近年來(lái),隨著水體富營(yíng)養(yǎng)化的日益加劇,藍(lán)藻暴發(fā)產(chǎn)生的微囊藻毒素（Microcystins,簡(jiǎn)稱MCs）污染問(wèn)題已經(jīng)成為一個(gè)全球關(guān)注的熱點(diǎn)。微囊藻毒素是藍(lán)藻產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物,具有強(qiáng)烈的致肝癌作用,其分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類繁多,以痕量形式穩(wěn)定地存在于各類不同程度富營(yíng)養(yǎng)化水體中,傳統(tǒng)的處理工藝很難有效去除,這對(duì)人體健康構(gòu)成潛在威脅。因此,水體中微囊藻毒素的監(jiān)測(cè)和季節(jié)性變化研究對(duì)預(yù)防和控制微囊藻毒素污染,減少藻毒素的危害,保護(hù)人體健康等具有重要意義。本文首先優(yōu)化和驗(yàn)證了實(shí)驗(yàn)所需的酶聯(lián)免疫試劑盒,基于優(yōu)化后的酶聯(lián)免疫方法對(duì)于橋水庫(kù)、爾王莊水庫(kù)和天津?yàn)I海新區(qū)人工濕地水體中微囊藻毒素的濃度進(jìn)行長(zhǎng)期監(jiān)測(cè);此外,利用石墨烯的偏振依賴吸收特性,基于還原氧化石墨烯（RGO）開(kāi)發(fā)了微囊藻毒素檢測(cè)的光學(xué)免疫傳感器。主要研究結(jié)果如下:（1）在振蕩條件下（400rpm）孵育抗體和微囊藻毒素共軛溶液成功優(yōu)化酶聯(lián)免疫（ELISA）試劑盒,經(jīng)四參數(shù)曲線擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度高達(dá)85%,批次內(nèi)和批次間精確度小于15%,檢出限（LOD）和定量限（LOQ）分別為0.011μg/L與0.032μg/L,測(cè)定不同濃度地表水樣的加... 

【文章來(lái)源】：重慶交通大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

論文研究技術(shù)路線圖

.3 ELISA 驗(yàn)證：必要參數(shù).3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線在 2016 -2017 年間，通過(guò) 16 次實(shí)驗(yàn)建立了 6 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液% B0質(zhì)量控制圖線圖，由圖 2-5 可知，同一標(biāo)準(zhǔn)溶液的%B0值穩(wěn)定，不同標(biāo)準(zhǔn)溶液的%B0異。方差分析表明，不同標(biāo)準(zhǔn)溶液的%B0值差異顯著(p<0.05)且同一標(biāo)準(zhǔn)B0均在控制限內(nèi)。4 參數(shù)方程擬合的標(biāo)準(zhǔn)曲線 r2大于 0.99（圖 2-6），重復(fù)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）小于 15％。對(duì)于一個(gè)被認(rèn)為有效的實(shí)驗(yàn)，4 參數(shù)曲線大于或等于 0.98，單次試驗(yàn)重復(fù)的 CV 值應(yīng)小于 15%[93]。綜上所述，可以通過(guò)三個(gè)指標(biāo)驗(yàn)證擬合的標(biāo)準(zhǔn)曲線:(1)r2>0.98，(2) 重復(fù)V 小于 15%，(3) 不同標(biāo)準(zhǔn)溶液的%B0值差異顯著且同一標(biāo)準(zhǔn)溶液的%B0控制限內(nèi)。

圖 2-6 MC-LR 標(biāo)準(zhǔn)溶液擬合的標(biāo)準(zhǔn)曲線2.2.3.2 準(zhǔn)確性使用含有已知濃度的 MC-LR 溶液和 Abraxis 公司提供的盲測(cè)樣品測(cè)定 ELISA試劑盒的準(zhǔn)確度。已知濃度的 MC-LR 溶液為 ELSIA 試劑盒中的陽(yáng)性對(duì)照溶液和高、低濃度加標(biāo)溶液。盲測(cè)樣品為地表水和自來(lái)水加標(biāo)水樣。由表 2.2 和 2.3 分析說(shuō)明，所有測(cè)試樣品的準(zhǔn)確度超過(guò) 84％，優(yōu)化的 ELISA 試劑盒準(zhǔn)確度近似高達(dá)85％。表 2.2 陽(yáng)性對(duì)照溶液和高、低濃度加標(biāo)溶液準(zhǔn)確度測(cè)定樣品濃度(μg/L)4 次 (n=8) 8 次 (n=16) 16 次 (n=32)測(cè)量值(μg/L)準(zhǔn)確度測(cè)量值(μg/L)準(zhǔn)確度測(cè)量值(μg/L)準(zhǔn)確度0.75 0.656 87.42% 0.690 93.07% 0.688 91.73%1.00 1.015 98.50% 0.977 97.70% ND ND0.15 0.139 92.67% 0.138 92.00% ND ND

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]典型富營(yíng)養(yǎng)化湖泊微囊藻毒素分布特征及主要影響因子差異性分析[D]. 毛敬英.西南交通大學(xué) 2012
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本文編號(hào)：3572498