本文關(guān)鍵詞：納米金與藥物分子的相互作用研究及應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《西南大學》 2013年

DNA甲基化檢測與銀離子識別的新方法研究

王剛林  

【摘要】：DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳學性質(zhì),在細胞分化,調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄和修復等生物過程起著重要作用,由于其與很多疾病例如癌癥有直接關(guān)系,因此成為當前研究的熱點課題。金納米棒(GNRs)因其各向異性結(jié)構(gòu)和獨特的光譜特征而倍受化學研究者青睞,得到飛速的發(fā)展,廣泛應(yīng)用于金屬離子和氨基酸檢測、免疫分析、DNA序列分析、癌細胞成像和光熱治療以及納米材料組裝等領(lǐng)域。水體重金屬污染具有持久性、高度危害性和難治理性,如何快速、準確監(jiān)測并對其進行科學評價,成為當今環(huán)境科學關(guān)心的熱點問題。銀離子是一種高毒性且在環(huán)境中污染相當普遍的金屬離子,開發(fā)靈敏檢測Ag+的方法十分重要�；谝陨纤�,本文開展了以下研究工作： 1.電化學策略檢測DNA甲基化和DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性 發(fā)展了一種免標記的電化學檢測DNA甲基化的技術(shù),該方法首先在金電極上構(gòu)構(gòu)筑一個電化學DNA傳感器,以六氨合釕(RuHex)為電化學信號指示劑,當電極表面的DNA在特定位點被甲基化后,能夠被特異性的酶切割,從而脫離電極表面,導致電化學傳感器的電化學信號降低。甲基轉(zhuǎn)移酶的活性與電化學信號成一定線性關(guān)系,從而實現(xiàn)了對DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的測定。該方法對Dam甲基轉(zhuǎn)移酶的活性檢測區(qū)間為0.25-10U/mL,檢測限為0.18U/mL(S/N=3),在此基礎(chǔ)上,我們將此方法進一步用于篩選DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的抑制劑,為新的抗癌藥物的篩選提供了一種新的思路。 2.熒光共振能量轉(zhuǎn)移法檢測DNA甲基化和DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性 基于金納米棒與不同長度的DNA鏈相互作用熒光共振能量轉(zhuǎn)移效率的差別,發(fā)展了一種熒光檢測DNA甲基化的新方法。當形成DNA雙鏈時,金納米棒與DNA雙鏈之間的靜電作用很強,從而導致熒光標記的DNA熒光猝滅,當雙鏈被甲基轉(zhuǎn)移酶甲基化后,能夠被核酸內(nèi)切酶切割成小的片段DNA,片段DNA與金納米棒之間的靜電作用很弱,從而導致熒光恢復,通過熒光的恢復程度,來實現(xiàn)對DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性和甲基轉(zhuǎn)移酶抑制物的分析,該方法對DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的檢測限可以達到0.5U/mL,具有簡單、快速、選擇性良好等特點。 3.以金納米棒為信號探針構(gòu)建DNA生物傳感器檢測Ag+ 利用金納米棒與DNA單鏈和DNA雙鏈的靜電作用力不同,構(gòu)建了一個新的Ag+生物傳感器。隨著Ag+的加入,C-C錯配的堿基對形成C-Ag+-C結(jié)構(gòu),導致DNA電荷密度增大,從而使得與金納米棒之間靜電作用增強,引起金納米棒的團聚,并導致金納米棒的橫向紫外吸收峰降低。通過金納米棒紫外吸收的信號的變化實現(xiàn)對銀離子檢測,該傳感器用于檢測銀離子的檢測限可以達到15nM(S/N=3)獲得了比較滿意的結(jié)果。

【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：西南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：O657;Q503
【目錄】：

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1 白倩;謝琦;彭曉莉;�；�;朱俊東;糜漫天;;二氫楊梅素通過抑制甲基轉(zhuǎn)移酶誘導人乳腺癌MCF-7細胞PTEN基因去甲基化[J];第三軍醫(yī)大學學報;2014年01期

