發(fā)布時間：2017-04-16 22:18

  本文關鍵詞：水溶性殼聚糖衍生物的合成與抗菌機理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本文通過對殼聚糖進行改性,合成了四種殼聚糖衍生物,對這些衍生物的結構、DSC、溶解性能、抗菌性能進行了考察。通過正交實驗設計,系統(tǒng)地研究了O-羧甲基殼聚糖和磺化殼聚糖的合成條件,得到最佳工藝條件。本文重點對殼聚糖及水溶性衍生物的抗菌機理進行了探討,以克隆有NaHG2基因的大腸桿菌為實驗菌種,在體內(nèi)和體外兩個水平研究了不同種類、濃度、分子量的殼聚糖及衍生物在不同時間對DNA、基因表達及蛋白質(zhì)的作用,使殼聚糖及其衍生物的抗菌機理進一步明確。 結果表明:O-羧甲基殼聚糖、磺化殼聚糖、羥乙基殼聚糖和羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖都保持甚至提高了殼聚糖的抗菌性能,而且水溶性得到了很大程度的改善,這大大拓寬了殼聚糖的應用范圍。實驗得到的最佳合成條件分別為:O-羧甲基殼聚糖:0℃,殼聚糖與一氯乙酸3:2.3 (w:w),反應48小時;磺化殼聚糖:68℃,氯磺酸與殼聚糖的添加比例為4:1(ml:g),反應4小時。 在抗菌機理的研究中得到以下結論:殼聚糖及衍生物對DNA結構、蛋白質(zhì)和基因表達有明顯的影響,隨殼聚糖及衍生物濃度增大影響程度也逐漸增大;分子量不同對DNA的作用也有不同的結果,分子量小于8000時,影響程度隨分子量的增大而減小,分子量大于20000時無法觀察到質(zhì)粒帶,對蛋白質(zhì)和基因表達的影響并不顯著;培養(yǎng)時間與影響程度沒有明顯關系。殼聚糖及衍生物對假單胞菌的生長和繁殖有明顯的抑制作用,并且最終作用的結果可以使降解菌ND6的降解基因的表達無法正常進行,逐漸喪失降解能力。根據(jù)以上結論我們認為殼聚糖及衍生物對細菌生長繁殖的抑制作用是通過對DNA復制、基因表達和蛋白質(zhì)的影響來實現(xiàn)的。
【關鍵詞】：殼聚糖 殼聚糖衍生物 水溶性 抗菌機理 脫氧核糖核酸 蛋白質(zhì) 基因表達
【學位授予單位】：天津大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：O636
【目錄】：

• 摘 要2-3
• ABSTRACT3-6
• 第一章 緒論6-22
• 第一節(jié) 微生物學及其危害6-9
• 1.1 微生物學基礎6-7
• 1.2 環(huán)境因素對微生物的影響7-8
• 1.3 微生物的危害8-9
• 第二節(jié) 抗菌材料的研究現(xiàn)狀9-11
• 2.1 抗菌塑料9
• 2.2 抗菌涂料9-10
• 2.3 抗菌陶瓷10
• 2.4 抗菌紡織品10-11
• 第三節(jié) 抗菌劑11-15
• 3.1 有機抗菌劑12-14
• 3.1.1 化學合成有機抗菌劑12-14
• 3.1.2 天然抗菌劑14
• 3.2 無機類抗菌劑14-15
• 第四節(jié) 殼聚糖及其衍生物抗菌劑的研究現(xiàn)狀15-20
• 4.1 甲殼素及殼聚糖概述15-17
• 4.2 殼聚糖衍生物17-19
• 4.3 殼聚糖抗菌機理簡述19-20
• 第五節(jié) 論文研究工作內(nèi)容20-22
• 第二章 水溶性殼聚糖衍生物的制備與性能研究22-39
• 第一節(jié) 合成與結構分析22-33
• 1.1 實驗原料及儀器22
• 1.2 殼聚糖衍生物的制備22-25
• 1.3 結構測定25-26
• 1.3.1 紅外光譜測試25
• 1.3.2 磺化殼聚糖硫含量的測試25-26
• 1.3.3 羧甲基化度的測定26
• 1.4 結果與討論26-33
• 1.4.1 結構分析26-30
• 1.4.2 正交實驗分析30-33
• 第二節(jié) 殼聚糖衍生物的性能研究33-39
• 2.1 原料與儀器33
• 2.2 實驗過程33-34
• 2.2.1 抗菌性測試33-34
• 2.2.2 溶解性能測試34
• 2.2.3 差示掃描量熱分析34
• 2.3 結果與討論34-39
• 2.3.1 抗菌性能研究34-36
• 2.3.2 溶解性能36
• 2.3.3 差示掃描量熱分析36-39
• 第三章 抗菌機理研究39-68
• 第一節(jié)　引言39
• 第二節(jié) 殼聚糖及衍生物對質(zhì)粒DNA的作用39-52
• 2.1 主要原料39-40
• 2.2 實驗儀器40
• 2.3 實驗方法40-43
• 2.3.1 實驗用培養(yǎng)基及緩沖液的配制40-41
• 2.3.2 活體水平測試用質(zhì)粒的提取41-42
• 2.3.3 離體水平實驗42
• 2.3.4 瓊脂糖凝膠電泳42-43
• 2.3.5 紫外吸收光譜研究43
• 2.3.6 拉曼光譜研究43
• 2.4 結果與討論43-51
• 2.4.1 殼聚糖及衍生物與DNA作用的紫外吸收光譜研究43-44
• 2.4.2 拉曼光譜研究44-45
• 2.4.3 殼聚糖及衍生物與DNA作用的瓊脂糖凝膠電泳分析45-51
• 2.5 小結51-52
• 第三節(jié) 殼聚糖及衍生物對基因表達的影響52-68
• 3.1 主要原料52
• 3.2 實驗儀器52
• 3.3 實驗方法52-56
• 3.3.1 實驗所用緩沖液、液體培養(yǎng)基的配制52-54
• 3.3.2 細胞破碎與酶液收集54
• 3.3.3 牛血清蛋白標準曲線的繪制54-55
• 3.3.4 蛋白質(zhì)濃度的測定55
• 3.3.5 蛋白質(zhì)聚丙烯酰胺凝膠電泳55
• 3.3.6 酶活力的測定方法55
• 3.3.7 萘降解基因的表達55-56
• 3.4 結果與討論56-67
• 3.4.1 活體水平56-63
• 3.4.2 離體水平63-66
• 3.4.3 對降解基因表達的影響66-67
• 3.5 小結67-68
• 第四章 總論68-70
• 1.1 本文工作總結68
• 1.2 下步工作的方向68-70
• 參考文獻70-72
• 附錄72-84

【引證文獻】

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  本文關鍵詞：水溶性殼聚糖衍生物的合成與抗菌機理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：311814