本文關(guān)鍵詞：氡致小鼠肺組織損傷及p53基因表達(dá)的改變

  更多相關(guān)文章： 氡 小鼠 肺損傷 p53 線粒體

【摘要】：目的:建立染氡小鼠模型,觀察氡暴露對(duì)小鼠肺組織和線粒體的損傷,p53及其靶基因的表達(dá)改變,為闡明氡及其子體的損傷機(jī)制提供基礎(chǔ)資料。方法:(1)染氡小鼠模型的建立:32只BALB/c小鼠隨機(jī)分為4組,每組8只,分別為對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組。p53基因敲除的C57BL/6小鼠16只,雌雄各半,隨機(jī)分為對(duì)照組和中劑量組,每組8只。染氡組小鼠置于多功能生態(tài)染氡室,染氡濃度為100000Bq/m3,低、中、高劑量組的累積照射劑量分別為30、60、120工作水平月。(2)小鼠肺組織病理損傷:小鼠達(dá)到暴露劑量后,處死取適量肺組織,4%多聚甲醛溶液固定,病理學(xué)常規(guī)制作HE染色切片,TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡。(3)采用WST-8法檢測(cè)肺組織、外周血和線粒體中SOD活性,硫代巴比妥酸法(TBA)檢測(cè)MDA含量。熒光定量PCR檢測(cè)線粒體DNA拷貝數(shù)、p53及其靶基因PUMA的表達(dá)。Western blot檢測(cè)p53及PUMA蛋白的表達(dá)。(4)采用spss21.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,p0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:(1)小鼠肺組織病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn):氡染毒后的小鼠肺組織出現(xiàn)肺泡壁變薄、斷裂、數(shù)個(gè)肺泡融合成大肺泡,高劑量組還出現(xiàn)了肺泡塌陷、出血等病理改變。小鼠肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)升高,線粒體DNA拷貝數(shù)增加。(2)染氡后小鼠肺組織、外周血和線粒體SOD活力下降,MDA含量升高。小鼠肺組織細(xì)胞中p53及其靶基因PUMA的基因表達(dá)和蛋白表達(dá)均上調(diào)。結(jié)論:1、氡致小鼠的肺損傷效應(yīng)包括病理改變、氧化損傷、凋亡指數(shù)上升和線粒體DNA拷貝數(shù)增加。2、氡染毒后小鼠肺組織細(xì)胞中p53及其靶基因PUMA的表達(dá)升高,提示p53-PUMA通路參與了氡致肺損傷的效應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：氡 小鼠 肺損傷 p53 線粒體
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R14
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-9
• 引言9-11
• 第一部分 氡吸入致小鼠肺組織的損傷11-22
• 1.材料與方法11-16
• 1.1 試劑和儀器11-12
• 1.1.1 主要試劑11
• 1.1.2 主要儀器11
• 1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物11-12
• 1.2 方法12-16
• 1.2.1 主要試劑配制12
• 1.2.2 氡及其子體吸入染毒動(dòng)物模型的建立12
• 1.2.3 外周血的采集（摘除眼球取血）12
• 1.2.4 肺組織樣品的制備12-13
• 1.2.5 HE染色13
• 1.2.6 小鼠肺組織SOD活性、MDA含量的測(cè)定13-16
• 1.2.7 小鼠外周血SOD活性、MDA含量的測(cè)定16
• 1.2.8 統(tǒng)計(jì)分析16
• 2 結(jié)果16-20
• 2.1 染氡小鼠肺組織病理改變16-17
• 2.2 氡染毒致BALB/c小鼠肺組織SOD活性和MDA含量的改變17-18
• 2.3 氡染毒致C57BL/6 小鼠外周血SOD活性和MDA含量的改變18-20
• 3 討論20-22
• 第二部分 氡吸入致肺組織線粒體改變22-30
• 1 材料與方法22-25
• 1.1 材料22-23
• 1.1.1 主要試劑22
• 1.1.2 主要儀器22-23
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法23-25
• 1.2.1 小鼠肺組織線粒體的提取23
• 1.2.2 小鼠肺組織DNA的提取23-24
• 1.2.3 線粒體DNA拷貝數(shù)檢測(cè)24-25
• 1.2.4 凋亡切片的制作25
• 1.2.5 統(tǒng)計(jì)分析25
• 2 結(jié)果25-28
• 2.1 肺組織細(xì)胞凋亡25-27
• 2.2 線粒體SOD活力、MDA含量變化27-28
• 2.3 線粒體DNA拷貝數(shù)變化28
• 3 討論28-30
• 第三部分 氡吸入致小鼠p53基因及其 靶基因表達(dá)的改變30-40
• 1 材料與方法30-35
• 1.1 材料30-31
• 1.1.1 主要試劑30-31
• 1.1.2 主要儀器31
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法31-35
• 1.2.1 肺組織RNA的提取31-32
• 1.2.2 cDNA的制備32
• 1.2.3 熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)目的基因的表達(dá)32-33
• 1.2.4western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)33-35
• 1.2.5 統(tǒng)計(jì)分析35
• 2.結(jié)果35-39
• 2.1 氡染毒小鼠p53和PUMA基因表達(dá)改變35-37
• 2.2 氡染毒小鼠p53和PUMA蛋白表達(dá)改變37-39
• 3.討論39-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 綜述46-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 研究生期間科研經(jīng)歷及發(fā)表的文章52-53
• 中英文縮略語對(duì)照表53-54
• 致謝54-55

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 陳來;p53基因表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制的在體研究[D];南京大學(xué);2015年

2 楊向明;p53基因表達(dá)下調(diào)調(diào)控涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞SACC-83發(fā)生上皮間質(zhì)樣轉(zhuǎn)化[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

3 董倫;人腦膠質(zhì)瘤EGFR和p53基因表達(dá)以及EGFR反義RNA與p53基因聯(lián)合轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)抑瘤作用的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2004年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 姜自啟;氡致小鼠肺組織損傷及p53基因表達(dá)的改變[D];蘇州大學(xué);2016年

2 張慶梅;樹舌多糖GF對(duì)小鼠HepA瘤p53基因表達(dá)的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2002年

3 姜琪;我國(guó)不同產(chǎn)地溫石棉及代用纖維對(duì)中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞p73和p53基因表達(dá)的影響[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2011年

4 鄭芳;白術(shù)與甘草配伍對(duì)IEC-6細(xì)胞增殖及p21、p53基因表達(dá)的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2012年

5 胡軍;胃癌中p16，，nm23-H1和p53基因表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系[D];南華大學(xué);2007年

本文編號(hào)：788761