產(chǎn)纖維素酶嗜熱地芽孢桿菌HTA426的篩選鑒定、酶學(xué)性質(zhì)分析及其應(yīng)用
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【摘要】:為解決現(xiàn)今纖維素酶生產(chǎn)的低效率和高成本問題,以及實(shí)現(xiàn)利用木質(zhì)纖維素廢棄物生產(chǎn)纖維素酶的目的,本研究結(jié)合羧甲基纖維素鈉(CMC)水解圈法和胞外酶活測定法,從嗜熱菌資源豐富的溫泉區(qū)土壤中篩選出一株具有產(chǎn)羧甲基纖維素酶(CMCase)的嗜熱地芽孢桿菌HTA426(Geobacillus kaustophilus HTA426).對(duì)菌株生產(chǎn)的酶進(jìn)行酶學(xué)性質(zhì)分析并將菌株應(yīng)用于以木質(zhì)纖維素為替代碳源產(chǎn)纖維素酶.采用硫酸銨沉淀法和離子交換層析法對(duì)粗酶液進(jìn)行二級(jí)純化,回收率和純化倍數(shù)分別為10.14%和5.12,純化后的CMCase的分子量約為40 k Da.其CMCase活性在溫度為60℃,pH為7.0下達(dá)到最高.培育5 h后,酶的活性在溫度為50~70℃下也能保持相對(duì)穩(wěn)定.HAT426菌株能夠在已經(jīng)經(jīng)過堿處理的甘蔗渣、稻桿及水葫蘆為碳源的培養(yǎng)液中生長和生產(chǎn)CMCase.以甘蔗渣為碳源的培養(yǎng)液最適合于生產(chǎn)CMCase,其活性為103.67U·m L~(-1).菌株HTA426是首次報(bào)道的具有產(chǎn)纖維素酶能力的嗜熱地芽孢桿菌,經(jīng)純化的纖維素酶具有廣泛的pH適用性(pH 5~8)和良好的熱穩(wěn)定性(50~70℃),在運(yùn)用于木質(zhì)纖維素能源化中具有較大潛力.
【作者單位】: 廣東工業(yè)大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院和環(huán)境健康與污染控制研究院;
【關(guān)鍵詞】: 地芽孢桿菌 纖維素酶 酶學(xué)性質(zhì) 木質(zhì)纖維素 堿處理
【基金】:廣東工業(yè)大學(xué)青年基金(No.14QNZD005);廣東工業(yè)大學(xué)青年百人A類項(xiàng)目(No.1143-220413105);廣東工業(yè)大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(No.xj201511845089,yj201611845133) 廣東省教育廳高等院校學(xué)科建設(shè)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(No.2014KTSP022)~~
【分類號(hào)】:X172;X71
【正文快照】: 1引言(Introduction)由于人口數(shù)量增加和經(jīng)濟(jì)發(fā)展,石油等化石燃料消耗量急劇上升.化石燃料燃燒造成全球氣候變暖、環(huán)境污染等問題,迫使人們尋找能夠替代化石燃料的清潔能源(Nigam et al.,2011).木質(zhì)纖維素廢棄物作為一種常見的農(nóng)林固體廢棄物,一般通過室外燃燒進(jìn)行處理,然而燃
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