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碳酸鹽礦化菌的分離篩選及生物注漿實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2024-04-11 01:59
  傳統(tǒng)巖土工程加固材料的高能耗,高污染問題成為了世界各國(guó)關(guān)注的焦點(diǎn)。研發(fā)能耗低、環(huán)境友好的巖土工程加固新技術(shù),具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。微生物誘導(dǎo)碳酸鈣沉積(MICP)技術(shù)以其環(huán)境友好、能耗低的優(yōu)點(diǎn),成為巖土工程加固領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。 本文開展了碳酸鹽礦化菌的分離篩選及生物注漿實(shí)驗(yàn)研究,取得的主要研究成果如下: 采用選擇性富集培養(yǎng)、平板分離的方法,從土壤中分離出5株尿素分解菌,研究了其生長(zhǎng)特性,確定了其最適培養(yǎng)條件為:培養(yǎng)基初始pH9,接種量4%,溫度35℃,搖床轉(zhuǎn)速200r/min。 通過對(duì)所分離菌株的脲酶活性和誘導(dǎo)礦化沉積能力的研究,篩選出了1株脲酶活性高、沉積量大的菌株。對(duì)沉積物的掃描電鏡(SEM)、能譜(EDS)和X射線衍射(XRD)檢測(cè)結(jié)果表明,其誘導(dǎo)沉積物為碳酸鈣。采用形態(tài)學(xué)、革蘭氏染色和16S rDNA序列同源性分析,確定該菌株為巴斯德芽孢桿菌。該株巴斯德芽孢桿菌在對(duì)數(shù)中后期的脲酶活性最高,單體脲酶活性達(dá)1.05mmol/(min·OD)。適量的Ni2+可明顯提高脲酶活性,當(dāng)培養(yǎng)基中NiCl2含量為10mg/L,單體脲酶活性提高66%。 鈣源種類和濃度影響細(xì)菌誘導(dǎo)碳酸鈣沉積能力。以...

【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1技術(shù)路線如圖

圖1-1技術(shù)路線如圖

菌株脲酶活性和誘導(dǎo)沉積能力的檢測(cè),篩選出脲酶活性高、沉積量大的菌株。研究Ni2+、鈣源種類和濃度對(duì)脲酶活性及誘導(dǎo)沉積能力的影響,并對(duì)其沉積物進(jìn)行掃描電鏡(SEM)、能譜(EDS)及X射線衍射(XRD)表征。(3)菌種鑒定參照生理生化鑒定方法[50]及16SrDNA菌種....


圖2-1采集的土樣

圖2-1采集的土樣

圖2-1采集的土樣將土壤樣品上清液進(jìn)行富集培養(yǎng),無菌的富集培養(yǎng)液清澈透亮,培養(yǎng)24h后選擇性富集培養(yǎng)基變得渾濁,輕輕搖動(dòng)時(shí)看見云霧狀的菌體,由此可知富集培養(yǎng)液中有大量的細(xì)菌被富集。牛皮紙分口的錐形瓶口可以聞到濃烈的氨氣味,可知培養(yǎng)基內(nèi)存在可以將尿素分解產(chǎn)生氨氣的細(xì)菌。富集前....


圖2-2無菌的培養(yǎng)基與富集后的培養(yǎng)基

圖2-2無菌的培養(yǎng)基與富集后的培養(yǎng)基

可知培養(yǎng)基內(nèi)存在可以將尿素分解產(chǎn)生氨氣的細(xì)菌。富集前后的富集培養(yǎng)基見圖2-2。富集培養(yǎng)前富集培養(yǎng)后圖2-2無菌的培養(yǎng)基與富集后的培養(yǎng)基2.3.2細(xì)菌的分離與純化將選擇性富集培養(yǎng)后的菌懸液涂布于NA-尿素固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)48h后,固體培養(yǎng)基上可見大量菌落。目的細(xì)菌....


圖2-3分離結(jié)果

圖2-3分離結(jié)果

色的變化初步區(qū)分目的菌株與雜菌。堿性條件下溴甲酚紫顯紫色。用無菌牙簽挑取固體培養(yǎng)基上的紫色菌落進(jìn)行純化。實(shí)驗(yàn)共分離純化得到5柱菌株尿素分解菌,細(xì)菌分離結(jié)果見圖2-3。



本文編號(hào):3950700

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