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《北京中醫(yī)藥大學(xué)》 2015年

清熱化痰活血方藥穩(wěn)定ApoE基因敲除小鼠主動脈易損斑塊及與蛋白酶體通路的關(guān)系

彭婧嬪  

【摘要】：動脈粥樣硬化(atherosclerosis, AS)是眾多心腦血管疾病的重要病理基礎(chǔ)。近年來心腦血管疾病的發(fā)生率呈逐年上升趨勢,通過大量研究發(fā)現(xiàn),形成突發(fā)急性冠脈綜合癥(ACS)、急性腦梗死等腦血管病急癥的主要因素之一是易損斑塊(Vulnerable plaque)導(dǎo)致的斑塊破裂及繼發(fā)性血栓。在AS的病理機制的認(rèn)識上,1999年Ross在內(nèi)皮損傷反應(yīng)學(xué)說基礎(chǔ)上提出的AS是一種炎癥性疾病被廣泛接受。大量證據(jù)也表明AS斑塊的炎癥與斑塊破裂之間關(guān)系密切、炎癥反應(yīng)越活躍,斑塊越不穩(wěn)定。因此各種參與AS誘導(dǎo)易損斑塊病變的炎癥因子的研究已成為近年來的熱點。氧化應(yīng)激與動脈粥樣硬化進展之間關(guān)系密切,氧化應(yīng)激所產(chǎn)生的氧自由基可以與蛋白、脂質(zhì)及核酸發(fā)生復(fù)雜的氧化反應(yīng)產(chǎn)生多種的損傷,可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷、平滑肌細(xì)胞增生、細(xì)胞外基質(zhì)降解與增生,在誘導(dǎo)和加速血管損傷,以及促使斑塊的形成的過程中起到重要作用。我們既往的研究表明清熱化痰活血方具有穩(wěn)定斑塊的作用,但其作用機制有尚有待進行進一步的深入探討,本實驗通過觀察清熱化痰活血方對ApoE基因敲除小鼠主動脈粥樣硬化斑塊的病理形態(tài)及其對和氧自由基(02-)表達(dá)的影響和炎癥等相關(guān)因子的影響,揭示清熱化痰活血方穩(wěn)定AS斑塊的可能作用機制。目的：觀察清熱化痰活血方對ApoE基因敲除小鼠主動脈粥樣硬化易損斑塊的穩(wěn)定作用及對泛素通路的影響。方法：Apo E基因敲除小鼠80只,自8周齡時予以高脂飲食,隨機分為空白對照組(n=20只)、蛋白酶體抑制劑組(n=20只)、蛋白酶體抑制劑加清熱化痰活血方組(n=20只)及清熱化痰活血方組(n=20只)。自13周始給藥,分別給予生理鹽水10mg/kg/d,硼替佐米30mg/kg/d,硼替佐米30mg/kg/d加清熱化痰活血方180mg/kg/d及清熱化痰活血方180mg/kg/d,17周后評估主動脈病理形態(tài)學(xué)改變,免疫熒光法測定主動脈斑塊中單核細(xì)胞／巨噬細(xì)胞-2(MOMA-2)的表達(dá)、免疫組化法測定NF-κB的P65亞基的表達(dá)及CD40L表達(dá),熒光探針的方法測定超氧化物陰離子自由基的表達(dá)。結(jié)果：蛋白酶體抑制劑加清熱化痰活血方組與蛋白酶體抑制劑組比較主動脈的MOMA-2的熒光表達(dá)、CD40L的表達(dá)、NF-κB的P65亞基的表達(dá)、超氧化物陰離子自由基的表達(dá)均無顯著變化,但斑塊的脂質(zhì)核含量有顯著下降(P0.01),清熱化痰活血方組與其他各組比較主動脈的MOMA-2的熒光表達(dá)、NF-κ B的P65亞基的表達(dá)、超氧化物陰離子自由基的表達(dá)、斑塊的脂質(zhì)核含量均有顯著下降(P0.01)。結(jié)論：清熱化痰活血方組可以顯著抑制主動脈動脈粥樣硬化的炎性因子的表達(dá),其機制與部分抑制泛素蛋白酶體通路有關(guān),蛋白酶體可能是中藥作用的一個新靶點。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

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