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基于核酸放大和納米金的卡那霉素光學生物傳感方法研究

發(fā)布時間:2021-11-15 14:53
  動物源性農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)境土壤以及水體中卡那霉素(Kana)殘留會對人類健康以及生態(tài)環(huán)境帶來嚴重影響,故應對農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境樣本中卡那霉素殘留量進行嚴格監(jiān)測。然而,傳統(tǒng)檢測方法費時、復雜且對儀器或人員要求較高,限制其推廣應用。光學生物傳感器具有簡單便捷、響應快、檢測限低、準確度好、靈敏度高以及成本低等優(yōu)勢在分析檢測領域飛速發(fā)展;金納米材料具有獨特的光學特性,使其廣泛地應用于光學傳感檢測中;無酶輔助的雜交鏈式反應(HCR)可實現(xiàn)常溫下信號放大,以此達到對目標物痕量檢測的目的。本文建立了金納米材料為信號轉換元件和HCR技術為信號放大手段的比色方法,實現(xiàn)對卡那霉素的檢測。本文的研究內容和結果如下:(1)建立了基于金納米球(AuNPs)和HCR輔助的光學生物傳感方法,實現(xiàn)對牛奶中Kana的檢測。首先根據(jù)Kana設計了含有其適配體HCR發(fā)夾探針,并通過凝膠電泳技術對所設計的發(fā)夾探針進行了表征。隨后,分析了該檢測方法的可行性,并對其關鍵參數(shù)進行了優(yōu)化:AuNPs的較優(yōu)濃度為6.5nM,AuNPs與HCR產(chǎn)物最佳結合時間為30 min,以及最佳測定時間為加鹽后40 min。本研究建立的光學生物傳感方法在2.1... 

【文章來源】:浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:85 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 緒論
    1.1 卡那霉素及其現(xiàn)有檢測方法的研究
        1.1.1 抗生素
        1.1.2 卡那霉素
        1.1.3 現(xiàn)有卡那霉素檢測方法的研究現(xiàn)狀
    1.2 基于金納米材料的光學生物傳感方法的研究
        1.2.1 金納米材料
        1.2.2 金納米材料應用于光學生物傳感方法的研究現(xiàn)狀
    1.3 基于核酸放大技術的光學生物傳感方法的研究
        1.3.1 核酸酶輔助的核酸放大技術
        1.3.2 無酶輔助的核酸放大技術
        1.3.3 HCR應用于光學生物傳感方法的研究現(xiàn)狀
    1.4 研究目的、內容及技術路線
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 研究內容
        1.4.3 技術路線
    1.5 本章小結
第二章 基于HCR放大策略的金納米球比色法檢測卡那霉素的研究
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗試劑與儀器設備
        2.2.2 AuNPs的制備與表征
        2.2.3 基于HCR放大策略的金納米球比色法的建立、表征及參數(shù)優(yōu)化
        2.2.4 卡那霉素檢測標準曲線的建立及其特異性評估
        2.2.5 牛奶中卡那霉素的檢測
    2.3 結果與討論
        2.3.1 AuNPs的基本特性研究
        2.3.2 基于HCR放大策略的金納米球比色法的可行性研究
        2.3.3 基于HCR放大策略的金納米球比色法的參數(shù)優(yōu)化
        2.3.4 基于HCR放大策略的金納米球比色法的檢測性能研究
        2.3.5 基于HCR放大策略的金納米球比色法的特異性評估
        2.3.6 基于HCR放大策略的金納米球比色法在牛奶樣品中的可行性研究
    2.4 本章小結
第三章 基于HCR放大策略的金納米棒比色法的初步研究
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗試劑與儀器設備
        3.2.2 AuNRs的制備、優(yōu)化及表征
        3.2.3 基于HCR放大策略的金納米棒比色法的建立、表征及參數(shù)優(yōu)化
        3.2.4 DNAR檢測標準曲線的建立及其特異性評估
    3.3 結果與討論
        3.3.1 AuNRs的基本特性研究
        3.3.2 基于HCR放大策略的金納米棒比色法的可行性研究
        3.3.3 基于HCR放大策略的金納米棒比色法的參數(shù)優(yōu)化
        3.3.4 基于HCR放大策略的金納米棒比色法的檢測性能研究
        3.3.5 基于HCR放大策略的金納米棒比色法的特異性評估
    3.4 本章小結
第四章 總結與展望
    4.1 主要研究結論
    4.2 主要創(chuàng)新點
    4.3 進一步展望
參考文獻
個人簡歷


【參考文獻】:
期刊論文
[1]我國水體中抗生素的污染現(xiàn)狀、危害及防治建議(綜述)[J]. 殷光權,趙揚,戴前梅.  安徽衛(wèi)生職業(yè)技術學院學報. 2017(05)
[2]基于CdS納米顆粒和HRP-AuNPs-apt的卡那霉素電化學發(fā)光適配體傳感器研究[J]. 宋海燕,康天放,魯理平,程水源.  化學研究與應用. 2017(05)
[3]魚精蛋白-核酸適配體-金納米技術快速檢測牛奶中的卡那霉素[J]. 賈向陽,尤慧艷,付秀麗.  色譜. 2017(03)
[4]當代抗生素發(fā)展的挑戰(zhàn)與思考[J]. 劉昌孝.  中國抗生素雜志. 2017(01)
[5]化學發(fā)光在生化分析中的應用研究進展[J]. 劉萌,王子月,張春陽.  分析化學. 2016(12)
[6]固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法測定畜禽飲用水中23種抗生素和3種β-受體激動劑[J]. 石奧.  色譜. 2016(02)
[7]養(yǎng)殖業(yè)抗生素濫用的控制措施[J]. 張敏.  湖北畜牧獸醫(yī). 2016(02)
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[9]畜禽養(yǎng)殖過程抗生素使用與耐藥病原菌及其抗性基因賦存的研究進展[J]. 隋倩雯,張俊亞,魏源送,陳梅雪,董紅敏,熊繼海.  生態(tài)毒理學報. 2015(05)
[10]金納米棒的制備、生長機理及純化[J]. 魯聞生,王海飛,張建平,江龍.  化學進展. 2015(07)

博士論文
[1]農(nóng)產(chǎn)品中真菌毒素檢測用新型光學納米生物傳感器的研究[D]. 徐霞.浙江大學 2013

碩士論文
[1]基于納米金顆粒和乳膠微球的卡那霉素免疫分析方法的建立及初步應用[D]. 江羚.江蘇大學 2017
[2]抗卡那霉素單克隆抗體的制備及鑒定[D]. 栗寧.鄭州大學 2014
[3]基于核酸信號放大技術的蛋白質測定新方法研究[D]. 陳春霏.湖南大學 2013
[4]基于核酸內切酶及RNA連接酶的循環(huán)放大檢測DNA及腫瘤細胞[D]. 丁天榮.青島科技大學 2012
[5]毛細管電泳法在手性藥物分離分析中的應用研究[D]. 李藝.廣東藥學院 2011



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