鎘脅迫對黑腹果蠅生理特性、抗氧化能力及DNA甲基化的影響
發(fā)布時間:2022-07-16 20:31
鎘(cadmium)是一種常見的污染重金屬,被國際癌癥研究會確認為第一致癌物。當人體攝入微量的鎘,因其半衰期較長,鎘可在如腎、肝、肺等多項器官及生殖系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等中蓄積,從而干擾正常的生物功能。過度的金屬脅迫將引發(fā)肺部炎癥、癌癥和心血管疾病等多種疾病。目前重金屬鎘對機體產(chǎn)生毒害作用的機制主要涉及其誘導ROS的產(chǎn)生,造成氧化損傷、干擾細胞內(nèi)離子平衡,引起表觀遺傳變異等方面。黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)在生物科學中經(jīng)常被用于遺傳研究,并在過去的幾十年,它已成為人類疾病和毒理學研究的最好的生物之一。黑腹果蠅和人類之間有廣泛的保守基因和發(fā)育機制,在對果蠅和人類的基因組進行比較時發(fā)現(xiàn),人體內(nèi)引發(fā)人類疾病的基因(包括與癌癥相關的基因)有三分之二都能在果蠅體內(nèi)找到相似基因。本研究選用黑腹果蠅Canton-S品系作為實驗材料,分別以0、13、26、52mg/L鎘以不同處理方式(雌處理、雄處理、雌雄處理)脅迫F0代果蠅,F1代去脅迫,檢測鎘脅迫后F0代、F1代果蠅攀爬力、抗饑力、體重、羽化數(shù)及性別比的改變,以及F0代、F1代果蠅總抗氧化含量(T-AOC)及谷胱...
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文縮略詞一覽表
第1章 前言
1.1 重金屬鎘的理化性質(zhì)、毒性效應及分子機制
1.1.1 鎘的理化性質(zhì)
1.1.2 鎘的毒性效應
1.1.3 鎘毒性的分子機制
1.2 生物體抗氧化系統(tǒng)的研究進展
1.2.1 昆蟲抗氧化系統(tǒng)的研究
1.2.2 氧化應激活化的主要信號通路
1.2.3 谷胱甘肽過氧化物的生物學意義
1.2.4 總抗氧化能力的生物學意義
1.3 DNA甲基化的研究
1.3.1 DNA甲基化的研究進展
1.3.2 DNA甲基化的檢測方法
1.3.3 全基因組亞硫酸氫鹽測序法原理及工作流程
1.4 模式生物黑腹果蠅的概述
1.4.1 黑腹果蠅的簡介
1.4.2 黑腹果蠅的毒理學研究
1.5 本研究的內(nèi)容與意義
第2章 鎘脅迫對果蠅攀爬力、抗饑力等生理特性的影響
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要試劑和儀器
2.1.3 主要儀器
2.2 實驗方法
2.2.1 培養(yǎng)基配制
2.2.2 果蠅的擴繁
2.2.3 金屬鎘處理
2.2.4 果蠅生理特性的測定
2.2.5 實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 鎘脅迫對果蠅攀爬力的影響
2.3.2 鎘脅迫對果蠅抗饑力的影響
2.3.3 鎘誘導果蠅體重變化
2.3.4 鎘脅迫對果蠅羽化數(shù)及性別比的影響
2.4 討論
2.4.1 鎘脅迫降低果蠅的攀爬力
2.4.2 鎘脅迫降低果蠅的抗饑力
2.4.3 鎘誘導果蠅體重下降
2.4.4 鎘脅迫誘導果蠅羽化數(shù)減少
2.4.5 鎘脅迫誘導黑腹果蠅性別比失衡
第3章 鎘脅迫對黑腹果蠅抗氧化能力的影響
3.1 實驗材料與方法
3.1.1 實驗材料
3.1.2 培養(yǎng)基配方及其配制
3.2 主要儀器與設備
3.3 實驗方法
3.3.1 果蠅培養(yǎng)
3.3.2 勻漿制備
3.3.3 蛋白含量測定
3.3.4 T-AOC活力的檢測
3.3.5 GSH-Px活性的測定
3.3.6 數(shù)據(jù)處理
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 不同鎘濃度對黑腹果蠅T-AOC活力的影響
3.4.2 不同濃度鎘對黑腹果蠅GSH-Px活力的影響
3.5 討論
第4章 鎘誘導對黑腹果蠅全基因組甲基化水平的影響研究
4.1 實驗材料
4.2 實驗方法
4.2.1 DNA提取與質(zhì)檢
4.2.2 基因文庫構(gòu)建和測序
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 樣品檢測結(jié)果
