耐鹽石油降解菌的分離鑒定及其降解特性研究
發(fā)布時間:2024-04-20 00:44
從江蘇某油田附近受石油污染土壤中分離出2株以柴油為唯一碳源的耐鹽石油降解菌株LS1和LS4。通過對菌株的生理生長特性、菌體的形態(tài)觀察及16S rDNA基因序列分析鑒定LS1和LS4分別為假單胞菌菌屬(Pseudomonas)和金黃桿菌菌屬(Chryseobacterium),兩株菌都為革蘭氏陰性菌。研究了不同環(huán)境條件對菌株的生長特性和柴油降解效果的影響。結(jié)果表明,菌株LS1可耐受的最高鹽度(NaCl)和柴油濃度分別為6%8%和12000mg·L-1,菌株LS1生長的適宜pH和溫度條件分別為6.08.0和2432℃。外加20300mg/L的碳源葡萄糖、蔗糖和乳糖均能促進菌株生長,大大縮短停滯期。在鹽度為6%、pH7.0、溫度為32℃、投加量為10%的條件下,歷經(jīng)6d,菌株LS1對初始濃度為3000mg·L-1的柴油的降解率可達78.3%,菌株LS4可耐受的最高鹽度(NaCl)和柴油濃度分別為6%8%和11000mg·L-1,菌株生長的適宜pH和溫度條件分別為7.09
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
1.1 石油污染現(xiàn)狀
1.1.1 石油污染來源
1.1.2 石油污染的危害
1.2 石油污染水體的修復(fù)技術(shù)
1.2.1 物理修復(fù)技術(shù)
1.2.2 化學(xué)修復(fù)方法
1.2.3 生物修復(fù)
1.3 石油降解菌研究現(xiàn)狀
1.3.1 石油降解菌及其降解機理
1.3.2 耐鹽石油降解菌
1.3.3 耐鹽菌的耐鹽機制
1.4 烷烴羥化酶的研究進展
1.5 本課題的研究目的及內(nèi)容
1.5.1 研究目的及意義
1.5.2 研究內(nèi)容
第2章 耐鹽石油降解菌的篩選及鑒定
2.1 實驗材料與儀器
2.1.1 實驗材料
2.1.2 實驗儀器
2.2 實驗方法
2.2.1 菌株的分離與純化
2.2.2 形態(tài)觀察
2.2.3 生理生化鑒定
2.2.4 菌株的分子生物學(xué)鑒定
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 降解菌的形態(tài)
2.3.2 降解菌株的生理生化特性
2.3.3 降解菌株的分子生物學(xué)鑒定
2.4 本章小結(jié)
第3章 耐鹽石油降解菌的生長及降解性能研究
3.1 實驗材料與儀器
3.1.1 培養(yǎng)基
3.1.2 實驗儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 菌原液的制備
3.2.2 細菌生長量的測定
3.2.3 菌株對石油的降解效率的測定
3.2.4 培養(yǎng)條件對菌株生長的影響
3.2.5 培養(yǎng)條件對菌株降解率的影響
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 培養(yǎng)條件對菌株生長的影響
3.3.2 外加碳源對菌株生長的影響
3.3.3 外加重金屬離子對菌株生長的影響
3.3.4 培養(yǎng)條件對菌株降解柴油效率的影響
3.3.5 外加碳源對菌株降解率的影響
3.3.6 重金屬離子對菌株降解率的影響
3.5 本章小結(jié)
第4章 耐鹽石油降解菌烷烴羥化酶部分基因克隆
4.1 實驗材料
4.1.1 主要儀器
4.1.2 主要培養(yǎng)基
4.2 實驗方法
4.2.1 烷烴羥化酶部分基因克隆
4.2.2 基于烷烴羥化酶部分基因序列系統(tǒng)發(fā)育樹分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 烷烴羥化酶部分基因測序
4.3.2 菌株 LS1 羥化酶同源性分析
4.3.3 菌株 LS4 羥化酶同源性分析
4.4 本章小結(jié)
第5章 菌株耐鹽機理研究
5.1 實驗材料
5.1.1 試驗藥品
5.1.2 培養(yǎng)基
5.2 實驗方法
5.2.1 氨基酸含量的測定
5.2.2 甜菜堿含量的測定
5.2.3 菌體內(nèi)谷氨酸和甜菜堿的提取
5.2.4 外加相容性物質(zhì)對菌體生長的影響實驗