2 Ru Liu;Xiao-Huan Zhang;Kun Zhang;Wei Li;Wen-Jun Wang;Di-Xian Luo;Ling Gao;;5-Aza-2'-deoxycytidine inhibits retinoblastoma cell by reactivating epigenetically silenced RASSF1A gene[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2014年01期

3 曾雪燕;王光明;李艷;潘云;劉蜻蜻;;核受體結(jié)合域蛋白2的研究進展[J];廣東醫(yī)學;2013年19期

4 王彩紅;黃繼昌;劉勇;吳風瑞;丁彪;王榮;張遠;李文雍;;小鼠孤雌胚與體內(nèi)正常胚H3K27三甲基化模式的差異[J];動物學雜志;2014年01期

5 丁蕊;薛麗群;陳盛;;石墨烯復合物的制備及其應(yīng)用研究進展[J];福建師大福清分校學報;2014年02期

6 Fereshteh Karimian;Gholam Hossein Rounaghi;Mohammad Hossein Arbab-Zavar;;Construction of a PVC based 15-crown-5 electrochemical sensor for Ag(Ⅰ) cation[J];Chinese Chemical Letters;2014年05期

7 郭有;高艷芳;胡恭華;;肝細胞癌表觀遺傳發(fā)病機制的研究進展[J];重慶醫(yī)學;2014年16期

8 DENG Jun;YU DaHai;GAO ChangYou;;Biological identity of nanomaterials:Opportunities and challenges[J];Science China(Chemistry);2013年11期

9 蘇正元;舒利民;Jong Hun Lee;Franciso Fuentes;王虎;吳天元;余四旺;Ah-Ng Tony Kong;;食用植物成分和中藥用于癌癥化學預防:Nrf2,表觀基因組學,癌癥干細胞(英文)[J];化學進展;2013年09期

10 Heqing Shen;F.L.Martin;Yanhua Su;;Environmental chemical stressors as epigenome modifiers:a new horizon in assessment of toxicological effects[J];Chinese Science Bulletin;2014年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 龔春梅;楊淋清;陶功華;劉慶成;劉建軍;莊志雄;;短期暴露于納米SiO_2對HaCaT細胞基因組DNA甲基化的影響[A];達能營養(yǎng)中心青年科學工作者論壇優(yōu)秀論文集2013年第2期[C];2013年

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1 高飛;青黃散治療骨髓增生異常綜合征去甲基化作用效應(yīng)機制研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2013年

2 陳晨;用于重金屬離子檢測的電化學傳感器研究[D];華東理工大學;2013年

3 賈園薈;組蛋白去甲基化酶PHF8參與神經(jīng)分化的研究與UHRF1、UHRF2調(diào)控起始性DNA甲基化的功能研究[D];華東師范大學;2013年

4 李秋云;RSK4與BRCA1基因異常甲基化在乳腺癌發(fā)病機制中作用的研究[D];廣西醫(yī)科大學;2013年

5 王兵;生物芯片和納米中藥對肝膽腫瘤早期診治的研究[D];華中科技大學;2013年

6 溫春葉;石墨烯基復合物在追蹤反應(yīng)方面的應(yīng)用[D];蘇州大學;2013年

7 劉忠德;金、碳納米功能材料的制備及其色度和熒光傳感方法研究[D];西南大學;2013年

8 李洪艷;甲基化對鱗癌細胞中巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶IV基因表達的調(diào)控及對細胞增殖影響的研究[D];大連醫(yī)科大學;2012年

9 鄧亮;CREB-1在TGF-β3抗肝纖維化中的作用[D];華中科技大學;2013年

10 包通拉嘎;核小體結(jié)合模體的預測及它們在人類基因功能位點附近的分布[D];內(nèi)蒙古大學;2013年

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1 李盼盼;以二肽復合材料自組裝為基礎(chǔ)的電化學生物傳感器研究[D];北京化工大學;2013年

2 崔飛;基于功能化石墨烯構(gòu)建電化學傳感器及免疫傳感器[D];山東大學;2013年

3 景坤玉;鈣敏感受體基因啟動子區(qū)在食管鱗癌中頻繁甲基化的初步研究[D];鄭州大學;2013年

4 范淑敏;納米金與藥物分子的相互作用研究及應(yīng)用[D];鄭州大學;2013年

5 葛立業(yè);組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶NSD2、EZH2在B細胞淋巴瘤中的表達[D];大理學院;2013年

