隨著醫(yī)療診斷、生物化學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)等領(lǐng)域的快速發(fā)展,對(duì)特定蛋白質(zhì)的識(shí)別與檢測(cè)成為研究熱點(diǎn).目前,在復(fù)雜樣品中分離蛋白的主要原理是基于抗原和抗體之間的特定識(shí)別作用.然而由于生物抗體的高成本、低穩(wěn)定性等缺點(diǎn),限制了它的進(jìn)一步應(yīng)用和發(fā)展.以高分子聚合物與模板分子通過共價(jià)鍵或非共價(jià)鍵作用制備的分子印跡聚合物材料(Molecularly Imprinted Polymers,MIPs)的出現(xiàn),使得這一目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)成為可能.因此,結(jié)合模板固定化策略和表面印跡技術(shù),制備了溶菌酶印跡核-殼碳微納米微球,并考察了蛋白質(zhì)初始濃度、蛋白質(zhì)溶液與印跡材料接觸時(shí)間對(duì)吸附量的影響,并完成了吸附過程的動(dòng)力學(xué)及等溫吸附研究.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該印跡納米材料對(duì)目標(biāo)蛋白的吸附量為71 mg/g,吸附平衡時(shí)間為100 min,對(duì)目標(biāo)蛋白有較好的選擇性,印跡因子可達(dá)3.3.

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【部分圖文】：

圖1丙烯酸添加量對(duì)碳球表面

對(duì)于羧基功能化碳微球基質(zhì),丙烯酸用量是控制其表面電荷、形貌和蛋白固定化能力的重要參數(shù).如圖1所示,隨著丙烯酸用量從0～2wt%的增加,CFCs的負(fù)表面電荷顯著增加.但碳球上溶菌酶的固定化量呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢(shì),在2wt%的丙烯酸用量下,最大固定化量約為59mg/g.這可能....

圖4溶菌酶濃度-吸光度(Abs)標(biāo)準(zhǔn)曲線

通過紫外分光光度法測(cè)得溫度為25℃,pH值為7時(shí),不同濃度下溶菌酶水溶液的吸光度,從而制得溶菌酶溶液-吸光度(Abs)標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)曲線進(jìn)行線性擬合,如圖4所示,標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合后方程表示為y=2.2936x+0.0732,R2=0.9984.2.2.2多巴胺聚合時(shí)間對(duì)印跡效....

圖5多巴胺聚合時(shí)間對(duì)印跡效果的影響

在表面印跡技術(shù)中,印跡層的厚度是影響MIPs識(shí)別能力的重要因素,因此本文研究了多巴胺聚合時(shí)間對(duì)CFC@MIPs識(shí)別的影響[16-18].如圖5所示,聚合時(shí)間不到40min的時(shí)候,識(shí)別能力CFC@MIPs隨著反應(yīng)時(shí)間的增加而顯著增加,表明聚多巴胺層的增厚的初始階段聚合有利于建設(shè)更....

圖6不同接觸時(shí)間內(nèi)CFC@MIPs和

式(2)、(3)中:Qe(mg/g)和Qt(mg/g)分別為平衡時(shí)刻和不同時(shí)刻對(duì)應(yīng)的吸附容量.k1(min-1)和k2(mg·g-1min-1)分別是準(zhǔn)一級(jí)和準(zhǔn)二級(jí)吸附速率常數(shù).準(zhǔn)一階模型描述了吸附位點(diǎn)的占用率與未占據(jù)位點(diǎn)的數(shù)量成正比,而準(zhǔn)二階模型則是吸附質(zhì)與吸附質(zhì)的化學(xué)吸附量的....

本文編號(hào)：3934972