耐輻射奇球菌對(duì)銅/鉻/鈾的吸附作用及其基因工程載體的構(gòu)建
發(fā)布時(shí)間:2022-12-17 23:03
研究背景:環(huán)境污染已成為人們迫切關(guān)注的問題,工業(yè)的生產(chǎn)發(fā)展所產(chǎn)生的重金屬污染嚴(yán)重危害著人類健康和破壞生態(tài)環(huán)境。目前處理環(huán)境中的重金屬離子主要是用物理方法和化學(xué)方法,但用這些方法處理重金屬污染都不是最佳的選擇。近幾年來興起用生物方法進(jìn)行處理,其根本就是使用微生物本身所帶有的吸附或者還原等方法將重金屬污染物進(jìn)行清除。耐輻射奇球菌(Deinococcus radiodurans,DR)是一種目前世界上所知的對(duì)電離輻射損傷具有超強(qiáng)抗性的細(xì)菌,利用其對(duì)放射性和重金屬污染物的生物修復(fù)具有較大的前景。硫酸鹽還原菌(SRB)是一類具有較強(qiáng)還原作用的細(xì)菌,它能夠?qū)⒁恍└邇r(jià)的重金屬離子如六價(jià)鉻離子和鈾酰離子還原為低價(jià)狀態(tài)以降低其對(duì)環(huán)境毒性。研究目的:本研究旨在探索耐輻射奇球菌對(duì)重金屬離子銅和鉻的吸附作用,探索在模擬鈾廢水的條件下耐輻射奇球菌對(duì)放射性物質(zhì)鈾的吸附。利用耐輻射奇球菌的超強(qiáng)的輻射抗性和硫酸鹽還原菌的強(qiáng)還原性,將硫酸鹽還原菌的超強(qiáng)還原基因DsrA基因轉(zhuǎn)入到耐輻射奇球菌中,以期構(gòu)建既具有超強(qiáng)輻射抗性又具有較強(qiáng)還原作用的基因工程菌。以實(shí)現(xiàn)能夠處理鈾廢水溶液中的鈾,將高價(jià)的鈾離子吸附并還原為低價(jià)不溶的四...
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
第2章 耐輻射奇球菌對(duì)重金屬離子Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附作用研究
2.1 材料及儀器設(shè)備
2.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株、培養(yǎng)條件
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.4 主要生化試劑的配制
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 菌株的擴(kuò)大培養(yǎng)
2.2.2 影響耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的因素
2.2.3 干菌體的制備
2.3 結(jié)果及分析
2.3.1 耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.3.2 耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附作用的影響因素
2.3.3 耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的紅外光譜分析
2.3.4 耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的能譜儀(EDS)分析
2.3.5 γ輻照條件下耐輻射奇球菌和大腸桿菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附率比較
2.4 本章小結(jié)
第3章 F~-和NO_3~-共存下耐輻射奇球菌對(duì)鈾的吸附行為研究
3.1 材料及儀器設(shè)備
3.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株、培養(yǎng)條件
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
3.1.4 主要生化試劑的配制
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 菌株的擴(kuò)大培養(yǎng)
3.2.2 F~-和NO_3~-對(duì)耐輻射奇球菌的生長抑制作用
3.2.3 F~-和NO_3~-共存下影響耐輻射奇球菌對(duì)鈾吸附的因素
3.2.4 干菌體的制備
3.3 結(jié)果及分析
3.3.1 F~-和NO_3~-對(duì)耐輻射奇球菌的生長抑制作用
3.3.2 耐輻射奇球菌對(duì)鈾吸附的標(biāo)準(zhǔn)曲線
3.3.3 F~-和NO_3~-共存下影響耐輻射奇球菌對(duì)鈾吸附的因素
3.3.4 耐輻射奇球菌對(duì)鈾吸附的紅外光譜分析
3.4 本章小結(jié)
第4章 構(gòu)建含硫酸鹽還原菌dsrA基因的基因工程載體
4.1 材料及儀器設(shè)備
4.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株、培養(yǎng)條件
4.1.2 主要試劑
4.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
4.2.1 硫酸鹽還原菌(SRB)的培養(yǎng)
4.2.2 硫酸鹽還原菌(SRB)基因組DNA的提取
4.2.3 DsrA目的基因的PCR
4.2.4 載體的酶切
4.2.5 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備
4.2.6 大腸桿菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化
4.2.7 菌落PCR鑒定
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.3.1 硫酸鹽還原菌(SRB)的培養(yǎng)結(jié)果
4.3.2 硫酸鹽還原菌(SRB)基因組DNA的提取結(jié)果
4.3.3 dsrA目的基因的PCR
4.3.4 dsrA目的基因的測(cè)序及Blast比對(duì)結(jié)果
4.3.5 載體pRADK-DsrA的鑒定
4.4 本章小結(jié)
第五章 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝
本文編號(hào):3720824
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
第2章 耐輻射奇球菌對(duì)重金屬離子Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附作用研究
2.1 材料及儀器設(shè)備
2.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株、培養(yǎng)條件
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.4 主要生化試劑的配制
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 菌株的擴(kuò)大培養(yǎng)
2.2.2 影響耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的因素
2.2.3 干菌體的制備
2.3 結(jié)果及分析
2.3.1 耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.3.2 耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附作用的影響因素
2.3.3 耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的紅外光譜分析
2.3.4 耐輻射奇球菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的能譜儀(EDS)分析
2.3.5 γ輻照條件下耐輻射奇球菌和大腸桿菌對(duì)Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附率比較
2.4 本章小結(jié)
第3章 F~-和NO_3~-共存下耐輻射奇球菌對(duì)鈾的吸附行為研究
3.1 材料及儀器設(shè)備
3.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株、培養(yǎng)條件
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
3.1.4 主要生化試劑的配制
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 菌株的擴(kuò)大培養(yǎng)
3.2.2 F~-和NO_3~-對(duì)耐輻射奇球菌的生長抑制作用
3.2.3 F~-和NO_3~-共存下影響耐輻射奇球菌對(duì)鈾吸附的因素
3.2.4 干菌體的制備
3.3 結(jié)果及分析
3.3.1 F~-和NO_3~-對(duì)耐輻射奇球菌的生長抑制作用
3.3.2 耐輻射奇球菌對(duì)鈾吸附的標(biāo)準(zhǔn)曲線
3.3.3 F~-和NO_3~-共存下影響耐輻射奇球菌對(duì)鈾吸附的因素
3.3.4 耐輻射奇球菌對(duì)鈾吸附的紅外光譜分析
3.4 本章小結(jié)
第4章 構(gòu)建含硫酸鹽還原菌dsrA基因的基因工程載體
4.1 材料及儀器設(shè)備
4.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株、培養(yǎng)條件
4.1.2 主要試劑
4.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
4.2.1 硫酸鹽還原菌(SRB)的培養(yǎng)
4.2.2 硫酸鹽還原菌(SRB)基因組DNA的提取
4.2.3 DsrA目的基因的PCR
4.2.4 載體的酶切
4.2.5 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備
4.2.6 大腸桿菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化
4.2.7 菌落PCR鑒定
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.3.1 硫酸鹽還原菌(SRB)的培養(yǎng)結(jié)果
4.3.2 硫酸鹽還原菌(SRB)基因組DNA的提取結(jié)果
4.3.3 dsrA目的基因的PCR
4.3.4 dsrA目的基因的測(cè)序及Blast比對(duì)結(jié)果
4.3.5 載體pRADK-DsrA的鑒定
4.4 本章小結(jié)
第五章 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝
本文編號(hào):3720824
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