6 楊偉;TPM1在膽管癌中的表達及其調(diào)控機制研究[D];南京醫(yī)科大學;2013年

7 薛飛;鹽藻絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶基因DsSTPK的克隆和表達分析[D];大連海洋大學;2013年

8 楊春麗;基于碳納米材料傳感器對環(huán)境污染物銀離子和二酚異構(gòu)體的研究[D];西南大學;2013年

9 張明增;組蛋白去乙�；敢种苿┞�(lián)合蛋白酶體抑制劑對伯基特淋巴瘤細胞株Raji生長調(diào)控的研究[D];河北醫(yī)科大學;2013年

10 王聰慧;胃癌及癌前病變中SFRPs基因異常甲基化與幽門螺旋桿菌感染之間的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學;2013年

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1 劉秉正;物理科學與生命科學的關(guān)系[J];吉林師范大學學報(自然科學版);1992年02期

2 陳敘龍,張清敏,張毓琪,張寶東,陳素平;鯉魚肝胰臟線粒體DNA的分離、純化方法[J];環(huán)境化學;1994年03期

3 周曉慧;DNA與免疫[J];承德醫(yī)學院學報;1998年02期

4 張愛民,張建民;論基因組的分子進化[J];菏澤師范�？茖W校學報;1998年02期

5 房經(jīng)貴,章鎮(zhèn),劉大鈞,馬正強,JossiHillel;一種從貯藏較久番茄葉中提取適于PCR擴增的DNA的方法[J];植物生理學通訊;2000年01期

6 朱長軍,張利寧,馬春紅,曹英林,宋靜;一種新型桿狀病毒親本株的鑒定及病毒DNA的純化[J];山東醫(yī)科大學學報;2000年01期

7 張秀花,弓巧娟;分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移熒光探針DMAHF的介質(zhì)效應(yīng)及與DNA的作用[J];山西大學學報(自然科學版);2000年01期

8 宗仁鶴,白春禮,李振剛,汪新文,聶焰,龔為穗,楊安慶,龔立三;激光對DNA作用機理的AFM研究[J];激光生物學報;2001年01期

9 宗志新,龔國權(quán);阿的平熒光猝滅法測定 DNA(英文)[J];蘭州大學學報(自然科學版);2002年02期

10 張李陽;固體發(fā)酵紅曲霉菌生物量測定方法的研究[J];南京曉莊學院學報;2002年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉海英;陳剛;步宇翔;;堿基對的多銅修飾對DNA導電性的增強作用[A];中國化學會第28屆學術(shù)年會第13分會場摘要集[C];2012年

2 趙宏遠;李俊杰;桑潤滋;;單細胞凝膠電泳技術(shù)檢測不同處理山羊精子DNA損傷[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物繁殖學分會第十五屆學術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2010年

3 劉玲;付強;朱化彬;彭秀麗;郝海生;杜衛(wèi)華;趙學明;王棟;;牛毛囊基因組DNA制備方法的比較研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物繁殖學分會第十五屆學術(shù)研討會論文集（上冊）[C];2010年

4 梁春柳;;一個新的篩選化合物與DNA交互作用的簡便方法[A];2010年全國藥物毒理學學術(shù)會議論文集[C];2010年

5 張文眾;李永寧;方瑾;梁春來;張倩男;;體外新評價方法——完整細胞核DNA檢測板[A];全國生化/工業(yè)與衛(wèi)生毒理學學術(shù)會議論文集[C];2010年

6 鄒丹丹;汪海林;;基于DNA甲基化結(jié)合蛋白MBD的甲基化分析[A];中國化學會第28屆學術(shù)年會第2分會場摘要集[C];2012年

7 張曄;杜智;楊斌;高英堂;;檢測外周血中游離DNA的應(yīng)用前景(綜述)[A];天津市生物醫(yī)學工程學會第29屆學術(shù)年會暨首屆生物醫(yī)學工程前沿科學研討會論文集[C];2009年

