水稻PP2C基因在耐汞性中的功能分析
發(fā)布時間：2022-01-11 00:10
汞作為環(huán)境中毒性極強的金屬離子,可在水稻體內(nèi)積累,對水稻細胞具有強烈的毒性,并誘發(fā)植物體損傷、產(chǎn)量下降。為了探究水稻對汞的吸收及耐性機制,本研究將實驗前期篩選得到的OsPP2C進行表達分析及其遺傳轉(zhuǎn)化,主要研究結(jié)果如下:1、表達分析:日本晴幼苗光照培養(yǎng)箱中正常培養(yǎng)到三葉期,從光照0小時開始,以2 h為間隔,分析葉片中OsPP2C表達變化。結(jié)果顯示,日本晴中OsPP2C的表達峰值在ZT 10 h處;在黑暗條件下OsPP2C的表達均趨于平穩(wěn),因此OsPP2C的表達在水稻幼苗期具有周期節(jié)律性。正常生長情況下,日本晴OsPP2C在各個組織中均有表達,葉片中表達量最高;汞脅迫6 h后,根、莖、根莖結(jié)合處OsPP2C表達量顯著上升,但葉片中的顯著下降。構(gòu)建OsPP2C與GFP融合載體,利用農(nóng)桿菌GV3101菌液注射本氏煙葉片細胞以及重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化水稻原生質(zhì)體,發(fā)現(xiàn)OsPP2C可能在細胞質(zhì)和細胞膜均有表達。2、功能驗證:陽性轉(zhuǎn)基因株系與野生型日本晴幼苗汞脅迫6 h后,野生型和超表達株系葉片中表達量出現(xiàn)下降,而干擾株系的未發(fā)生顯著變化。但根系OsPP2C的表達量呈上升趨勢,野生型和超表達株系中的表達量在...
【文章來源】：浙江師范大學浙江省
【文章頁數(shù)】：72 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
5S::eGFP(NO-TAA)載體圖譜
圖 1-4 OsPP2C 的組織特異性表達Fig. 1-4 Tissue-specific expression of OsPP2C4.4 OsPP2C 的瞬時表達4.4.1 35S::OsPP2C:eGFP 與 35S::eGFP:OsPP2C 載體的構(gòu)建本實驗利用水稻 cDNA，擴增了 OsPP2C 基因，并通過 pMD-18T 驗證、檢
圖 1-5 酶切及菌液 PCR 電泳圖a. 酶切圖 M. Marker(DL2000); 1, 2. PP2C-No-ATG; 3, 4. eGFP-No-ATG; 5. 對照質(zhì) 菌液 PCR 驗證圖 M. Marker(DL2000); 1, 2. 35S::eGFP:OsPP2C; 3, 4. 35S::OsPP2C:eG. 質(zhì)粒酶切驗證圖 M1. Marker(DL2000); M2. Marker(DL10000); 1 , 2. 35S::eGFP:OsPP3, 4. 35S::OsPP2C:eGFPFig. 1-5 agarose gel electrophoresis of enzymatic digestion and PCR
【參考文獻】：
期刊論文
[1]汞脅迫對7個水稻品種花粉活力與結(jié)實率的影響[J]. 趙夏夏,李尚錕,林堪德,王旭明,胡燕,郭文燕,黃永相,李偉,郭建夫. 熱帶農(nóng)業(yè)科學. 2018(08)
[2]花生蛋白磷酸酶2C家族基因的鑒定和鹽脅迫響應分析[J]. 陳冠旭,秦貴龍,李恩廣,趙春梅,喬利仙,王晶珊,隋炯明. 華北農(nóng)學報. 2018(03)
[3]基于丹參基因組的蛋白磷酸酶2C家族的系統(tǒng)分析[J]. 徐志超,浦香東,宋經(jīng)元. 中國現(xiàn)代中藥. 2018(06)
[4]汞在酸性紫色水稻土的轉(zhuǎn)化與水稻汞富集特征[J]. 李雨芩,孫濤,鄧晗,張成,王永敏,王定勇. 環(huán)境科學. 2018(05)
[5]不同小白菜品種硝酸鹽含量、氮代謝關(guān)鍵酶活性及NRT1表達和亞細胞定位[J]. 李彥華,楊蕓,徐衛(wèi)紅,周鑫斌,王衛(wèi)中,遲蓀琳,李桃,張春來,趙婉伊,秦余麗,王正銀,謝德體. 食品科學. 2018(07)
[6]汞脅迫下氮磷減施及鐵膜形成對水稻幼苗根系生長的影響[J]. 黃天元,鄧泓. 生態(tài)學雜志. 2016(09)
[7]大氣汞濃度升高對水稻葉片生理效應的影響研究[J]. 陳劍,王章瑋,張曉山,秦普豐,陸海軍. 生態(tài)毒理學報. 2016(01)
[8]不同秈稻品種對土壤汞富集的研究[J]. 田甜,陳炎輝,陳春樂,謝團輝,王果. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報. 2015(05)
[9]水稻汞污染研究進展[J]. 劉慧,馬文,戴九蘭. 山東建筑大學學報. 2015(02)
[10]不同品種對水稻鉛汞耐性和富集能力的影響[J]. 吳亮,孫波. 土壤. 2014(06)
博士論文
[1]二穗短柄草BdPYL和BdPP2CA基因的克隆及BdPP2CA6抗鹽功能研究[D]. 張釩.華中科技大學 2017
[2]汞脅迫下水稻根蛋白質(zhì)組學及抗性相關(guān)基因功能分析[D]. 王飛娟.浙江大學 2010
碩士論文
