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殼聚糖的改性研究及其包埋蚯蚓血紅蛋白納米微粒的制備

發(fā)布時(shí)間:2016-09-24 09:06

  本文關(guān)鍵詞:雙水相系統(tǒng)在抗生素提取和合成中的應(yīng)用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《暨南大學(xué)》 2006年

殼聚糖的改性研究及其包埋蚯蚓血紅蛋白納米微粒的制備

吳忠平  

【摘要】:用雙水相萃取和Q-sepharose離子交換層析等從蚯蚓中提取純化蚯蚓血紅蛋白。具體考察了提取純化蚯蚓血紅蛋白的各種實(shí)驗(yàn)條件和純化品的理化性質(zhì)。并通過改性后的殼聚糖衍生物-ACS,對蚯蚓血紅蛋白進(jìn)行了包埋、制備納米微粒的研究。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:蚯蚓血紅蛋白的提取純化主要取決于其等電點(diǎn)、過層析柱時(shí)緩沖液體系的pH等實(shí)驗(yàn)條件。通過SDS-PAGE、血紅素含量測定和動物實(shí)驗(yàn)等結(jié)果證明雙水相萃取和離子交換層析從蚯蚓中提取純化的血紅蛋白具有很高的純度和載氧能力。 實(shí)驗(yàn)證明用丙稀酸改性后的殼聚糖衍生物ACS具有很好的水溶性和生物相溶性。通過正交設(shè)計(jì)對殼聚糖進(jìn)行改性實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:殼聚糖氨基取代度主要取決于反應(yīng)溫度、丙稀酸/殼聚糖的用量比和反應(yīng)時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)成功制備了N-羧乙基殼聚糖衍生物。并通過茚三酮法、紅外光譜和核磁共振等對改性后的產(chǎn)品進(jìn)行了定性分析。 用自制改性后的殼聚糖衍生物和離子交聯(lián)劑三聚磷酸鈉對蚯蚓血紅蛋白進(jìn)行包埋制備納米粒子,并通過TEM透射電鏡對其形貌進(jìn)行了觀察。具體考察了包埋率和包埋后蚯蚓血紅蛋白在緩沖液和人工模擬胃液中的釋放行為,,并建立了模擬釋放曲線。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號】:TQ464
【目錄】:

  • 摘要4-5
  • ABSTRACT5-8
  • 第一章 緒論8-34
  • 1.1 血代用品發(fā)展及應(yīng)用8-13
  • 1.1.1 血代用品研究由來8
  • 1.1.2 血代品發(fā)展歷史8-9
  • 1.1.3 血代用品的研究進(jìn)展9-11
  • 1.1.4 人血代品的臨床研究11-12
  • 1.1.5 產(chǎn)業(yè)化前景12-13
  • 1.1.6 我國人血代品的研究開發(fā)情況13
  • 1.2 蚯蚓血紅蛋白的發(fā)展與應(yīng)用13-15
  • 1.2.1 蚯蚓簡介13-14
  • 1.2.2 蚯蚓血紅蛋白14-15
  • 1.3 殼聚糖的改性研究進(jìn)展15-31
  • 1.3.1 殼聚糖的物理性質(zhì)16-17
  • 1.3.2 殼聚糖的結(jié)構(gòu)特征17-18
  • 1.3.3 殼聚糖的化學(xué)性質(zhì)18-26
  • 1.3.4 改性殼聚糖在生物醫(yī)藥方面的應(yīng)用26-28
  • 1.3.5 殼聚糖取代度測定方法概述28-31
  • 1.4 離子交聯(lián)高分子在生物醫(yī)藥方面的應(yīng)用31-32
  • 1.4.1 聚陽離子-聚陰離子型復(fù)合物31
  • 1.4.2 聚離子-兩性聚合物31-32
  • 1.4.3 聚電解質(zhì)-小分子離子復(fù)合物32
  • 1.5 本論文的目的、意義及其主要內(nèi)容32-34
  • 第二章 蚯蚓血紅蛋白的制備34-46
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器34-35
  • 2.1.1 主要試劑34
  • 2.1.2 主要儀器34-35
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)部分35-37
  • 2.2.1 蚯蚓血紅蛋白的提取純化35-36
  • 2.2.2 蚯蚓血紅蛋白的純度檢測36-37
  • 2.2.3 蚯蚓血紅蛋白的濃度測定37
  • 2.2.4 動物實(shí)驗(yàn)37
  • 2.3 結(jié)果與討論37-44
  • 2.3.1 實(shí)驗(yàn)條件對蚯蚓血紅蛋白提取純化的影響37-38
  • 2.3.2 蚯蚓血紅蛋白的純度檢測38-41
  • 2.3.3 蚯蚓血紅蛋白的濃度測定41-43
  • 2.3.4 動物實(shí)驗(yàn)43-44
  • 2.4 結(jié)論44-46
  • 第三章 N-羧乙基殼聚糖的合成及結(jié)構(gòu)表征46-61
  • 3.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器46-47
  • 3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑46
  • 3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器46-47
  • 3.2 N-羧乙基殼聚糖的制備47
  • 3.3 結(jié)構(gòu)測定47-49
  • 3.3.1 紅外光譜測試47
  • 3.3.2 ~1H-NMR核磁共振測試47
  • 3.3.3 ACS取代度(DDS)的測定47-48
  • 3.3.4 ACS等電點(diǎn)的測定48-49
  • 3.4 結(jié)果與討論49-60
  • 3.4.1 ACS的反應(yīng)原理49-50
  • 3.4.2 ACS取代度(DDS)的測定分析50-53
  • 3.4.3 正交實(shí)驗(yàn)分析53-55
  • 3.4.4 ACS等電點(diǎn)測定討論55-57
  • 3.4.5 ACS紅外光譜分析57-59
  • 3.4.6 ACS~1H-NMR核磁共振分析59-60
  • 3.5 結(jié)論60-61
  • 第四章 蚯蚓血紅蛋白納米微粒的制備61-73
  • 4.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器61-62
  • 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料61-62
  • 4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器62
  • 4.2 實(shí)驗(yàn)部分62-63
  • 4.2.1 濁度滴定62
  • 4.2.2 ACS和TPP納米微粒的制備62
  • 4.2.3 ACS/TPP和蚯蚓血紅蛋白納米微粒的制備62-63
  • 4.2.4 ACS/TPP和蚯蚓血紅蛋白納米微粒TEM表征63
  • 4.3 結(jié)果與討論63-72
  • 4.3.1 濁度滴定的條件分析63-64
  • 4.3.2 ACS和TPP交聯(lián)反應(yīng)原理64
  • 4.3.3 pH對ACS和TPP交聯(lián)反應(yīng)的影響64-65
  • 4.3.4 取代度對ACS/TPP納米微粒的影響65-66
  • 4.3.5 蚯蚓血紅蛋白包埋率測定66-69
  • 4.3.6 LtHb從TPP/ACS納米粒子中的釋放行為69-70
  • 4.3.7 TEM分析70-72
  • 4.4 結(jié)論72-73
  • 第五章 結(jié)論73-84
  • 致謝84
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