發(fā)布時(shí)間：2022-08-08 15:29

　　近年來(lái),唑類抗真菌劑由于在環(huán)境中被廣泛檢出以及它們潛在的生態(tài)毒理效應(yīng),而受到人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注。唑類抗真菌劑是一類用于抑制或殺滅真菌的化合物,常作為抗真菌的活性成分用于藥物與個(gè)人護(hù)理品中。被使用后,這類物質(zhì)會(huì)隨著生活污水直接或由于污水處理廠的不完全去除間接進(jìn)入水環(huán)境中。唑類抗真菌劑在水環(huán)境中的濃度在幾個(gè)納克每升到幾個(gè)微克每升水平。水環(huán)境中殘留的唑類抗真菌劑將會(huì)對(duì)水生生物造成潛在的風(fēng)險(xiǎn)。已有的報(bào)道指出唑類抗真菌劑通過(guò)結(jié)合細(xì)胞色素P450酶（CYP450）,抑制其活性,從而影響生物體的代謝平衡。然而,目前很少報(bào)道唑類抗真菌劑在轉(zhuǎn)錄水平上對(duì)魚(yú)類重要信號(hào)通路的影響。因此,本研究以斑馬魚(yú)（Danio rerio）為水生生物模型,研究典型的唑類抗真菌劑氯咪巴唑（Climbazole）對(duì)斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)育階段和成年階段重要信號(hào)通路關(guān)鍵基因的轉(zhuǎn)錄影響,評(píng)價(jià)受影響的信號(hào)通路間的相關(guān)性,篩選氯咪巴唑暴露對(duì)斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)育階段的潛在生物標(biāo)志物。主要研究結(jié)果如下:（1）研究了氯咪巴唑（100 ng/L和10000 ng/L）對(duì)斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)育階段（2 dpf、7 dpf和14 dpf）重要信號(hào)通路73個(gè)相... 

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 唑類抗真菌劑介紹
        1.1.1 唑類抗真菌劑的基本分類和使用情況
        1.1.2 唑類抗真菌劑在水環(huán)境中的污染現(xiàn)狀和生態(tài)毒理效應(yīng)
    1.2 斑馬魚(yú)及其體內(nèi)重要信號(hào)通路介紹
        1.2.1 斑馬魚(yú)介紹
        1.2.2 斑馬魚(yú)重要信號(hào)通路介紹
    1.3 本研究的目的和意義
第二章 斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)育階段的基因轉(zhuǎn)錄水平分析
    2.1 藥品與試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 斑馬魚(yú)及斑馬魚(yú)胚胎收集
    2.4 斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)育階段暴露實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)
    2.5 總RNA提取及瓊脂糖凝膠電泳
        2.5.1 總RNA的提取
        2.5.2 瓊脂糖凝膠電泳
    2.6 總RNA濃度的測(cè)定
    2.7 第一鏈cDNA的合成及測(cè)定
        2.7.1 第一鏈cDNA的合成
        2.7.2 合成的cDNA的測(cè)定
    2.8 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)
    2.9 化學(xué)分析
    2.10 轉(zhuǎn)錄表達(dá)驗(yàn)證性分析
    2.11 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析
    2.12 結(jié)果與討論
        2.12.1 胚胎斑馬魚(yú)晝夜節(jié)律系統(tǒng)和氧化應(yīng)激系統(tǒng)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄改變
        2.12.2 胚胎斑馬魚(yú)卵母細(xì)胞成熟、類固醇生成和性別分化相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄改變
        2.12.3 潛在的生物標(biāo)志物基因和環(huán)境暗示
        2.12.4 結(jié)論
第三章 斑馬魚(yú)成魚(yú)性腺組織的基因轉(zhuǎn)錄水平分析
    3.1 材料
    3.2 藥品與試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.4 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
    3.5 實(shí)驗(yàn)方法
        3.5.1 斑馬魚(yú)成魚(yú)暴露實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)
        3.5.2 組織樣品的收集和總RNA的提取
        3.5.3 總RNA濃度的測(cè)定
        3.5.4 第一鏈cDNA的合成
        3.5.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)
    3.6 結(jié)果和討論
    3.7 結(jié)論
第四章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 論文的創(chuàng)新性
    4.3 存在的不足與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文
致謝



本文編號(hào)：3671762