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 不同鹽度條件下菌株細胞內(nèi)的甜菜堿和谷氨酸含量
5.3.2 外加相容性物質(zhì)對菌株生長的影響
5.4 本章小結(jié)
結(jié)論和建議
參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
詳細摘要
本文編號:3958621
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
1.1 石油污染現(xiàn)狀
1.1.1 石油污染來源
1.1.2 石油污染的危害
1.2 石油污染水體的修復(fù)技術(shù)
1.2.1 物理修復(fù)技術(shù)
1.2.2 化學(xué)修復(fù)方法
1.2.3 生物修復(fù)
1.3 石油降解菌研究現(xiàn)狀
1.3.1 石油降解菌及其降解機理
1.3.2 耐鹽石油降解菌
1.3.3 耐鹽菌的耐鹽機制
1.4 烷烴羥化酶的研究進展
1.5 本課題的研究目的及內(nèi)容
1.5.1 研究目的及意義
1.5.2 研究內(nèi)容
第2章 耐鹽石油降解菌的篩選及鑒定
2.1 實驗材料與儀器
2.1.1 實驗材料
2.1.2 實驗儀器
2.2 實驗方法
2.2.1 菌株的分離與純化
2.2.2 形態(tài)觀察
2.2.3 生理生化鑒定
2.2.4 菌株的分子生物學(xué)鑒定
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 降解菌的形態(tài)
2.3.2 降解菌株的生理生化特性
2.3.3 降解菌株的分子生物學(xué)鑒定
2.4 本章小結(jié)
第3章 耐鹽石油降解菌的生長及降解性能研究
3.1 實驗材料與儀器
3.1.1 培養(yǎng)基
3.1.2 實驗儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 菌原液的制備
3.2.2 細菌生長量的測定
3.2.3 菌株對石油的降解效率的測定
3.2.4 培養(yǎng)條件對菌株生長的影響
3.2.5 培養(yǎng)條件對菌株降解率的影響
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 培養(yǎng)條件對菌株生長的影響
3.3.2 外加碳源對菌株生長的影響
3.3.3 外加重金屬離子對菌株生長的影響
3.3.4 培養(yǎng)條件對菌株降解柴油效率的影響
3.3.5 外加碳源對菌株降解率的影響
3.3.6 重金屬離子對菌株降解率的影響
3.5 本章小結(jié)
第4章 耐鹽石油降解菌烷烴羥化酶部分基因克隆
4.1 實驗材料
4.1.1 主要儀器
4.1.2 主要培養(yǎng)基
4.2 實驗方法
4.2.1 烷烴羥化酶部分基因克隆
4.2.2 基于烷烴羥化酶部分基因序列系統(tǒng)發(fā)育樹分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 烷烴羥化酶部分基因測序
4.3.2 菌株 LS1 羥化酶同源性分析
4.3.3 菌株 LS4 羥化酶同源性分析
4.4 本章小結(jié)
第5章 菌株耐鹽機理研究
5.1 實驗材料
5.1.1 試驗藥品
5.1.2 培養(yǎng)基
5.2 實驗方法
5.2.1 氨基酸含量的測定
5.2.2 甜菜堿含量的測定
5.2.3 菌體內(nèi)谷氨酸和甜菜堿的提取
5.2.4 外加相容性物質(zhì)對菌體生長的影響實驗
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 不同鹽度條件下菌株細胞內(nèi)的甜菜堿和谷氨酸含量
5.3.2 外加相容性物質(zhì)對菌株生長的影響
5.4 本章小結(jié)
結(jié)論和建議
參考文獻
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致謝
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本文編號:3958621
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