發(fā)布時間：2017-05-08 07:07

  本文關(guān)鍵詞：納豆激酶的酶學(xué)特性及其微膠囊的制備研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：納豆激酶是由枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶,它主要的功能是溶解血栓,也作為新一代的溶栓藥物得到相應(yīng)的發(fā)展與研究。本文主要對納豆激酶的酶學(xué)特性以及海藻酸鈉對其包埋制備微膠囊的工藝優(yōu)化以及微膠囊穩(wěn)定性的研究。采用SDS-PAGE法以及Zeta電位法分別測得納豆激酶的分子量為28 k Da以及等電點(diǎn)為8.58。采用纖維蛋白-瓊脂糖平板法測定納豆激酶的酶活,得到納豆激酶的酶活為62520 U/g。納豆激酶在不同的加熱溫度時,溫度越高,其酶活越低。在p H 6.5的緩沖溶液中,納豆激酶的相對酶活為最高。在40℃的水浴中,保溫不同的時間,納豆激酶在保溫60 min時,達(dá)到最高的酶活。Na Cl在濃度低于1.35 mol/L時,對納豆激酶的酶活起到促進(jìn)作用,但是高于此濃度時,納豆激酶的酶活明顯的受到了抑制;Mg2+、Ca2+對納豆激酶有促進(jìn)作用;Cu2+、Zn2+對納豆激酶的活性有抑制作用;Fe2+對納豆激酶的抑制作用,即使在較低的濃度時對納豆激酶的酶活穩(wěn)定性的抑制作用也十分的明顯。使用海藻酸鈉包埋納豆激酶制備微膠囊的單因素最佳工藝條件是:海藻酸鈉的濃度為1.60%,羧甲基纖維素鈉的濃度為0.50%,Ca Cl2濃度為0.30%。正交實(shí)驗(yàn)所得的最佳工藝條件是:海藻酸鈉的濃度為1.80%,羧甲基纖維素鈉的濃度為0.50%,Ca Cl2濃度為0.30%。對包埋的納豆激酶與游離狀態(tài)下的納豆激酶酶學(xué)性質(zhì)的比較,在不同的溫度以及不同的p H下,包埋的納豆激酶比游離的納豆激酶的相對酶活要高。并且在酶活溫度為50℃時,游離的納豆激酶的相對酶活是51.69%,包埋的納豆激酶的相對酶活為71.67%;在p H 8.5的條件下,游離的納豆激酶的相對酶活是38.09%,包埋納豆激酶的相對酶活是55.99%。經(jīng)過包埋的納豆激酶,其酶活受到了一定程度的保護(hù)。因此,經(jīng)過海藻酸鈉包埋的納豆激酶可以較好的保護(hù)酶的活性,免受外界環(huán)境的影響。同樣,關(guān)于混合多糖的研究發(fā)現(xiàn),海藻酸鈉/CMC包埋的納豆激酶,有以下優(yōu)點(diǎn):粒徑小、外觀規(guī)則并且酶活的回收率高、硬度強(qiáng)。
【關(guān)鍵詞】：納豆激酶 海藻酸鈉 微膠囊
【學(xué)位授予單位】：哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：O629.8
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-10
• 第1章 緒論10-22
• 1.1 課題的研究背景及目的意義10
• 1.2 納豆激酶的研究及進(jìn)展10-16
• 1.2.1 納豆激酶的來源—納豆10-11
• 1.2.2 納豆激酶性質(zhì)11-12
• 1.2.3 納豆激酶的作用機(jī)理12
• 1.2.4 納豆激酶的應(yīng)用12-13
• 1.2.5 納豆激酶酶活的測定方法13-14
• 1.2.6 納豆激酶的研究現(xiàn)狀14-16
• 1.3 微膠囊的研究及進(jìn)展16-20
• 1.3.1 微膠囊的定義及發(fā)展16
• 1.3.2 微膠囊的目的和意義16-17
• 1.3.3 微膠囊的壁材17-18
• 1.3.4 微膠囊的方法18-19
• 1.3.5 微膠囊的研究現(xiàn)狀19-20
• 1.4 本課題的主要研究內(nèi)容20-22
• 1.4.1 技術(shù)路線20
• 1.4.2 納豆激酶的酶學(xué)特性的研究20-21
• 1.4.3 海藻酸鈉/CMC包埋納豆激酶的研究21-22
• 第2章 材料與方法22-32
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器22-24
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑22-23
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備23-24
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法24-31
• 2.2.1 納豆激酶的酶學(xué)特性研究24-25
• 2.2.2 納豆激酶的酶學(xué)特性25-28
• 2.2.3 海藻酸鈉/CMC包埋納豆激酶的研究28-29
• 2.2.4 海藻酸鈉/CMC包埋物的穩(wěn)定性研究29-30
• 2.2.5 混合多糖包埋納豆激酶的比較30-31
• 2.3 數(shù)據(jù)分析31-32
• 第3章 納豆激酶的酶學(xué)特性研究32-43
• 3.1 納豆激酶的基礎(chǔ)性質(zhì)研究32-35
• 3.1.1 納豆激酶的分子量32-33
• 3.1.2 納豆激酶的等電點(diǎn)33-34
• 3.1.3 納豆激酶的酶活34-35
• 3.2 納豆激酶的酶學(xué)特性35-41
• 3.2.1 納豆激酶的最適反應(yīng)溫度35-37
• 3.2.2 納豆激酶的最適反應(yīng)pH37-38
• 3.2.3 納豆激酶的保溫時間穩(wěn)定性38-39
• 3.2.4 NaCl濃度對納豆激酶酶活穩(wěn)定性的影響39-40
• 3.2.5 金屬離子對納豆激酶酶活穩(wěn)定性的影響40-41
• 3.3 本章小結(jié)41-43
• 第4章 海藻酸鈉/CMC包埋納豆激酶的研究43-62
• 4.1 BCA試劑盒測定蛋白含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線43-44
• 4.2 海藻酸鈉/CMC包埋納豆激酶的單因素實(shí)驗(yàn)44-51
• 4.2.1 海藻酸鈉濃度對包埋納豆激酶的影響44-47
• 4.2.2 羧甲基纖維素鈉濃度對包埋納豆激酶的影響47-49
• 4.2.3 CaCl2 濃度對包埋納豆激酶的影響49-51
• 4.3 海藻酸鈉/CMC包埋納豆激酶的正交實(shí)驗(yàn)51-54
• 4.3.1 正交實(shí)驗(yàn)因素及實(shí)驗(yàn)結(jié)果51-53
• 4.3.2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果的極差分析53-54
• 4.4 海藻酸鈉/CMC包埋物穩(wěn)定性研究54-57
• 4.4.1 溫度對海藻酸鈉/CMC包埋物穩(wěn)定性的影響54-55
• 4.4.2 pH對海藻酸鈉/CMC包埋物穩(wěn)定性的影響55-56
• 4.4.3 海藻酸鈉/CMC包埋物的儲存穩(wěn)定性56-57
• 4.5 混合多糖制備納豆激酶微膠囊的比較57-60
• 4.5.1 混合多糖包埋納豆激酶的顆粒大小比較57-58
• 4.5.2 混合多糖包埋納豆激酶的形態(tài)的觀察58-60
• 4.5.3 混合多糖包埋納豆激酶的酶活大小的比較60
• 4.6 本章小結(jié)60-62
• 結(jié)論62-63
• 參考文獻(xiàn)63-70
• 攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文70-72
• 致謝72

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 石陸娥;酶膜生物反應(yīng)器制備核苷酸的研究[D];浙江工業(yè)大學(xué);2007年

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本文編號：350663