8 趙淑珍;劉光珍;;DNA免疫吸附治療狼瘡性腎炎的臨床觀察[A];第十一屆全國中西醫(yī)結(jié)合腎臟病學術(shù)會議論文匯編[C];2010年

9 陳士林;;中藥DNA條形碼鑒定體系[A];第十屆全國藥用植物及植物藥學術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

10 陸佳飛;周克隆;王縵;;磁珠法快速提取乙型肝炎病毒DNA的研究及其在診斷試劑中的應(yīng)用[A];第五次全國免疫診斷暨疫苗學術(shù)研討會論文匯編[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳杰;[N];科技日報;2010年

2 劉霞;[N];科技日報;2010年

3 南方;[N];中國企業(yè)報;2009年

4 吳強;[N];中國食品質(zhì)量報;2010年

5 本報記者 施曉焰　通訊員 馬麗娟;[N];人民公安報;2009年

6 張巍巍;[N];科技日報;2010年

7 常麗君;[N];科技日報;2011年

8 記者 馮衛(wèi)東;[N];科技日報;2008年

9 許文強;[N];大眾科技報;2008年

10 記者 常麗君;[N];科技日報;2010年

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1 郭曉蘭;端粒功能異常誘導的DNA損傷反應(yīng)及其在腫瘤發(fā)生中的作用與分子機制[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

2 陳志健;1.8 GHz微波對X射線和阿霉素致淋巴細胞DNA損傷修復及對蛋白表達的影響[D];浙江大學;2010年

3 朱慧芳;Y家族DNA聚合酶對化學致癌物MNNG應(yīng)答的轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究[D];浙江大學;2009年

4 萬超;抗豬瘟嵌合DNA疫苗及TRIF的DNA疫苗佐劑效應(yīng)研究[D];武漢大學;2009年

5 趙麗霞;克隆綿羊印記相關(guān)基因的DNA甲基化研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2010年

6 沈美龍;基于DNA免疫的乙型肝炎病毒表面抗原大中小蛋白的免疫原性研究[D];南京醫(yī)科大學;2010年

7 徐鐵剛;細菌DNA磷硫�；揎椗c限制[D];上海交通大學;2008年

8 高鵬;特異性介導DNA轉(zhuǎn)導的多結(jié)構(gòu)域嵌合蛋白的構(gòu)建、表達及鑒定[D];吉林大學;2011年

9 康大偉;DNA分子器件場效應(yīng)理論研究[D];山東大學;2010年

10 高天;基于寡核苷酸芯片的地中海貧血特異性DNA甲基化的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2009年

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1 李芳;基于磁性微粒的法醫(yī)樣本DNA純化[D];西北大學;2011年

2 蘆麗淦;柚皮素及聚乙二醇增強乙肝DNA疫苗免疫效果的研究[D];河南大學;2010年

3 楊錦艷;六種香豆素有效成分與DNA相互作用的研究[D];山西醫(yī)科大學;2010年

4 林啟凰;用于乳腺蛋白標志基因檢測的DNA電化學生物傳感器的研究[D];福建醫(yī)科大學;2010年

5 于文靜;亞麻韌皮部特異啟動子克隆與26份種質(zhì)DNA指紋圖譜構(gòu)建[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2010年

6 Rebecca Simisola Agboola;硼（B）和氯化鈉脅迫處理誘導高粱（Sorghum bicolor）自交系發(fā)生形態(tài)和DNA甲基化的變異[D];東北師范大學;2010年

7 石微;溴氰菊酯致大鼠DNA損傷及損傷后修復功能的影響[D];青島大學;2010年

8 張諾;DNA-納米羥基磷灰石修飾電極的制備及在生物分析中的應(yīng)用[D];濟南大學;2010年

9 郭珈辰;基于圖形表示的DNA相似性分析及進化樹構(gòu)建算法研究[D];湖南大學;2010年

10 劉香港;基于功能材料的新型電化學DNA生物傳感器的研制及應(yīng)用研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2011年

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