發(fā)布時(shí)間：2017-06-06 10:27

  本文關(guān)鍵詞：微囊藻毒素-LR生殖內(nèi)分泌干擾作用的體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：微囊藻毒素(MCs)是一類在藍(lán)藻水華污染中出現(xiàn)頻率最高、產(chǎn)量最大、造成危害最嚴(yán)重的藍(lán)藻毒素。近來研究發(fā)現(xiàn),MCs具有生殖毒性,能導(dǎo)致性腺病理?yè)p傷,體內(nèi)性激素水平紊亂,是潛在的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。本研究以MC-LR為染毒物,以生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)中性激素的合成與調(diào)節(jié)為中心,結(jié)合體內(nèi)和體外的實(shí)驗(yàn),分別從組織結(jié)構(gòu)、激素水平、基因表達(dá)各層面的變化探討了MCs對(duì)生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)的干擾作用及可能的影響機(jī)制。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,采用斑馬魚為實(shí)驗(yàn)材料,模擬野外自然環(huán)境下慢性暴露過程,仔魚從出膜5 d開始分組暴露于濃度為0,0.3,3和30μg/L的MC-LR中,直至90 d性成熟。選取雄性斑馬魚,分別從生長(zhǎng)發(fā)育參數(shù)、性腺結(jié)構(gòu)病理變化和性激素分泌水平,以及下丘腦-垂體-性腺軸(HPG)上類固醇調(diào)節(jié)相關(guān)基因變化幾方面進(jìn)行分析。結(jié)果顯示:從仔魚-性成熟的生命周期的MC-LR慢性暴露會(huì)導(dǎo)致生長(zhǎng)抑制、精巢組織損傷和精子發(fā)育遲緩。實(shí)驗(yàn)中,30μg/L暴露組中性激素T/E2比例的顯著下降,表明MC-LR的慢性暴露導(dǎo)致了性激素分泌調(diào)節(jié)失衡,并且通過調(diào)節(jié)HPG軸上性激素合成和作用關(guān)鍵基因(gnrh2,gnrh3,fshβ,lhβ,ar和cyp19a1b)的表達(dá),促進(jìn)血液循環(huán)中睪酮(T)向雌二醇(E2)的轉(zhuǎn)化。此外,各暴露組雄魚肝臟vtg1基因均顯著上調(diào),提示MC-LR的長(zhǎng)期慢性暴露可能產(chǎn)生雌激素樣效應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)斑馬魚整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育周期的慢性MC-LR暴露會(huì)對(duì)精巢造成結(jié)構(gòu)和功能損傷,并干擾生殖系統(tǒng)正常內(nèi)分泌調(diào)節(jié),其潛在的內(nèi)分泌干擾作用可能對(duì)MCs污染水域魚類的生長(zhǎng)、繁育乃至種群動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生威脅。體外實(shí)驗(yàn)首次采用人腎上腺皮脂瘤細(xì)胞(H295R)為實(shí)驗(yàn)材料,按照篩選類固醇干擾物的常用方法,使用不同濃度梯度MC-LR(0,1,100,500,1000,5000 n M)分別進(jìn)行暴露,48 h后收集細(xì)胞和培養(yǎng)基,測(cè)定培養(yǎng)基中性激素T和E2的含量及細(xì)胞中類固醇分泌通路上相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果顯示:各暴露組性激素合成相關(guān)基因(St AR,HMGR,CYP11A,CYP17,17β-HSD1,17β-HSD4,CYP19)均顯著上調(diào),表明MC-LR在體外造成內(nèi)分泌干擾作用。低濃度組中(1和10 n M MC-LR),性激素T和E2合成水平顯著上升,芳香化酶基因(CYP19)也出現(xiàn)顯著上調(diào),表明低濃度MCLR通過上調(diào)CYP19促進(jìn)雌激素的生成,具雌激素效應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。本實(shí)驗(yàn)表明這種MC-LR對(duì)類固醇合成通路的調(diào)節(jié)和潛在雌激素效應(yīng)可能是其對(duì)生殖內(nèi)分泌干擾的影響機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：微囊藻毒素 生殖毒性 內(nèi)分泌干擾 下丘腦-垂體-性腺軸 性激素 H295R細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：X52
