀察結(jié)果顯示,感染的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)成熟的病毒顆粒,分布于囊膜結(jié)構(gòu)周圍,且高爾基體增多。取感染的山斑鳩痘痂進(jìn)行組織研磨,經(jīng)雞胚尿囊膜接種方法,分離得到一株病毒,將其命名為山斑鳩痘病毒(StreptopeliaorientailpoxvirusSoPV)。該病毒雞胚半數(shù)致死量ELD50為10-3.70/0.2mL,此毒株能在雞胚成纖維細(xì)胞上增殖,并引起細(xì)胞病變,其半數(shù)感染量TCID50為104.8/0.05mL。病毒的病原性,理化特性檢測結(jié)果顯示,該病毒呈磚型,大小為250x300nm,有囊膜。病毒在55℃以及60℃分別作用60min和30min后即可失活。病毒在pH3.0及pH11.0環(huán)境下無抵抗力,對乙醚不敏感。紫外照射60min可使病毒失活,囊膜表面具有血凝素,能夠凝集雞紅細(xì)胞。對SoPV核心蛋白基因P4b進(jìn)行PCR特異性擴(kuò)增,得到580bp長的基因序列,遺傳進(jìn)化分析顯示該毒株與斑尾林鴿身上所分離的禽痘病毒P4b基因同源性最高,約為99%。在進(jìn)化分型上與核心蛋白基因P4bA3型最為接近,但不屬于A3型。通過動(dòng)物回歸試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)SPF雛雞對SoPV敏感性較低,感染雛雞病程短,病理損傷輕,僅在接種的皮膚毛囊部位出現(xiàn)痘疹,病理組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)毛囊上皮細(xì)胞中有嗜酸性包涵體,并且伴有毛囊炎,SPF雛雞于接毒后9d開始恢復(fù)正常。上述結(jié)果表明,引起野生山斑鳩皮膚痘疹的主要病原為痘病毒科脊椎動(dòng)物痘病毒亞科禽痘病毒。
【作者】劉吉人;
【導(dǎo)師】程國富;
【作者基本信息】華中農(nóng)業(yè)大學(xué),,基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué),2013,碩士
【關(guān)鍵詞】禽痘病毒;雞痘病毒;山斑鳩痘病毒;分離鑒定;PCR;
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本文編號:153081
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