本文關(guān)鍵詞：一株降解中長鏈烷烴菌株的分離鑒定及其特性研究

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【摘要】：隨著石油的不斷開發(fā),石油污染日益嚴重,這不僅損害環(huán)境,對人類的健康也傷害極大。因此,石油污染的治理越來越受到人們的關(guān)注。石油污染的微生物修復(fù)是既經(jīng)濟、環(huán)保,又高效的修復(fù)方法。但目前仍缺乏對高效、穩(wěn)定、適應(yīng)性強的石油降解菌的深入研究,而高效的石油降解菌又是進行石油污染治理的關(guān)鍵。本研究從長期被石油污染的土壤中采集樣品,以原油為唯一碳源,經(jīng)過一系列的篩選、分離純化,獲得一株石油烴降解菌,將其命名為TWJ22。經(jīng)過形態(tài)學(xué)研究、生理生化研究和16S r DNA進化分析對該菌進行初步鑒定。該菌為革蘭氏陰性菌、無芽孢、無莢膜,菌體呈短桿狀,大小為0.5~0.8μm×0.9~2.0μm,氧化酶陰性,與液化沙雷氏菌(Serratia liquefaciens)和變形斑沙雷氏菌(Serratia proteamaculans)的生理生化特征相似度較高,經(jīng)過16S rDNA進化分析,確定該菌為變形斑沙雷氏菌(Serratia proteamaculans)。本文對該菌在LB液體培養(yǎng)基中的最適生長條件了進行研究,其最適生長溫度為30℃、最適生長pH為7.0、最適搖床轉(zhuǎn)速為180 rpm。實驗結(jié)果表明以1%的甘油為唯一碳源的無機鹽培養(yǎng)基為該菌的最佳種子培養(yǎng)基(Optimum seed medium),且在最佳種子培養(yǎng)基中,菌株TWJ22經(jīng)過2h的延遲期后,進入對數(shù)生長期,在16h左右到達穩(wěn)定生長期。對該菌降解性能的研究發(fā)現(xiàn),該菌對C12、C14、C16、C18、C20、C22、C24、C28、C32均有一定的降解作用,但對C22的降解效果最好。當(dāng)TWJ22接入以C22(2%,W/V)為唯一碳源的無機鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)時,正二十二烷降解的最適溫度為30℃、最適生長pH為7.0、最適Na Cl濃度為0~1%、最適接種量為3%,在最適降解條件下,該菌對正二十二烷的降解率可達70%。土壤中金屬離子的濃度對石油烴降解菌的生長影響也很大,因此本文還研究了金屬離子對菌株TWJ22生長的影響。研究發(fā)現(xiàn),低于0.01 mmol/L的Ag+、Ni2+對該菌生長的抑制極強,表明Ag+、Ni2+對TWJ22有較強的毒性;Cr3+、Fe3+、Pb2+、Ti4+在濃度小于0.05 mmol/L時,對該菌生長的抑制作用不明顯,在濃度高于0.06mmol/L時,抑制作用較強;Co2+、Cu2+在濃度小于0.01 mmol/L時,對該菌的生長有一定的促進作用,當(dāng)濃度大于0.03 mmol/L時,對該菌的生長有很強的抑制作用;Fe2+、Mn2+、Ba2+、K+在濃度小于0.06 mmol/L時,對該菌的生長有促進作用,當(dāng)濃度逐漸增大時,抑制該菌的生長且抑制作用也逐漸增大;Ca2+、Mg2+在濃度高達5 mmol/l時,對菌株TWJ22的生長表現(xiàn)為促進作用。其研究結(jié)果對于利用該菌株處理石油廢水具有一定的指導(dǎo)意義。
【關(guān)鍵詞】：微生物修復(fù) 石油烴降解菌 分離鑒定 烷烴降解 金屬離子
【學(xué)位授予單位】：西華師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：X172
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-9
• 第1章 前言9-18
• 1.1 石油及石油污染9-10
• 1.1.1 石油9
• 1.1.2 石油污染現(xiàn)狀9-10
• 1.2 石油污染帶來的危害10-11
• 1.2.1 石油污染物的來源10-11
• 1.2.2 石油污染對人類造成的危害11
• 1.2.3 石油污染對土壤環(huán)境造成的危害11
• 1.3 土壤的石油污染治理方法概述11-13
• 1.4 土壤的石油污染微生物修復(fù)13-16
• 1.4.1 降解石油烴微生物的種類13
• 1.4.2 微生物降解石油烴的優(yōu)勢13
• 1.4.3 微生物降解石油污染物的機理13-15
• 1.4.4 影響微生物修復(fù)的環(huán)境因素15-16
• 1.5 金屬離子對微生物的影響16-17
• 1.6 本研究的內(nèi)容、目的和意義17-18
• 第2章 菌株的篩選、分離和鑒定18-33
• 2.1 實驗材料18-19
• 2.1.1 菌株18
• 2.1.2 主要試劑18
• 2.1.3 主要器材18
• 2.1.4 培養(yǎng)基18-19
• 2.2 實驗方法19-26
• 2.2.1 菌株的分離篩選19-20
• 2.2.2 菌株的分類鑒定20-26
• 2.3 結(jié)果及分析26-32
• 2.3.1 烷烴降解菌TWJ22的分離篩選26
• 2.3.2 烷烴降解菌TWJ22的形態(tài)學(xué)特征26
• 2.3.3 烷烴降解菌TWJ22的生理生化特征26-28
• 2.3.4 烷烴降解菌TWJ22的分子生物學(xué)特征28-32
• 2.4 本章小結(jié)32-33
• 第3章 菌株TWJ22的生長條件和降解特性研究33-46
• 3.1 實驗材料33
• 3.1.1 菌株33
• 3.1.2 主要試劑33
• 3.1.3 主要器材33
• 3.1.4 培養(yǎng)基33
• 3.2 實驗方法33-36
• 3.2.1 烷烴降解菌TWJ22最適生長條件的測定33-34
• 3.2.2 烷烴降解菌TWJ22種子培養(yǎng)基的選擇34-35
• 3.2.3 烷烴降解菌TWJ22降解特性的研究35-36
• 3.3 結(jié)果及分析36-44
• 3.3.1 烷烴降解菌TWJ22最適生長條件的測定36-38
• 3.3.2 烷烴降解菌TWJ22種子培養(yǎng)基的選擇38-40
• 3.3.3 烷烴降解菌TWJ22降解特性的研究40-44
• 3.4 本章小結(jié)44-46
• 第4章 金屬離子對烷烴降解菌TWJ22生長的影響46-55
• 4.1 實驗材料46
• 4.1.1 菌株46
• 4.1.2 主要試劑46
• 4.1.3 主要器材46
• 4.1.4 培養(yǎng)基46
• 4.2 實驗方法46-47
• 4.2.1 菌株活化46
• 4.2.2 金屬離子對烷烴降解菌TWJ22生長的影響46-47
• 4.3 結(jié)果及分析47-54
• 4.3.1 重金屬離子對烷烴降解菌TWJ22生長的影響47-52
• 4.3.2 輕金屬離子對烷烴降解菌TWJ22生長的影響52-54
• 4.4 本章小結(jié)54-55
• 第5章 結(jié)論與展望55-57
• 5.1 結(jié)論55
• 5.2 展望55-57
• 參考文獻57-63
• 致謝63-66
• 在學(xué)期間的科研情況66

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