[1]汞對水稻幼苗生長的影響及水稻基因OsPP2C與其耐汞性[D]. 劉元香.浙江師范大學 2016
[2]百脈根LjPP2C蛋白磷酸酶負調(diào)控MPK6信號轉(zhuǎn)導途徑[D]. 官曉敏.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
[3]白菜PP2C型蛋白磷酸酶ABI1同源蛋白（BraABI1b）參與植物ABA反應的初步功能分析[D]. 郝紅梅.西北農(nóng)林科技大學 2015
[4]水曲柳節(jié)律基因LHY啟動子克隆及功能研究[D]. 王璇.東北林業(yè)大學 2015
[5]重金屬Cd富集對水花生及其愈傷組織的毒理學研究[D]. 徐君.南京師范大學 2012
本文編號：3581683
【文章來源】：浙江師范大學浙江省
【文章頁數(shù)】：72 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
5S::eGFP(NO-TAA)載體圖譜
圖 1-4 OsPP2C 的組織特異性表達Fig. 1-4 Tissue-specific expression of OsPP2C4.4 OsPP2C 的瞬時表達4.4.1 35S::OsPP2C:eGFP 與 35S::eGFP:OsPP2C 載體的構(gòu)建本實驗利用水稻 cDNA，擴增了 OsPP2C 基因，并通過 pMD-18T 驗證、檢
圖 1-5 酶切及菌液 PCR 電泳圖a. 酶切圖 M. Marker(DL2000); 1, 2. PP2C-No-ATG; 3, 4. eGFP-No-ATG; 5. 對照質(zhì) 菌液 PCR 驗證圖 M. Marker(DL2000); 1, 2. 35S::eGFP:OsPP2C; 3, 4. 35S::OsPP2C:eG. 質(zhì)粒酶切驗證圖 M1. Marker(DL2000); M2. Marker(DL10000); 1 , 2. 35S::eGFP:OsPP3, 4. 35S::OsPP2C:eGFPFig. 1-5 agarose gel electrophoresis of enzymatic digestion and PCR
【參考文獻】：
期刊論文
[1]汞脅迫對7個水稻品種花粉活力與結(jié)實率的影響[J]. 趙夏夏,李尚錕,林堪德,王旭明,胡燕,郭文燕,黃永相,李偉,郭建夫. 熱帶農(nóng)業(yè)科學. 2018(08)
[2]花生蛋白磷酸酶2C家族基因的鑒定和鹽脅迫響應分析[J]. 陳冠旭,秦貴龍,李恩廣,趙春梅,喬利仙,王晶珊,隋炯明. 華北農(nóng)學報. 2018(03)
[3]基于丹參基因組的蛋白磷酸酶2C家族的系統(tǒng)分析[J]. 徐志超,浦香東,宋經(jīng)元. 中國現(xiàn)代中藥. 2018(06)
[4]汞在酸性紫色水稻土的轉(zhuǎn)化與水稻汞富集特征[J]. 李雨芩,孫濤,鄧晗,張成,王永敏,王定勇. 環(huán)境科學. 2018(05)
[5]不同小白菜品種硝酸鹽含量、氮代謝關(guān)鍵酶活性及NRT1表達和亞細胞定位[J]. 李彥華,楊蕓,徐衛(wèi)紅,周鑫斌,王衛(wèi)中,遲蓀琳,李桃,張春來,趙婉伊,秦余麗,王正銀,謝德體. 食品科學. 2018(07)
[6]汞脅迫下氮磷減施及鐵膜形成對水稻幼苗根系生長的影響[J]. 黃天元,鄧泓. 生態(tài)學雜志. 2016(09)
[7]大氣汞濃度升高對水稻葉片生理效應的影響研究[J]. 陳劍,王章瑋,張曉山,秦普豐,陸海軍. 生態(tài)毒理學報. 2016(01)
[8]不同秈稻品種對土壤汞富集的研究[J]. 田甜,陳炎輝,陳春樂,謝團輝,王果. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報. 2015(05)
[9]水稻汞污染研究進展[J]. 劉慧,馬文,戴九蘭. 山東建筑大學學報. 2015(02)
[10]不同品種對水稻鉛汞耐性和富集能力的影響[J]. 吳亮,孫波. 土壤. 2014(06)
博士論文
[1]二穗短柄草BdPYL和BdPP2CA基因的克隆及BdPP2CA6抗鹽功能研究[D]. 張釩.華中科技大學 2017
[2]汞脅迫下水稻根蛋白質(zhì)組學及抗性相關(guān)基因功能分析[D]. 王飛娟.浙江大學 2010
碩士論文
[1]汞對水稻幼苗生長的影響及水稻基因OsPP2C與其耐汞性[D]. 劉元香.浙江師范大學 2016
[2]百脈根LjPP2C蛋白磷酸酶負調(diào)控MPK6信號轉(zhuǎn)導途徑[D]. 官曉敏.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
[3]白菜PP2C型蛋白磷酸酶ABI1同源蛋白（BraABI1b）參與植物ABA反應的初步功能分析[D]. 郝紅梅.西北農(nóng)林科技大學 2015
[4]水曲柳節(jié)律基因LHY啟動子克隆及功能研究[D]. 王璇.東北林業(yè)大學 2015
[5]重金屬Cd富集對水花生及其愈傷組織的毒理學研究[D]. 徐君.南京師范大學 2012
本文編號：3581683
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