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 縮略詞表（Abbreviation）10-12
• 第一章 文獻(xiàn)綜述12-23
• 1 微囊藻毒素概述12-14
• 1.1 微囊藻毒素結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)12-13
• 1.2 微囊藻毒素污染與人類健康13-14
• 2 微囊藻毒素的生殖毒性14-18
• 2.1 微囊藻毒素生殖毒性研究進(jìn)展14-16
• 2.2 微囊藻毒素生殖毒性的作用機(jī)制16-18
• 3. 生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)18-21
• 3.1 性激素生成主要途徑18-19
• 3.2 HPG軸對(duì)性激素合成的調(diào)控19-20
• 3.3 卵黃蛋白原20-21
• 3.4 微囊藻毒素潛在的生殖內(nèi)分泌干擾作用21
• 4 本研究目的與意義21-23
• 第二章 微囊藻毒素慢性暴露對(duì)雄性斑馬魚生殖軸干擾作用23-38
• 1 前言23-24
• 2 材料與方法24-27
• 2.1 試劑24
• 2.2 斑馬魚養(yǎng)殖暴露24
• 2.3 樣品采集24-25
• 2.4 光鏡樣品制備及觀察25
• 2.5 性激素T和E2含量的測(cè)定25
• 2.6 基因表達(dá)的測(cè)定25-27
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析27
• 3 結(jié)果與分析27-33
• 3.1 MC-LR對(duì)斑馬魚生長(zhǎng)和精巢指數(shù)的影響27-28
• 3.2 MC-LR對(duì)斑馬魚精巢病理學(xué)的影響28-29
• 3.3 MC-LR對(duì)斑馬魚精巢中T和E2含量的影響29-30
• 3.4 MC-LR對(duì)斑馬魚HPG軸基因表達(dá)的影響30-32
• 3.5 MC-LR對(duì)斑馬魚肝臟vtg1基因mRNA表達(dá)的影響32-33
• 4. 討論33-37
• 4.1 MC-LR對(duì)斑馬魚生長(zhǎng)發(fā)育影響33-34
• 4.2 MC-LR對(duì)雄性斑馬魚精巢的病理影響34
• 4.3 MC-LR對(duì)性激素睪酮和雌二醇含量的影響34-35
• 4.4 MC-LR對(duì)HPG軸生殖內(nèi)分泌相關(guān)基因表達(dá)影響35-36
• 4.5 MC-LR對(duì)肝臟卵黃蛋白原基因表達(dá)影響36-37
• 5. 結(jié)論37-38
• 第三章 體外實(shí)驗(yàn)中微囊藻毒素對(duì)類固醇激素合成通路的影響38-49
• 1 前言38-39
• 2 材料與方法39-43
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料39-40
• 2.2 細(xì)胞傳代培養(yǎng)40
• 2.3 細(xì)胞活力測(cè)定40
• 2.4 細(xì)胞化學(xué)暴露40-41
• 2.5 樣品收集41
• 2.6 激素測(cè)定41
• 2.7 類固醇合成關(guān)鍵酶基因的表達(dá)41-43
• 2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析43
• 3 結(jié)果與分析43-47
• 3.1 不同MC-LR濃度暴露下細(xì)胞活力43
• 3.2 不同MC-LR濃度暴露下性激素水平變化43-44
• 3.3 類固醇合成通路相關(guān)基因相對(duì)表達(dá)量變化44-47
• 4. 討論47-48
• 5. 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-68
• 附錄68-69
• 致謝69