4.3.2 參考序列比對分析
4.3.3 甲基化水平分析
4.3.4 甲基化C附近堿基的序列特征分析
4.3.5 區(qū)域甲基化分析
4.3.6 甲基化組DMR分析
4.3.7 與果蠅抗性相關基因的篩選
4.4 討論
4.4.1 全基因組亞硫酸氫鹽測序技術(shù)
4.4.2 鎘脅迫誘導黑腹果蠅全基因組DNA甲基化水平的變化
4.4.3 CG、CHG、CHH基序的甲基化水平及意義
4.4.4 基因功能區(qū)甲基化水平分布及意義
4.4.5 黑腹果蠅抗性相關的DMR基因
第5章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
參考文獻
致謝
本文編號:3663239
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文縮略詞一覽表
第1章 前言
1.1 重金屬鎘的理化性質(zhì)、毒性效應及分子機制
1.1.1 鎘的理化性質(zhì)
1.1.2 鎘的毒性效應
1.1.3 鎘毒性的分子機制
1.2 生物體抗氧化系統(tǒng)的研究進展
1.2.1 昆蟲抗氧化系統(tǒng)的研究
1.2.2 氧化應激活化的主要信號通路
1.2.3 谷胱甘肽過氧化物的生物學意義
1.2.4 總抗氧化能力的生物學意義
1.3 DNA甲基化的研究
1.3.1 DNA甲基化的研究進展
1.3.2 DNA甲基化的檢測方法
1.3.3 全基因組亞硫酸氫鹽測序法原理及工作流程
1.4 模式生物黑腹果蠅的概述
1.4.1 黑腹果蠅的簡介
1.4.2 黑腹果蠅的毒理學研究
1.5 本研究的內(nèi)容與意義
第2章 鎘脅迫對果蠅攀爬力、抗饑力等生理特性的影響
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要試劑和儀器
2.1.3 主要儀器
2.2 實驗方法
2.2.1 培養(yǎng)基配制
2.2.2 果蠅的擴繁
2.2.3 金屬鎘處理
2.2.4 果蠅生理特性的測定
2.2.5 實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 鎘脅迫對果蠅攀爬力的影響
2.3.2 鎘脅迫對果蠅抗饑力的影響
2.3.3 鎘誘導果蠅體重變化
2.3.4 鎘脅迫對果蠅羽化數(shù)及性別比的影響
2.4 討論
2.4.1 鎘脅迫降低果蠅的攀爬力
2.4.2 鎘脅迫降低果蠅的抗饑力
2.4.3 鎘誘導果蠅體重下降
2.4.4 鎘脅迫誘導果蠅羽化數(shù)減少
2.4.5 鎘脅迫誘導黑腹果蠅性別比失衡
第3章 鎘脅迫對黑腹果蠅抗氧化能力的影響
3.1 實驗材料與方法
3.1.1 實驗材料
3.1.2 培養(yǎng)基配方及其配制
3.2 主要儀器與設備
3.3 實驗方法
3.3.1 果蠅培養(yǎng)
3.3.2 勻漿制備
3.3.3 蛋白含量測定
3.3.4 T-AOC活力的檢測
3.3.5 GSH-Px活性的測定
3.3.6 數(shù)據(jù)處理
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 不同鎘濃度對黑腹果蠅T-AOC活力的影響
3.4.2 不同濃度鎘對黑腹果蠅GSH-Px活力的影響
3.5 討論
第4章 鎘誘導對黑腹果蠅全基因組甲基化水平的影響研究
4.1 實驗材料
4.2 實驗方法
4.2.1 DNA提取與質(zhì)檢
4.2.2 基因文庫構(gòu)建和測序
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 樣品檢測結(jié)果
4.3.2 參考序列比對分析
4.3.3 甲基化水平分析
4.3.4 甲基化C附近堿基的序列特征分析
4.3.5 區(qū)域甲基化分析
4.3.6 甲基化組DMR分析
4.3.7 與果蠅抗性相關基因的篩選
4.4 討論
4.4.1 全基因組亞硫酸氫鹽測序技術(shù)
4.4.2 鎘脅迫誘導黑腹果蠅全基因組DNA甲基化水平的變化
4.4.3 CG、CHG、CHH基序的甲基化水平及意義
4.4.4 基因功能區(qū)甲基化水平分布及意義
4.4.5 黑腹果蠅抗性相關的DMR基因
第5章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
參考文獻
致謝
本文編號:3663239
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