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 陳培忠,孟憲才,秦玉平,孫紅琰,喬賜彬,葛相金,姜玉亭,陳永新,韓加誠(chéng);高氟區(qū)育齡婦女生殖內(nèi)分泌功能的調(diào)查研究[J];衛(wèi)生研究;1996年06期

2 何全安,楊進(jìn)偉,趙雅斐,周道明,姚武,陳琛,吳衛(wèi)平;錳作業(yè)男工生殖毒研究[J];河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;1997年04期

3 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 張文昌;黃慧玲;田俊;李煌元;閆平;吳思英;劉瑾;李昱辰;;鎘的女(雌)性生殖內(nèi)分泌干擾作用及其機(jī)理研究[A];中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第五次全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2009年

2 馬曉年;;男性生殖內(nèi)分泌與應(yīng)用[A];中國(guó)性學(xué)會(huì)第五屆年會(huì)學(xué)術(shù)論文集[C];2003年

3 連曉媛;丁巖;張均田;陳奇;;重復(fù)制動(dòng)應(yīng)激對(duì)雌性大鼠生殖內(nèi)分泌功能的影響[A];全國(guó)中藥研究學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2003年

4 和爾倫巴特爾;;蒙醫(yī)婦科臨證感悟舉隅[A];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院中蒙醫(yī)學(xué)院50周年校慶論文專輯（蒙醫(yī)蒙藥）[C];2006年

5 張林媛;丁思進(jìn);董力;喬佩環(huán);湯寧;常兵;;對(duì)羥基苯甲酸丁酯妊娠哺乳期暴露后通過干擾睪丸甾類合成代謝途徑影響雄性子代的生殖內(nèi)分泌功能[A];中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第六屆全國(guó)毒理學(xué)大會(huì)論文摘要[C];2013年

6 葉玲玲;曹文麗;姜雯;沈忠海;陳美;蔣優(yōu)珍;;青春期少女不同月經(jīng)方式的生殖內(nèi)分泌代謝狀態(tài)分析[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)生殖醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)第七次學(xué)術(shù)年會(huì)暨國(guó)家級(jí)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2007年

7 王少軍;朱兵;任曉暄;譚連紅;楊永升;;針刺調(diào)節(jié)生殖內(nèi)分泌功能經(jīng)脈、穴位特異性研究[A];中國(guó)針灸學(xué)會(huì)2009學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（上集）[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;江蘇省人民醫(yī)院臨床生殖醫(yī)學(xué)中心[N];新華日?qǐng)?bào);2003年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 蘇玉晶;微囊藻毒素-LR生殖內(nèi)分泌干擾作用的體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 蔡奇玲;康壽益膠囊對(duì)中老年人生殖內(nèi)分泌影響的臨床研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2004年

3 王軒;雙酚A對(duì)雄性大鼠的生殖內(nèi)分泌毒效應(yīng)及其機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

4 馬曉英;氟暴露對(duì)人群和雄性大鼠生殖內(nèi)分泌干擾作用研究[D];鄭州大學(xué);2007年

5 楊明娟;EMP暴露對(duì)雄鼠生殖內(nèi)分泌功能的影響及其相關(guān)機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

6 王亞峰;EMP輻照對(duì)幼齡雄性小鼠生殖內(nèi)分泌功能的影響及機(jī)制探討[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

7 楊露露;生命不同階段炎癥暴露對(duì)雄性小鼠生殖內(nèi)分泌的持續(xù)損害[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

8 陳曉宇;城市麻雀生殖內(nèi)分泌節(jié)律的變化及其影響因素研究[D];中央民族大學(xué);2012年

9 王珥梅;IBP及其與PAE_s聯(lián)合對(duì)生殖內(nèi)分泌和甲狀腺系統(tǒng)的影響[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2008年

10 劉麗霞;雙酚A對(duì)大鼠新型神經(jīng)生殖內(nèi)分泌調(diào)節(jié)系統(tǒng)影響的研究[D];河北大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：微囊藻毒素-LR生殖內(nèi)分泌干擾作用的體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：426126